栓皮栎QsSRO1基因及其编码蛋白在植物抗逆中的应用制造技术

本发明专利技术属于基因工程技术领域，具体涉及了栓皮栎QsSRO1基因及其编码蛋白在植物抗逆中的应用。栓皮栎QsSRO1基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，其编码的栓皮栎QsSRO1蛋白氨基酸序列为SEQ ID No.2，是一种细胞核蛋白。通过构建含有栓皮栎QsSRO1基因的重组表达载体，再利用农杆菌转化拟南芥，筛选培育后获得的转QsSRO1拟南芥植株种子在抗盐试验中表现良好。本发明专利技术证明了栓皮栎QsSRO1基因过量表达能够提高植物的抗盐性能，为培育抗盐与抗旱的转基因作物新品种奠定了理论和生产实践基础。因作物新品种奠定了理论和生产实践基础。因作物新品种奠定了理论和生产实践基础。

【技术实现步骤摘要】
栓皮栎QsSRO1基因及其编码蛋白在植物抗逆中的应用


[0001]本专利技术属于基因工程
，具体涉及栓皮栎QsSRO1基因及其编码蛋白在植物抗逆中的应用。

技术介绍

[0002]栓皮栎(Quercus suber)是一种重要的阔叶常绿树种，其生长缓慢、寿命极长。栓皮栎是工业软木的主要来源，软木是一种具有很高商业价值的材料。
[0003]气候变化是21世纪面临的主要挑战和全球性问题之一。近几十年来，由于全球气温上升，引起一系列更强烈、更频繁和持续时间更长的气候极端事件，特别是严重干旱和土壤盐渍化。据报道，土壤盐渍化等多种全球变化会导致栓皮栎数量严重下降。尽管树种可以适应新的环境条件，但对所涉及的过程知之甚少。常规杂交育种是通过不同基因型个体之间的交配而取得双亲基因重新组合的个体的方法。杂交过程并不会产生新基因，且杂交后代会出现性状分离，育种过程缓慢，过程复杂。植物基因工程育种具有使植物定向改变，不受物种限制，育种周期短等特点。目前迫切需要利用基因工程等现代育种技术，进行栓皮栎以确保经济树种的可持续性。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种栓皮栎QsSRO1基因及其编码蛋白在植物抗逆中的应用，提高植物的抗逆性。
[0005]为实现上述专利技术目的，本专利技术提供了如下方案：
[0006]本专利技术第一方面提供了栓皮栎QsSRO1蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID No.2 所示，栓皮栎QsSRO1蛋白的氨基酸序列(SEQ ID NO.2)如下:
[0007]MEANIAKASDRSKRVVLDLKRKRATQLATYLNEVRPTWDSLQNRLDKR RKLNGCQRKDMSYGPSGRSLLKCYSNYVKTGTPKRLMFYQNGEWIDFPQSV VDVVREDFQVKKSAVEVEFNGHRFMLDFLHMSRVDLKTTLQEPIAWIDEADS CFFPETFDCHQPETMEYQDPVLEEPYGPQEIKLLLEIEINGVDQSKLTECSGES NDLVKQIQINSKPASNCYAIDVENSCSRESDAKMDEDFQENKQIPANLVIAPVS ENEEFNCDSVQKLFLVGMGASGRPDILEIYRCESTSLQARFELFQKQAELTQK CRGDANVQYAWLACSKGELPTILTHGLGHCGPSTIKSMYGSGVHLAAAICSY TSANFCDVDENGVQHLVLCQVIMGKMEVVHSGSRQNLPSCKDYDSGVDDLQ NPKIYIVWTMNMNTHIYPEFVVSFKISSKTEGVTSCQVRKHQQLESSAVDLSV SQPVSDSGRSEGKAPSLGSSNTRAPKSPWMPFPMLFAAISEKVSSGVMEKINE HYELFRTKKIGRDEFIKKLRLIVGDALLRSTITNLQCQLPLRSKCEPEVLQPNLE KEKVQHSFN
[0008]本专利技术第二方面提供了编码所述栓皮栎QsSRO1蛋白的栓皮栎QsSRO1基因，其来源于栓皮栎(Quercus suber)。所述的栓皮栎QsSRO1基因，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
[0009]本专利技术还提供含有所述栓皮栎QsSRO1的过表达载体，宿主细胞和工程菌。
[0010]本专利技术第三方面提供了所述栓皮栎QsSRO1基因在调控植物抗盐性能中应用。
[0011]进一步的，提高植物抗逆性能的方法包括：构建含有所述栓皮栎QsSRO1基因的重组表达载体；使用农杆菌介导将所述栓皮栎QsSRO1基因转化到植株中；筛选培养阳性植株。
[0012]进一步的，所述植物包括拟南芥，转基因后的拟南芥植株的T4代种子具有抗盐性。
[0013]与现有技术相比，本专利技术的优点和有益效果是：本专利技术提供一种栓皮栎 QsSRO1基因及其编码蛋白，根据QsSRO1的转基因T4拟南芥植株的抗盐性试验结果显示，于盐溶液中处理时，过量表达QsSRO1基因有助于减轻盐分对植物的伤害，使得QsSRO1的转基因拟南芥对盐有更强的耐受性。因此，本专利技术提供的栓皮栎QsSRO1基因适用于提高拟南芥抗逆性能，尤其是抗盐胁迫能力，栓皮栎QsSRO1基因的功能分析和鉴定还为获得植物新品种提供了理论基础，利用该基因进行分子育种能够培养出具有生产应用价值的抗逆植物，为培育抗盐与抗旱的转基因作物新品种奠定了理论和生产实践基础。
附图说明
[0014]图1为QsSRO1基因在栓皮栎各组织与受盐胁后表达情况。
[0015]图2为QsSRO1基因在栓皮栎受盐胁迫后表达量随时间的变化情况。
[0016]图3为转QsSRO1拟南芥的分子检测结果。
[0017]图4为转QsSRO1基因拟南芥和野生型拟南芥种子在100mM的NaCl处理下萌发7天的观察结果。
[0018]图5为转QsSRO1基因拟南芥和野生型拟南芥种子在100mM的NaCl处理下萌发7天的根长统计结果。
[0019]图6为瞬时转化QsSRO1蛋白亚细胞定位。
具体实施方式
[0020]为了使本
的人员更好地理解本申请中的技术方案，下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本专利技术所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。虽然本专利技术仅描述了优选的方法和材料，但是在本专利技术的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。
[0021]实施例1：栓皮栎QsSRO1基因及其获得方法
[0022]一、栓皮栎QsSRO1的获得方法
[0023]提取栓皮栎的RNA，并以RNA为模板使用TaKaRa PrimeScriptTM RT
试剂盒通过反转录试剂盒法反转录成cDNA。然后将cDNA作为扩增目的基因序列的反应模板，以5
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ATGGCGAATCTACCCCAATCGC
‑3’
和 5
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TCAGTTTCCGGGCTCTGGTTTC
‑3’
为引物进行PCR扩增，得到QsSRO1基因的CDS序列。
[0024]二、通过荧光定量PCR分析QsSRO1基因的组织表达情况
[0025]分别提取栓皮栎根、茎、花的RNA，反转录合成cDNA；然后分别以上述各组织的cDNA为模板，以5
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AGACGGGACGAGGGTTGT
‑3’
和5
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‑3’
为引物进行PCR扩增，检测QsSRO1基因在栓皮栎不同组织中的表达情况。同时以qACTIN基因作为内参，扩增qACTIN基因的5
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引物为：5
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GCGGATAGAATGAGCAAGGAA本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.栓皮栎QsSRO1蛋白，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。2.编码权利要求1所述的栓皮栎QsSRO1蛋白的栓皮栎QsSRO1基因。3.根据权利要求2所述的栓皮栎QsSRO1基因，其特征在于：其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。4.含有权利要求2或3所述栓皮栎QsSRO1基因的载体。5.含有权利要求4所述载体的宿主细胞。6.含有权利要求2或3所述栓皮栎QsSR...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁本起，宋文涛，杨敬杰，黄婷婷，邓传光，于媛媛，
申请(专利权)人：青岛斯坦德衡立环境技术研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：