一种Taq酶突变体及其应用制造技术

技术编号:34355910 阅读:57 留言:0更新日期:2022-07-31 06:35
本发明专利技术属于分子生物学领域,具体涉及一种Taq酶突变体及其应用。具体技术方案为:一种Taq酶突变体,所述Taq酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示。本发明专利技术对野生型Taq酶进行定向进化,提供系列适合于ARMS

A Taq enzyme mutant and its application

【技术实现步骤摘要】
一种Taq酶突变体及其应用


[0001]本专利技术属于分子生物学领域,具体涉及一种Taq酶突变体及其应用。

技术介绍

[0002]扩增阻滞突变型PCR(Amplification Refractory Mutation System PCR,ARMS

PCR,ARMS

PCR),是目前肿瘤个体化分子检测最重要和最先进的技术之一,在临床上被广泛应用。目前ARMS

PCR结合TaqMan探针进行检测的ARMS

qPCR技术广泛应用于肿瘤靶向用药EGFR、KRAS等基因检测,市场上CFDA批准的EGFR的肿瘤靶向药检测试剂盒90%以上都是ARMS

qPCR检测方法。ARMS

PCR采用等位基因特异的两条上游引物,两者在3

端核苷酸不同,一个与野生型等位基因特异互补,另一个与突变型等位基因互补,由于Taq酶没有3

~5

外切酶活性,因此在Taq DNA聚合酶作用下,与模板不完本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种Taq酶突变体A,其特征在于:所述Taq酶突变体A的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示。2.一种Taq酶突变体B,其特征在于:在权利要求1所述Taq酶突变体A的基础上,融和CL7。3.根据权利要求2所述Taq酶突变体B,其特征在于:所述Taq酶突变体B的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。4.一种Taq酶突变体C,其特征在于:对野生型Taq酶进行如下任意一项或几项或全部突变:Val155Ala、Ser486Gln、Glu491Ser、Phe495Ile,将155号的缬氨酸、486号的丝氨酸、491号的谷氨酸、495 号的苯丙氨酸分别突变为丙氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸、异亮氨酸,所述野生型Taq酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1...

【专利技术属性】
技术研发人员:宋东亮马海玲卢瑶巢天慧唐琼卫孙晓亮
申请(专利权)人:翌圣生物科技上海股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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