【技术实现步骤摘要】
一种柑橘DNA快速提取方法
[0001]本专利技术属于植物DNA提取
，具体涉及一种柑橘DNA快速提取方法。
技术介绍
[0002]柑橘属芸香科(Rutaceae)植物，种类繁多。中国作为柑橘重要的原产地之一，拥有丰富的柑橘种类资源和悠久的栽培历史。在前人的研究中，有多种重要的柑橘药材被开发利用，如陈皮、青皮、佛手、香橼、化橘红、枳实、枳壳等。因药材的特殊性，保证其真实性、道地性极为重要，而在制作成药过程中，不同的炮制工艺会改变原料的形态、色泽等，故而造成一些道地性药材很容易被掺假、造假，利用常规手段辨识真伪极为困难，如广陈皮与陈皮、化橘红中的毛橘红与光橘红等。但是，炮制后的药材基因组DNA降解严重，使用市面上现有试剂盒提取的DNA浓度太低且含有较多杂质。
[0003]不同生物间基因组DNA各不相同，所以利用现代分子生物学技术可以有效的鉴定出不同样本材料的来源，包括柑橘类药材。DNA提取是分子生物学试验最基础的试验，也是进行后期基因研究最重要的保证。植物细胞含有细胞壁，含有较多的多糖、多酚等次生代谢产物...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种柑橘DNA快速提取方法，其特征在于：包括如下步骤：1)用流水冲净柑橘叶片，用纸吸干水分后，切取0.1
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0.2cm2植物组织，放入2mL无菌离心管，并放入2颗6mm无菌钢珠，加入1200uL提取液，盖好管盖，放入震荡磨样机，震荡15min得均浆组织；2)取800uL均浆组织，转移入另一新的2mL无菌离心管中，加入800uL酚/氯仿/异戊醇混合液，其中Tris饱和酚:氯仿:异戊醇＝25:24:1的体积比，涡旋混匀，离心，14000rpm，25℃，10min，保留上清液；3)将上步骤得到的700uL上清液转移到一新的无菌2mL离心管中，加入700uL氯仿/异戊醇混合液，其中氯仿:异戊醇＝24:1的体积比，涡旋混匀，离心，14000rpm，25℃，10min，保留上清液；4)取上步骤得到的600uL上清液转移到一新的2mL无菌离心管中，盖好管盖后置于
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20℃冷却5min，加入2倍体积的冰冻100％乙醇和1/10体积的醋酸钠，轻轻翻转离心管10次，混匀液体；5)将上步骤得到的液体离心，14000rpm，4℃，15min，保留滤渣；6)向上步骤得到的滤渣中，加入1mL冰冻70％乙醇，轻轻翻转10次，离心，...
【专利技术属性】
技术研发人员：娄兵海，雷翠云，温玉婷，宋雅琴，李怡杰，黄俊源，武晓晓，
申请(专利权)人：广西特色作物研究院，
类型：发明
国别省市：
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