用于慢病毒载体的瞬时产生的方法和构建体技术

本公开涉及用于使用哺乳动物细胞产生慢病毒载体的方法。具体而言，所述方法利用三种质粒而不是四种质粒来提供所需的包装元件并将载体转移到细胞中，从而允许在哺乳动物细胞中产生大量的慢病毒载体，所述哺乳动物细胞包括基于悬浮的细胞。这些方法允许产生慢病毒载体，所述慢病毒载体可以被定制成包括特定的所关注基因。关注基因。关注基因。

Methods and constructs for instantaneous generation of lentivirus vectors

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于慢病毒载体的瞬时产生的方法和构建体


[0001]本公开涉及用于使用哺乳动物细胞产生慢病毒载体的方法。具体而言，所述方法利用三种质粒而不是四种质粒来提供所需的包装元件并将载体转移到细胞中，从而允许在哺乳动物细胞中产生大量的慢病毒载体，所述哺乳动物细胞包括基于悬浮的细胞。这些方法允许产生慢病毒载体，所述慢病毒载体可以被定制成包括特定的所关注基因。

技术介绍

[0002]慢病毒载体是基因和细胞疗法领域最常用的递送方法之一。在慢病毒载体产生过程中，将产生载体所需的序列分成若干不同的质粒或表达盒，以尽量减少产生具有复制能力的慢病毒(RCL)的机会。一般而言，第3代慢病毒产生系统利用四种不同的质粒或表达盒，所述质粒或表达盒表达：
[0003]1)慢病毒群特异性抗原(GAG)基因和慢病毒聚合酶(POL)蛋白；
[0004]2)囊膜蛋白(通常是水疱性口炎病毒糖蛋白(VSV
‑
G))；
[0005]3)HIV病毒粒子蛋白表达调控子(REV)蛋白；以及
[0006]4)含有所关注基因(GOI)的转移载体(TV)本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种产生慢病毒载体的方法，包含：a.用以下各项转染哺乳动物细胞：i.第一核酸，其编码在第一启动子控制下的慢病毒病毒粒子蛋白表达调控子(REV)基因和在第二启动子控制下的囊膜糖蛋白基因；ii.第二核酸，其编码在第三启动子控制下的所关注基因；以及iii.第三核酸，其编码均在第四启动子控制下的慢病毒群特异性抗原(GAG)基因和慢病毒聚合酶(POL)基因，b.培养经转染的哺乳动物细胞；以及c.分离所述慢病毒载体。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述哺乳动物细胞是哺乳动物细胞培养物。3.根据权利要求2所述的方法，其中所述哺乳动物细胞培养物是悬浮培养物。4.根据权利要求1所述的方法，其中所述哺乳动物细胞是HEK293T细胞。5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述囊膜糖蛋白基因是水疱性口炎病毒糖蛋白(VSV
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：Y，
申请(专利权)人：隆萨沃克斯维尔股份有限公司，
类型：发明
国别省市：