一种免疫磁性增强检测羊皮革的方法技术

本发明专利技术涉及文物检测领域，本发明专利技术公开了一种免疫磁性增强检测羊皮革的方法，包括纳米CuO的制备、纳米免疫磁珠的制备、功能化纳米磁珠微粒的制备、特异性磁珠的制备、特异性CuO的制备，以及将特异性磁珠和特异性CuO加入待测的羊皮革蛋白溶液中，震荡孵育，离心后移去上清液，置于双氧水中，将所得氧气通入压力传感器。本发明专利技术结合抗原抗体与压力传感器，提供了具免疫特异性优点的羊皮革蛋白检测方法，特异性更强、检出限更低。检出限更低。

【技术实现步骤摘要】
一种免疫磁性增强检测羊皮革的方法


[0001]本专利技术涉及文物检测领域，尤其涉及一种免疫磁性增强检测羊皮革的方法。

技术介绍

[0002]我国是较早使用纺织品的国家之一，这些纺织品见证了我国社会更替、经济发展和文化交融，是研究我国古代社会经济技术文化水平的珍贵史料。目前出台的纺织品文物中大多数是蛋白质类文物，其中皮革类纺织品易受到墓葬环境中水分、温度、酸碱度及微生物等影响而发生老化分解，损毁严重。针对皮革类文物种属鉴别，寻找一种灵敏度高、特异性强、简单快捷、高效的种属鉴别方法对研究我国皮革类文物的起源有着重大意义，同时对中国几千年服饰文化的研究提供了新的科学依据。

技术实现思路

[0003]为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种免疫磁性增强检测羊皮革的方法。
[0004]本专利技术的具体技术方案为：一种免疫磁性增强检测羊皮革的方法，包括以下步骤：步骤1：纳米CuO的制备：取硝酸铜溶液和碳酸钠溶液混匀，得到Cu，超声分散，在160
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200℃温度下反应4
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8h后，真空抽滤，将所得本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种免疫磁性增强检测羊皮革的方法，其特征在于包括以下步骤：步骤1：纳米CuO的制备：取硝酸铜溶液和碳酸钠溶液混匀，超声分散，在160
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200℃温度下反应4
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8h后，真空抽滤，将所得粉末先后用水、无水乙醇洗涤，最后干燥，得到纳米CuO；步骤2：纳米免疫磁珠的制备：将草酸铁、十二烷二醇、葡聚糖及油酸加入到乙醇中溶解，得到混合溶液；将所得混合溶液加热反应后冷却，得到含有反应产物的冷却溶液；将冷却溶液中的反应产物洗涤后得到纳米免疫磁珠；步骤3：功能化纳米磁珠微粒的制备：取纳米免疫磁珠，加水，超声分散均匀，再加入氯仿，无水乙醇，然后加入丙烯酰胺，乙腈和甲基丙烯酸，室温下快速搅拌，充分混匀后，加入引发剂偶氮二异丁腈，加热快速搅拌反应，利用外磁场进行固液分离，得到功能化纳米磁珠微粒，用无水乙醇和水反复洗涤，直至洗去多余的有机物；步骤4：特异性磁珠的制备：将功能化纳米磁珠微粒加入到磷酸氢二钠
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磷酸二氢钠缓冲液中，超声分散；加入戊二醛溶液，水浴振荡反应；磁性分离固液相，用磷酸氢二钠
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磷酸二氢钠缓冲液清洗，将活化后的磁珠分散于磷酸氢二钠
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磷酸二氢钠缓冲液中，得到活化磁珠溶液，在活化磁珠溶液中加入羊皮革蛋白抗体并震荡，洗涤后加入BSA混匀反应，洗涤后得到特异性磁珠；步骤5：特异性CuO的制备：取纳米CuO于PBS中超声，向所得分散液中加入羊皮革蛋白抗体，震荡；将其冷冻离心后移去上层清液，分散于PBS中，再冷冻离心后移去下层底物，加入BSA溶液，混匀反应，制得特异性CuO；步骤6：将所得特异性磁珠和特异性CuO加入待测的羊皮革蛋白溶液中，震荡孵育，离心后移去上清液，置于双氧水中，将所得氧气通入压力传感器。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1具体为：取25
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35mL 3
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7mg/mL的硝酸铜溶液和25
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35mL 8
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12mg/mL的碳酸钠溶液混匀，并超声分散0.5
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1h，在160
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200℃温度下反应4
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8h后，真空抽滤，将所得粉末先后用水、无水乙醇洗涤，最后在80
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100℃中干燥1.5
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2h，得到纳米CuO。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2具体为：将1.5
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2.5mmol草酸铁、8
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12mol十二烷二醇、0.6
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1.0g葡聚糖及4
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8mol油酸加入20
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30mL乙醇中溶解，得到混合溶液；将所得混合溶液在180
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250℃下反应5
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30min后冷却，得到含有反应产物的冷却溶液；将冷却溶液中的反应产物洗涤后得到免疫磁珠。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤3具体为：取0.3
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0.5g纳米免疫磁珠，加入20mL水，超声分散均匀，再加入8
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【专利技术属性】
技术研发人员：王秉，邓烨丰，刘锋，邵帅，阮晟超，彭志勤，万军民，
申请(专利权)人：浙江理工大学，
类型：发明
国别省市：