一种植物乳杆菌CQPC02及其分离方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种植物乳杆菌，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌CQPC02，菌种保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No.14491。还公开了一种植物乳杆菌CQPC02在制备用于预防和/或治疗狼疮性肾炎的产品中的应用。本申请通过建立动物模型观察了植物乳杆菌CQPC02对狼疮性肾炎的干预作用。通过检测小鼠血清中相关指标和炎症相关细胞因子水平确实了植物乳杆菌CQPC02对狼疮性肾炎的效果，并进一步采用病理学观察、组织的mRNA和蛋白基因的表达检测深入的阐明了植物乳杆菌CQPC02的作用机理。乳杆菌CQPC02的作用机理。乳杆菌CQPC02的作用机理。

A Lactobacillus plantarum cqpc02 and its separation method and Application

【技术实现步骤摘要】
一种植物乳杆菌CQPC02及其分离方法和应用


[0001]本专利技术涉及微生物及生物
，具体涉及一种植物乳杆菌CQPC02及其分离方法和应用。

技术介绍

[0002]四川泡菜是中国传统的天然发酵蔬菜。它的生产历史大约有两千年。悠久的生产和使用历史使其成为中国的标志性食品。经常食用泡菜的面积超过2000 万公顷。四川泡菜营养丰富，富含维生素和矿物质元素等有益物质。除了用作配菜外，它还可以与其他食物一起制作美味佳肴。由于四川盆地的地理环境和多民族混合生活的独特生活习惯，四川天然发酵泡菜具备特殊的品质，特别是自然发酵过程中产生了大量的发酵微生物。研究表明，在自然发酵泡菜中发现的微生物可用于食品工业，它们还表现出多种生物活性，包括肠道保护、减肥、抗炎和抗氧化作用。中国四川天然发酵泡菜中的微生物种类繁多，具有良好的开发利用价值，是潜在的益生菌资源来源。
[0003]狼疮性肾炎是一种系统性红斑狼疮，是复杂的免疫失调肾炎，肾衰竭常后出现狼疮性肾炎，发病后会表现出肾小球肾炎的症状。狼疮性肾炎会引起免疫力下降、淋巴结增生和肾小球肾炎等病变，肾脏组织会发生肾小球硬化或弥漫性增生，造成患者的代谢和排毒功能严重受损，最终导致慢性肾功能衰竭，严重的时候会危及生命。大多数狼疮性肾炎发病后表现出B细胞和T细胞的过度激活，T细胞分化为辅助性T细胞，在免疫仅能起到中间过程的角色的作用，但是益生菌存在的情况下可以使更多的T细胞发育为可以化解炎症的调节性T 细胞，直接干预肾炎。益生菌的自身结构成分还可以直接以抗原的方式刺激和激活免疫系统，起到排出体内毒性物质，减轻炎症的作用。在实验性研究中降植烷能够成功构建狼疮性肾炎模型，在科学研究中得到普遍的认同，已经被用于检验药物和保健食品对狼疮性肾炎作用，降植烷能够引起炎症和加强免疫反应，使T细胞出现高度活化，同时也能使B细胞的反应性大幅度增高，由此促发动物产生多种自身抗体，从而发生狼疮性肾炎。

技术实现思路

[0004]本专利技术所要解决的技术问题是：提供一种植物乳杆菌。
[0005]为解决上述技术问题，采用的技术方案为：一种植物乳杆菌，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌CQPC02，菌种保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No.14491。
[0006]所述的植物乳杆菌，其保藏信息如下：
[0007]分类命名:植物乳杆菌；
[0008]拉丁文名称：Lactobacillus plantarum；
[0009]保藏该生物材料样品的单位全称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；
[0010]地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号；
[0011]保藏日期：2017年08月04日保藏中心收到，并登记入册；经保藏中心于 2017年08月04日检测，结果:存活；
[0012]保藏编号：CGMCC No.14491。
[0013]本申请还保护一种植物乳杆菌的分离纯化方法，其步骤包括：分别取1mL 泡菜水样品，用无菌生理盐水进行10倍梯度稀释至10
‑6，然后取10
‑4、10
‑5、 10
‑6，3个梯度的菌液100μL进行平板涂布，37℃培养24
‑
48h，观察并记录菌落形态；挑取平板上不同形态的菌落进行划线分离，经37℃培养48h后，再次挑取平板上不同形态的单菌落进行划线分离，如此重复2至3次，直至得到形态一致的纯的单菌落。
[0014]本申请还保护一种植物乳杆菌CQPC02在制备用于预防和/或治疗狼疮性肾炎的产品中的应用。
[0015]所述产品为食品、保健品或药品。
[0016]本申请还保护一种用于预防和/或治疗狼疮性肾炎的产品，其活性成分为植物乳杆菌，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌CQPC02，其保藏编号为CGMCC No. 14491。
[0017]本申请还保护一种产品，其活性成分为植物乳杆菌，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌CQPC02，其保藏编号为CGMCC No.14491。
[0018]所述产品为食品、保健品或药品。
[0019]有益效果：植物乳杆菌CQPC02是本研究团队从四川红原采集到的藏族牧民家庭自制自然发酵酸乳中分离鉴定的一株乳酸菌，其基本体外抗性较好，在 pH＝3.0人工胃液中的存活率超过90％，在0.3％胆盐中的生长效率接近70％。
[0020]本申请通过建立动物模型观察了植物乳杆菌CQPC02对狼疮性肾炎的干预作用。通过检测小鼠血清中相关指标和炎症相关细胞因子水平确实了植物乳杆菌CQPC02对狼疮性肾炎的效果，并进一步采用病理学观察、组织的mRNA和蛋白基因的表达检测深入的阐明了植物乳杆菌CQPC02的作用机理。
附图说明
[0021]图1小鼠肾脏组织的H&E染色切片；
[0022]图2小鼠肾组织中的mRNA表达。
具体实施方式
[0023]下面结合实施例对本专利技术的方法予以进一步地说明，但并不因此而限制本专利技术。
[0024]一种植物乳杆菌的分离纯化方法，其步骤包括：分别取1mL泡菜水样品，用无菌生理盐水进行10倍梯度稀释至10
‑6，然后取10
‑4、10
‑5、10
‑6，3个梯度的菌液100μL进行平板涂布，37℃培养24
‑
48h，观察并记录菌落形态；挑取平板上不同形态的菌落进行划线分离，经37℃培养48h后，再次挑取平板上不同形态的单菌落进行划线分离，如此重复2至3次，直至得到形态一致的纯的单菌落。
[0025]1材料与方法
[0026]1.1材料与试剂
[0027]植物乳杆菌CQPC02分离鉴定于重庆南岸区的家庭自然发酵泡菜，菌种保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，专利保藏号为CGMCCNo.14491。
[0028]SPF级六周龄的雌性C57BL/J6小鼠，体重为23
±
2g，购于重庆医科大学实验动物中心，生产许可证号为SCXK(渝)2018
‑
0003。本研究中的动物实验经重庆市功能性食品协同创新中动物实验伦理委员会批准，批准号为 2021050007B。
[0029]降植烷上海麦克林生化科技有限公司；总蛋白(TP)、血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、白蛋白(ALB)测定试剂盒南京建成生物工程研究所；辣根过氧化物酶美国Sigma公司；IL
‑
6、 IL
‑
12、TNF
‑
α和IFN
‑
γ检测试剂盒上海酶联生物科技有限公司；TRIzol试剂美国Invitrogen公司；SYBR Green PCR Master Mix、qPCR引物、SDS
‑
PAGE 预制胶、一抗、二抗美国Thermo Fisher Scientific公司；蛋白浓度测定试剂盒美国Bio
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种植物乳杆菌，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌CQPC02，菌种保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No.14491。2.权利要求所述的一种植物乳杆菌的分离纯化方法，其步骤包括：分别取1mL泡菜水样品，用无菌生理盐水进行10倍梯度稀释至10
‑6，然后取10
‑4、10
‑5、10
‑6，3个梯度的菌液100μL进行平板涂布，37℃培养24
‑
48h，观察并记录菌落形态；挑取平板上不同形态的菌落进行划线分离，经37℃培养48h后，再次挑取平板上不同形态的单菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵欣，
申请(专利权)人：重庆第二师范学院，
类型：发明
国别省市：