一种链霉菌复合菌剂的制备和应用制造技术

本发明专利技术属于农业微生物领域，本发明专利技术公开了一种链霉菌复合菌剂的制备和应用。本发明专利技术提供的微白黄链霉菌W68采用液固两相法制备种子，其中的固体种子培养物可以连续传代三次。将制备的微白黄链霉菌菌剂与芽孢杆菌复配制备复合微生物菌剂，不仅具有防治植物病害的效果，还可以提高产量，具有较好的经济效益。具有较好的经济效益。具有较好的经济效益。

【技术实现步骤摘要】
一种链霉菌复合菌剂的制备和应用


[0001]本专利技术属于农业微生物领域，主要涉及一种链霉菌复合菌剂的制备和应用。

技术介绍

[0002]公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
[0003]链霉菌因可以产生种类丰富、结构多样的次级代谢产物而闻名，目前许多链霉菌物种的活菌制剂或者次级代谢产物已经广泛应用于医学、工业和农业中。
[0004]在我国农业生产中，作为微生物菌剂或微生物肥料登记的链霉菌物种，数量最多的分别是细黄链霉菌、弗氏链霉菌、娄彻氏链霉菌和密旋链霉菌，但链霉菌生防产品的数量比例却占生防产品总数量的不到2％。究其原因链霉菌的发酵工艺是制约链霉菌大规模产业化的关键因素。与芽孢类产品不同，链霉菌在液体中很难形成孢子，因此，无法利用目前市场上很成熟的液体发酵体系进行大规模生产，只能采用固体发酵工艺生产链霉菌的孢子制剂。目前我国各公司采用的固体发酵工艺存在占用空间大、操作批量小的特点，导致链霉菌产品无法大批量产出。因此，优化链霉菌的工厂化固体发酵工艺参数具有重要意义。
[0005]微白黄链霉菌W68是一株对多种植物病害具有显著防治效果的新型链霉菌，可以作为微生物肥料或微生物农药进行使用(ZL20610207349.1、ZL201610206913.8)。本专利技术开展了该菌株的发酵工艺和扩大化生产步骤的相关工作。

技术实现思路

[0006]为了解决上述问题，本专利技术提供了一种适合工厂化生产微白黄链霉菌W68菌剂的固体发酵工艺。
[0007]为实现上述技术目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0008]本专利技术的第一个方面，提供了一种链霉菌复合菌剂的制备方法，包括：
[0009]将链霉菌活化，形成单菌落；
[0010]将单菌落接种至2
×
YT培养基或NM培养基中，进行培养，形成液体种子培养物；
[0011]将液体种子培养物接种于固体种子培养基中，静置培养后，摇晃发酵物使其充分混匀，继续培养3
‑
4天，获得新鲜的一代固体种子培养物；
[0012]将获得的固体种子培养物进行连续三代培养；
[0013]将每批新鲜的固体种子培养物接种于固体发酵培养基中，静置培养2
‑
3天后，翻动发酵物使其充分混匀，继续培养3
‑
4天，自然风干后，获得的固体发酵培养物，即得微白黄链霉菌W68菌剂。与其他芽孢杆菌按照不同比例复配，即得微白黄链霉菌复合菌剂。
[0014]本专利技术的第二个方面，提供了上述的方法制备的链霉菌复合菌剂。
[0015]本专利技术的第三个方面，提供了上述的链霉菌复合菌剂在防治植物病害和/或促进植物生长中的应用。
[0016]本专利技术的有益效果在于：
[0017](1)本专利技术的固体发酵工艺，固体种子可传代三次，满足工业化生产中大规模发酵的需求，既缩短时间，又不产生废弃污染物，具有环保的优点。
[0018](2)本专利技术的复合微生物菌剂，不仅具有防治植物病害的功能，同时还具有促进植物生长的功能，达到有病治病，无病促生的功效。
[0019](3)本专利技术提供的微白黄链霉菌W68菌剂和微白黄链霉菌W68与芽孢杆菌复合菌剂，既可以应用于普通蔬菜作物，还可以应用于棉花等经济作物上。
[0020](4)为了实现链霉菌的工厂化固体发酵，本专利技术系统研究了微白黄链霉菌W68的发酵特性，经过实验摸索发现：在制备链霉菌种子培养物时，将液体发酵技术和固体发酵技术联合使用，共同作为制备微白黄链霉菌W68种子培养物的发酵步骤之一，缺一不可，比单独使用液体种子或单独使用固体种子提高了生产效率。其中，第一代的固体种子培养物可以连续传代三次，即每一代种子培养物不仅可以扩大生产链霉菌发酵产物，还可以保持活力，制备下一代种子培养物，从而缩短了单批种子制备时间，提高了生产效率。
[0021](5)本专利技术采用分批次发酵，三批发酵时间17
‑
23天，采用本专利技术的连续发酵，只需13
‑
15天，缩短了4
‑
8天时间；
[0022](6)本专利技术减少了2次液体发酵的工作量。
[0023](7)本申请的操作方法简单、成本低、具有普适性，易于规模化生产。
附图说明
[0024]构成本专利技术的一部分的说明书附图用来提供对本专利技术的进一步理解，本专利技术的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的不当限定。
[0025]图1为本专利技术的工艺流程图。
具体实施方式
[0026]应该指出，以下详细说明都是示例性的，旨在对本专利技术提供进一步的说明。除非另有指明，本专利技术使用的所有技术和科学术语具有与本专利技术所属
的普通技术人员通常理解的相同含义。
[0027]本专利技术的目的之一是提供一种适合工厂化生产微白黄链霉菌W68菌剂的固体发酵工艺。
[0028]本专利技术提供的发酵工艺包括两个过程：第一是通过液固发酵法，制备微白黄链霉菌W68的固体种子接种物。第二是通过固固发酵法，制备微白黄链霉菌W68的固体菌剂。其中固体种子接种物可以连续传代三次使用，满足微白黄链霉菌W68规模化生产的需要。
[0029]微白黄链霉菌W68的液体发酵培养基为2
×
YT培养基，或者是NM培养基。
[0030]微白黄链霉菌W68的固体种子培养基由以下重量份的组分组成：40目麸皮400
‑
500份、氯化钠1
‑
2份、碳酸钙4
‑
5份、黄豆粉20
‑
30份、甘露醇20
‑
30份，添加适量水至含水率为20
‑
30％。
[0031]微白黄链霉菌W68的固体发酵培养基为40目麸皮400
‑
500份、草炭土80
‑
100份、氯化钠2
‑
3份、碳酸钙5
‑
6份、黄豆粉10
‑
20份、甘露醇10
‑
20份，添加适量水至含水率为50
‑
60％。
[0032]上述两种固体培养基经过高温灭菌处理。
[0033]液体种子培养物的制备：将平皿活化的菌落接种于液体培养基中，28度，200转/分钟，培养48小时。
[0034]固体种子培养物的制备：将液体种子培养物按照20％的比例接种于固体种子培养基中，28度静置培养2
‑
3天后，摇晃发酵物使其充分混匀，继续培养3
‑
4天后可以获得新鲜的固体种子培养物。
[0035]固体种子培养物的连续三代培养：
[0036]固体发酵培养物的制备：将新鲜的固体种子培养物按照10％的比例接种于固体发酵培养基中，28度静置培养2
‑
3天后，翻动发酵物使其充分混本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种链霉菌复合菌剂的制备方法，其特征在于，包括：将链霉菌活化，形成单菌落；将单菌落接种至2
×
YT培养基或NM培养基中，进行培养，形成液体种子培养物；将液体种子培养物接种于固体种子培养基中，静置培养后，摇晃发酵物使其充分混匀，继续培养3
‑
4天，获得新鲜的一代固体种子培养物；将获得的固体种子培养物进行连续三代培养；将每批新鲜的固体种子培养物接种于固体发酵培养基中，静置培养2
‑
3天后，翻动发酵物使其充分混匀，继续培养3
‑
4天，自然风干后，获得的固体发酵培养物，即得。2.如权利要求1所述的链霉菌复合菌剂的制备方法，其特征在于，固体种子培养基由以下重量份的组分组成：麸皮400
‑
500份、氯化钠1
‑
2份、碳酸钙4
‑
5份、黄豆粉20
‑
30份、甘露醇20
‑
30份，添加适量水至含水率为20
‑
30％。3.如权利要求2所述的链霉菌复合菌剂的制备方法，其特征在于，所述麸皮的目数为40～50目。4.如权利要求1所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：张振颖，黄俊，李少杰，张龙，孙宪昀，胡成成，
申请(专利权)人：中国科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：