一种妊娠子痫前期诊断生物标记物和应用及试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种妊娠子痫前期诊断生物标记物和应用及试剂盒，涉及生物医药领域。本申请发现了αPS IgG抗体水平与子痫前期凝血功能的相关性，与健康对照比子痫前期患者的血浆αPSlgG抗体升高了0.47倍，具有显著的差异。αPS IgG抗体可以作为妊娠子痫前期诊断的生物标记物，未来有可能将αPS IgG抗体检测应用于子痫前期的临床诊断，目前也可以作为现有子痫前期筛查和诊断的有效补充手段。并且与现有总IgG检测相比，αPS抗体特异性更强，检测灵敏度更高。度更高。度更高。

【技术实现步骤摘要】
一种妊娠子痫前期诊断生物标记物和应用及试剂盒


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，尤其涉及一种妊娠子痫前期诊断生物标记物和应用及试剂盒。

技术介绍

[0002]子痫前期(preeclampsia)是一种以妊娠20周后新发高血压和蛋白尿为特征的全身性血管疾病，起源于母胎界面，影响多个器官系统，属于妊娠期高血压疾病的一种。子痫前期进展迅速，目前尚无除及时终止妊娠以外的有效治疗手段，因此子痫前期造成医源性早产、剖宫产比例增加，严重损害母婴健康。目前临床上能够用于在孕早期进行子痫前期预测和诊断的生物学标记物仍然十分匮乏，因此无法对子痫前期高危人群进行有效的筛查。子痫前期的发病机制包括胎盘浸润异常、氧化和内质网应激、1型血管紧张素II受体自身抗体、血小板和凝血酶激活、血管内炎症、内皮功能障碍和抗血管生成状态的存在，其中凝血功能紊乱是子痫前期发病机制中的重要环节之一。
[0003]目前高血压以及蛋白尿被公认为典型的诊断子痫早期的基本标准，但是本病会和慢性肾炎、隐匿性肾炎、妊娠合并慢性高血压疾等有相似之处。此外，一些患者出现HELLP综合征(溶血、肝转氨酶升高、血小板减少)也被认为是子痫前期的一种形式，但它不符合典型的诊断标准。因此，迫切需要与临床指标相关性更好的检测指标辅助进行子痫前期在妊娠早期的预测诊断，预测患者肝功能损害、肾功能损害甚至妊娠终止等危险结局事件。

技术实现思路

[0004]本专利技术提供了一种妊娠子痫前期诊断生物标记物和应用及试剂盒，以提供一种。
[0005]为了解决上述技术问题，本专利技术目的之一提供了一种妊娠子痫前期诊断生物标记物，所述生物标记物为αPS IgG抗体。
[0006]为了解决上述技术问题，本专利技术目的之二提供了一种妊娠子痫前期诊断生物标记物在制备妊娠子痫前期诊断试剂盒中的应用。
[0007]为了解决上述技术问题，本专利技术目的之三提供了一种妊娠子痫前期诊断试剂盒，包括用于检测αPS IgG抗体的试剂。
[0008]作为优选方案，所述试剂用于检测妊娠早期12周的血浆样品中αPS IgG抗体浓度。
[0009]作为优选方案，所述试剂包括有稀释液，所述血浆样品用稀释液按比例1：100稀释。
[0010]作为优选方案，在妊娠12周时，所述αPS IgG抗体OD 450nm浓度在以上时，诊断为妊娠子痫前期。
[0011]在实验过程中，由于αPS
‑
IgG的浓度可能会随孕周的改变而改变，在妊娠12周时，子痫前期孕妇患者αPS lgG抗体在450nm处的OD值平均值为0.4955，最大值为0.8835，最小值为0.3325；健康孕妇对照αPS lgG抗体在450nm处的OD值平均值为0.3380，最大值为0.54，最小值为0.2085。设定的患有子痫前期的标准线以包含75％的样本数为标准，因此定在
0.42。
[0012]作为优选方案，所述试剂为酶联免疫吸附法检测试剂。
[0013]作为优选方案，所述试剂包括：牛血清白蛋白
‑
磷脂酰丝氨酸偶联物、Biotin
‑
IgG抗体。
[0014]作为优选方案，所述试剂还包括：含0.5％明胶和0.5％牛血清白蛋白的PBST封闭液、PBS稀释液、含0.05％Tween20的PBST洗涤液、链酶亲和素
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辣根过氧化物酶、TMB显色液、TMB终止液。
[0015]相比于现有技术，本专利技术实施例具有如下有益效果：
[0016]本申请发现了αPS IgG抗体水平与子痫前期凝血功能的相关性，与健康对照比子痫前期患者的血浆αPSlgG抗体升高了0.47倍，具有显著的差异，未来有可能将αPS IgG抗体检测应用于子痫前期的临床诊断，目前也可以作为现有子痫前期筛查和诊断的有效补充手段。并且与现有总IgG检测相比，αPS抗体特异性更强，检测灵敏度更高。
附图说明
[0017]图1：为本专利技术实施例一其中一名子痫前期孕妇患者在孕12周取血浆样品按不同稀释比例的αPS IgA、αPS IgG、αPS IgM抗体水平；
[0018]图2：为本专利技术实施例一中子痫前期孕妇患者和健康孕妇在孕12周取血浆样品1：100比例稀释后的αPS IgA、αPS IgG、αPS IgM抗体水平(注：P：子痫前期孕妇患者；C：健康孕妇；ns：无统计差异；*：p<0.05,****；p<0.0001)；
[0019]图3：为本专利技术实施例二中子痫前期孕妇患者和健康孕妇在孕12周取血浆样品1：100比例稀释后的总IgG抗体水平(注：P：子痫前期患者；C：健康对照；ns：无统计差异；*：p<0.05)。
具体实施方式
[0020]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0021]现有的研究显示，子痫前期患者妊娠早期凝血酶生成过多，过多的凝血酶生成可能与内皮细胞功能障碍、血小板活化、单核细胞趋化性、淋巴细胞增殖、中性粒细胞活化或响应促炎细胞因子(如IL
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1β和TNF)活性的组织因子过度生成有关。而自身抗体是否能够用于临床子痫前期的诊断目前仍然未知，子痫前期的预测生物标志物尚处于缺乏状态，且目前认为子痫前期与免疫功能具有较大的相关性，而自身抗体αPS尚未应用于临床，与子痫前期患者凝血功能、肾功能等病理进程的相关性尚未可知。
[0022]凝血酶原(prothrombin)是一种由肝脏合成的维生素K依赖性凝血因子，在激活的因子V和由血小板或其他细胞提供的磷脂表面存在的条件下，被激活的因子X激活形成凝血酶，使血液中纤维蛋白原转变为纤维蛋白，激发凝血过程。抗凝血酶原抗体αPT为非中和性抗体，促进凝血酶原与磷脂或内皮细胞表面结合，导致凝血酶原局部浓度升高。而与抗体结合的凝血酶原仍可正常活化成凝血酶，激发凝血过程，产生局部血栓。
[0023]磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine，PS)是真核细胞膜的重要组成部分，是真核细胞中含量最丰富的阴离子磷脂，占细胞总脂质的10％。与所有脂质一样，PS的功能由其在细胞器膜中的浓度和侧面决定，体内平衡中，PS位于细胞质膜的胞质侧。当细胞受到特定刺激后，PS从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的外表面，暴露在细胞外环境中。PS翻转至细胞外膜外侧在细胞凋亡及凝血级联反应启动过程中起关键作用。在组装凝血酶原酶复合物时，凝血因子Xα在Ca
2+
离子存在下与其辅因子凝血因子Vα和凝血酶原与活化血小板膜上的PS结合，激活凝血酶原为凝血酶，促进纤维蛋白原转变为纤维蛋白，引起血液凝固。凝血因子
Ⅷ
同样可与血小板表面表达的PS结合，这也是血管内凝血的关键步骤。凝血酶原通常与带负电荷本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种妊娠子痫前期诊断生物标记物，其特征在于，所述生物标记物为αPS IgG抗体。2.一种如权利要求1所述的妊娠子痫前期诊断生物标记物在制备妊娠子痫前期诊断试剂盒中的应用。3.一种妊娠子痫前期诊断试剂盒，其特征在于，包括用于检测αPS IgG抗体的试剂。4.如权利要求3所述的一种妊娠子痫前期诊断试剂盒，其特征在于，所述试剂用于检测妊娠早期12周的血浆样品中αPS IgG抗体浓度。5.如权利要求4所述的一种妊娠子痫前期诊断试剂盒，其特征在于，所述试剂包括有稀释液，所述血浆样品用稀释液按比例1：100稀释。6.如权利要求3所述的一种妊娠子痫前期诊断试剂盒，其特征在于，在妊娠12周时，所述αPS IgG抗体OD 450...

【专利技术属性】
技术研发人员：马孔阳，秦任材，郑智华，关慧，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：