转录调节元件制造技术

本发明专利技术涉及转录调节元件(TRE)，例如启动子，其可用于在细胞如哺乳动物细胞内表达转基因。本发明专利技术还涉及包含可与转基因可操作地连接的此类转录调节元件的多核苷酸和载体，以及基于使用此类载体的基因治疗方法。于使用此类载体的基因治疗方法。

Transcriptional regulatory element

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】转录调节元件
专利

[0001]本专利技术涉及转录调节元件(TRE)，例如启动子，其可用于在细胞如哺乳动物细胞内表达转基因。本专利技术还涉及包含可与转基因可操作地连接的此类转录调节元件的多核苷酸和载体，以及基于使用此类载体的基因治疗方法。
[0002]专利技术背景
[0003]重组腺相关病毒(rAAV)载体由于其有希望的安全性和在体内转导许多组织的能力而具有相当大的基因治疗潜力。使用此类载体的早期临床试验已显示出巨大的前景，包括在接受治疗的患者中长期表达，几乎没有或没有持续毒性和最小的不良免疫反应。
[0004]然而，正如本领域一段时间以来已经认识到的(参见，例如，Chao et al.(2000)Blood,Vol.95(5))，rAAV载体的一个特别的缺点是它们的限制性包装能力。具体而言，野生型(wt)AAV的基因组约为4.6至4.7千碱基(kb)，并且有证据表明rAAV基因组大大超过此长度会导致具有次优效力和质量相关属性的异质颗粒群。当试图为更大的生物分子包含转基因时，这可能会导致问题：例如，全长因子VIII(FVIII)cDNA超本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种转录调节元件，其包含核心核苷酸序列，核心核苷酸序列包含与SEQ ID NO:2具有至少95％同一性的核苷酸序列或与SEQ ID NO:2相差单个核苷酸的核苷酸序列或由其组成；并且其中：a.转录调节元件的长度为80至280个核苷酸，并且：i)转录调节元件不含SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列，或不含SEQ ID NO:5的至少20个、至少30个或至少40个连续核苷酸；和/或ii)转录调节元件不含SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列，或不含SEQ ID NO:4的至少20个、至少30个或至少40个连续核苷酸；或b.转录调节元件的长度为80至280个核苷酸，并且转录调节元件还包含核苷酸序列，所述核苷酸序列位于核心核苷酸序列的5'并且与包含SEQ ID NO:4的至少20个、至少25个、至少30个、至少35个、至少40个或45个连续核苷酸的核苷酸序列具有小于60％的同一性。2.根据权利要求1所述的转录调节元件，其包含与SEQ ID NO:29所示的核苷酸序列具有至少90％同一性、任选地至少95％同一性或任选地至少98％同一性的核苷酸序列或由其组成。3.根据权利要求1所述的转录调节元件，其还包含位于核心核苷酸序列的3'的核苷酸序列，并且任选地其中：a.位于核心核苷酸序列的3'的核苷酸序列包含一个或多个转录起始位点(TSS)；任选地其中一个或多个TSS包含以下的核苷酸序列或由其组成：i.SEQ ID NO:6，或与SEQ ID NO:6相差单个核苷酸的核苷酸序列；ii.SEQ ID NO:7，或与SEQ ID NO:7相差单个核苷酸的核苷酸序列；和/或iii.SEQ ID NO:8，或与SEQ ID NO:8相差单个核苷酸的核苷酸序列；和/或b.位于核心核苷酸序列的3'的核苷酸序列包含：i.SEQ ID NO:6所示的核苷酸序列，或与SEQ ID NO:6相差单个核苷酸的核苷酸序列；或ii.与SEQ ID NO:9具有至少90％同一性的核苷酸序列，或与SEQ ID NO:9相差单个核苷酸的核苷酸序列；或iii.与SEQ ID NO:10具有至少90％同一性的核苷酸序列，或与SEQ ID NO:10相差单个核苷酸的核苷酸序列；和/或c.位于核心核苷酸序列的3'的核苷酸序列还包含由SEQ ID NO:11定义的核苷酸序列，或与SEQ ID NO:11相差单个核苷酸的核苷酸序列；和/或d.位于核心核苷酸序列的3'的核苷酸序列的长度短于50个核苷酸；任选地短于40个核苷酸；并且任选地短于30个核苷酸；和/或e.位于核心核苷酸序列的3'的核苷酸序列包含选自以下的核苷酸序列或由其组成：i.与SEQ ID NO:10具有至少90％或至少95％同一性的核苷酸序列，或与SEQ ID NO:10
相差单个核苷酸的核苷酸序列；ii.与SEQ ID NO:12具有至少90％或至少95％同一性的核苷酸序列，或与SEQ ID NO:12相差单个核苷酸的核苷酸序列；和iii.与SEQ ID NO:13具有至少90％或至少95％同一性的核苷酸序列，或与SEQ ID NO:13相差单个核苷酸的核苷酸序列。4.根据权利要求1或权利要求3所述的转录调节元件，其还包含位于核心核苷酸序列的5'的核苷酸序列，并且任选地其中：a.位于核心核苷酸序列的5'的核苷酸序列包含：i.包含SEQ ID NO:14的至少10个、至少15个或至少20个连续核苷酸的核苷酸序列；ii.与SEQ ID NO:14具有至少90％或至少95％同一性的核苷酸序列，或与SEQ ID NO:14相差单个核苷酸的核苷酸序列；iii.包含SEQ ID NO:15的至少10个、至少15个或至少20个连续核苷酸的核苷酸序列；iv.与SEQ ID NO:15具有至少90％或至少95％同一性的核苷酸序列，或与SEQ ID NO:15相差单个核苷酸的核苷酸序列；v.包含SEQ ID NO:16的至少10个、至少15个、至少20个、至少30个、至少40个、至少50个、至少60个、至少70个、至少80个或至少90个连续核苷酸的核苷酸序列；vi.与SEQ ID NO:16具有至少90％或至少95％同一性的核苷酸序列，或与SEQ ID NO:16相差单个核苷酸的核苷酸序列；和/或vii.由SEQ ID NO:17定义的核苷酸序列，或与SEQ ID NO:17相差单个核苷酸的核苷酸序列；和/或b.位于核心核苷酸序列的5'的核苷酸序列与包含SEQ ID NO:4的至少20个、至少25个、至少30个、至少35个、至少40个或45个连续核苷酸的核苷酸序列具有小于60％的同一性；并且任选地其中位于核心核苷酸序列的5'的核苷酸序列与包含SEQ ID NO:4的至少20个、至少25个、至少30个、至少35个、至少40个或45个连续核苷酸的核苷酸序列具有小于50％的同一性；并且任选地其中它具有小于45％的同一性；并且任选地其中它具有小于40％的同一性；并且任选地其中它具有小于30％的同一性；和/或c.位于核心核苷酸序列的5'的核苷酸序列的长度短于110个核苷酸；任选地短于100个核苷酸；任选地短于50个核苷酸；并且任选地短于10个核苷酸；和/或d.位于核心核苷酸序列的5'的核苷酸序列的长度为5至110个核苷酸；和/或e.位于核心核苷酸序列的5'的核苷酸序列的长度为至少7个核苷酸；和/或f.位于核心核苷酸序列的5'的核苷酸序列的长度为102个核苷酸或更短；和/或g.位于核心核苷酸序列的5'的核苷酸序列包含选自以下的核苷酸序列：i.与SEQ ID NO:18具有至少90％或至少95％同一性的核苷酸序列，或与SEQ ID NO:18
相差单个核苷酸的核苷酸序列；ii.与SEQ ID NO:19具有至少90％或至少95％同一性的核苷酸序列，或与SEQ ID NO:19相差单个核苷酸的核苷酸序列；iii.与SEQ ID NO:20具有至少90％或至少95％同一性的核苷酸序列，或与SEQ ID NO:20相差单个核苷酸的核苷酸序列；iv.与SEQ ID NO:21具有至少90％或至少95％同一性的核苷酸序列，或与SEQ ...

【专利技术属性】
技术研发人员：A，
申请(专利权)人：自由行疗法有限公司，
类型：发明
国别省市：