快速促进CryptosphaeriapullmanensisH2生长的方法技术

本发明专利技术公开了快速促进Cryptosphaeriapullmanensis H2生长的方法，具体涉及真菌培养领域。所述方法包括采集核桃腐烂病菌分生孢子角、对分生孢子角的溶解、过滤分离，得分生孢子角滤液，用含有分生孢子角滤液的水琼脂对Cryptosphaeriapullmanensis H2菌在培养箱中培养。本发明专利技术的培养方法能够加快Cryptosphaeriapullmanensis H2的生长速度，经过添加分生孢子角H2菌丝生长更加稠密，可以为后续一些相关研究提供很好地研究材料，省时省力。省时省力。省时省力。

【技术实现步骤摘要】
快速促进Cryptosphaeria pullmanensis H2生长的方法


[0001]本专利技术涉及真菌培养领域，具体涉及快速促进Cryptosphaeria pullmanensis H2生长的方法。

技术介绍

[0002]新疆地处中国西北边陲，群山环绕，远离海洋，是中国占地面积最大的省区，据《新疆树木志》记载，新疆乔木、灌木和半灌木书中75科183属871种55个变种。这些乔、灌木树种以及其中一些珍稀濒危的植物都是新疆选育优良林木类型的物质基础，是新疆宝贵的林木种资源。但由于新疆特殊的地理位置，荒漠植被因受地理、地貌、气候、土壤及灌溉等自然条件的限制，许多植物被各种病菌所侵害。各种病菌害导致数目枯死甚至于整株的死亡，严重制约着我国农业、林业及生态环境等各方面的发展。研究致病菌，找到合适的防治措施迫在眉睫。
[0003]隐球壳菌(Cryptosphaeria pullmanensis)是国内外报道的引起杨柳树溃疡病的主要病原菌。但隐球壳菌生长较慢，往往不易获得纯培养。找到能促进该菌快速生长的方法对该菌相关研究的顺利展开奠定一定基础，进而对保护当时生态环境有着重要意义。

技术实现思路

[0004]为此，本专利技术提供快速促进Cryptosphaeria pullmanensis H2生长的方法，以解决现Cryptosphaeria pullmanensis H2生长慢而影响后续研究的问题。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0006]根据本专利技术提供的快速促进Cryptosphaeria pullmanensis H2生长的方法，所述方法包括采集核桃腐烂病菌分生孢子角、对分生孢子角的溶解、过滤分离，得分生孢子角滤液，用含有分生孢子角滤液的水琼脂对Cryptosphaeria pullmanensis H2菌在培养箱中培养。
[0007]进一步的，所述过滤采用的是0.22μm的过滤器过滤。
[0008]进一步的，所述溶解为0.05g分生孢子角溶解于500μL无菌水中。
[0009]进一步的，所述含有分生孢子角滤液的水琼脂的制备方法为将滤液至水琼脂中摇匀，将含有滤液的水琼脂倒板，待培养基凝固即得。
[0010]进一步的，所述含有分生孢子角滤液的水琼脂中，滤液与水琼脂的比例为每200μL的滤液至于150mL的水琼脂中。
[0011]进一步的，所述含有滤液的水琼脂倒板是每150mL水琼脂倒10板。
[0012]进一步的，所述培养箱培养的条件为温度26
‑
28℃，明暗交替培养。
[0013]进一步的，所述培养箱培养的条件为温度26
‑
28℃，暗培养。
[0014]专利技术具有如下优点：
[0015]本专利技术的培养方法能够加快Cryptosphaeria pullmanensis H2的生长速度，并且使菌丝生长更加稠密。该菌本身生长比一般菌长的慢，如果加了分生孢子角这种非常容易
获得的免费材料添加进去可以促使该菌生长加快，可以为后续一些相关研究提供很好地研究材料，成本低，省时省力。
附图说明
[0016]为了更清楚地说明本专利技术的实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。显而易见地，下面描述中的附图仅仅是示例性的，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图引伸获得其它的实施附图。
[0017]本说明书所绘示的结构、比例、大小等，均仅用以配合说明书所揭示的内容，以供熟悉此技术的人士了解与阅读，并非用以限定本专利技术可实施的限定条件，故不具技术上的实质意义，任何结构的修饰、比例关系的改变或大小的调整，在不影响本专利技术所能产生的功效及所能达成的目的下，均应仍落在本专利技术所揭示的
技术实现思路
得能涵盖的范围内。
[0018]图1为本专利技术提供的实施例1和对比例1培养Cryptosphaeria pullmanensis H2菌第4天菌落图；
[0019]图2为本专利技术提供的实施例1和对比例1培养Cryptosphaeria pullmanensis H2菌第7天菌落图；
[0020]图3为本专利技术提供的实施例1和对比例1培养Cryptosphaeria pullmanensis H2菌第10天菌落图；
[0021]图4为本专利技术提供的实施例1和对比例1培养Cryptosphaeria pullmanensis H2菌第15天菌落图；
[0022]图5为本专利技术提供的实施例1水琼脂培养基中加了分生孢子角和对比例1不加分生孢子角以后菌落生长直径测量图；
[0023]图6为本专利技术提供的实施例2和对比例2培养Cryptosphaeria pullmanensis H2菌不同天数的菌落图；其中，1代表第3天；2代表第5天；3代表第7天；4代表第10天；
[0024]图7为本专利技术提供的实施例2中在水琼脂培养基中加了分生孢子角和对比例2不加分生孢子角以后菌落生长直径测量图；
[0025]图中，ABC是对比例1未添加分生孢子角的滤液图；DEF是实施例1添加分生孢子角滤液图；G为实施例2加分生孢子角培养的菌落图，H为对比例2未加分生孢子角滤液培养的菌落图。
具体实施方式
[0026]以下由特定的具体实施例说明本专利技术的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本专利技术的其他优点及功效，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0027]实施例1一种快速促进Cryptosphaeria pullmanensis H2生长的方法
[0028]所述方法包括以下步骤：
[0029]步骤一，采样
[0030]采集核桃腐烂病菌分生孢子角；使用灭菌水清洗，12000r/min离心3min，去上清，
反复清洗3次，去上清；
[0031]步骤二，分离、培养
[0032]取下层分生孢子角到新的离心管中，无菌操作台上，取无菌水至离心管中将分生孢子角溶解(0.05g分生孢子溶解于500μL无菌水中)，用注射器吸取分生孢子角溶解液体，0.22μm的过滤器过滤，滤液至于无菌离心管中，将每200μL的滤液至于150mL的水琼脂中摇匀，每150mL水琼脂倒10板。待到培养基凝固，打Cryptosphaeria pullmanensis H2菌饼，置于培养基中间；放于培养箱中温度26℃，暗培养；并记录不同培养天数的菌落数据。
[0033]步骤三，ITS鉴定
[0034]培养结束后，将孢子悬浮液直接封口膜封口，常温送到上海生工去鉴定，ITS鉴定结果是隐球壳菌Cryptosphaeria pullmanensis。
[0035]步骤四，测序
[0036]从步骤本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.快速促进Cryptosphaeria pullmanensis H2生长的方法，其特征在于，所述方法包括采集核桃腐烂病菌分生孢子角、对分生孢子角的溶解、过滤分离，得分生孢子角滤液，用含有分生孢子角滤液的水琼脂对Cryptosphaeria pullmanensis H2菌在培养箱中培养。2.根据权利要求1所述快速促进Cryptosphaeria pullmanensis H2生长的方法，其特征在于，所述过滤采用的是0.22μm的过滤器过滤。3.根据权利要求1所述快速促进Cryptosphaeria pullmanensis H2生长的方法，其特征在于，所述溶解为0.05g分生孢子角溶解于500μL无菌水中。4.根据权利要求1所述快速促进Cryptosphaeria pullmanensis H2生长的方法，其特征在于，所述含有分生孢子角滤液的水琼脂的制备方法为将滤液至水琼脂中摇匀，将含有滤液的...

【专利技术属性】
技术研发人员：郝海婷，闫成才，王庆朋，李猛，代先行，王春雨，
申请(专利权)人：塔里木大学，
类型：发明
国别省市：