用大分子调节剂进行IL-17靶接合测定的组合物和方法技术

本发明专利技术提供了测量包含IL

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用大分子调节剂进行IL
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17靶接合测定的组合物和方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请根据《美国法典》第35条第119款第(e)项的规定要求2020年9月14日提交的美国临时申请号63/077,992、2020年1月12日提交的美国临时申请号62/960,031和2019年9月30日提交的美国临时申请号62/908,195的权益，其全部公开内容据此以引用方式并入本文。
[0003]以电子方式提交的参考序列表
[0004]本申请含有序列表，该序列表以电子方式经由EFS
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Web作为ASCII格式化序列表提交，文件名为“004852.11712/142W02(JBI6359WOPCT1)”，并且创建日期为2020年9月23日，大小为24kb。经由EFS
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Web提交的该序列表是本说明书的一部分并且全文以引用方式并入本文。

技术介绍

[0005]白介素
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17A(IL
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17或IL
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17A)是由活化的Thl7细胞、CD8+T细胞、γδT细胞和NK细胞响应于细胞因子诸如IL
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23和TGF
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β而分泌的细胞因子。IL
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17调节由包括上皮细胞、成纤维细胞和滑膜细胞的多种细胞类型产生的介体，诸如抗微生物肽、促炎细胞因子和趋化因子，这些介体参与中性粒细胞的募集和炎症或宿主防御中组织损伤的病理学。IL
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17也与其它细胞因子(诸如TNF
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α和IL
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Iβ)协同作用以增强促炎环境。
[0006]由于其参与免疫调节功能，IL
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17的抑制剂正被研究作为各种自身免疫性疾病的可能治疗。抗IL
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17单克隆抗体(mAb)在临床上被验证用于治疗银屑病、银屑病性关节炎、强直性脊柱炎，并且已经证明了用于治疗多发性硬化症的概念证明。
[0007]尽管抗IL
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17单克隆抗体(下文称为IL
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17的大分子(LM)调节剂)具有临床实用性，但仍缺乏针对IL
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17的LM调节剂的靶接合测定。具体地，在涉及LM调节剂的研究中，本领域中可商购获得的测定通常仅能够测量包含IL
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17和LM调节剂的生物样品中游离IL
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17的量，而不能测量LM结合的IL
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17的量。此外，尽管Peng等人开发了一种特异性针对一种抗IL
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17抗体即MCAF5352A测量靶接合的测定，但该方法展示了用单一抗体的实用性。参见，即，Peng等人，Measurement of IL
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17AA and IL
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17FF as Pharmacodynamic Biomarkers to Demonstrate Target Engagement in the Phase I Study of MCAF5352A,The AAPS Journal(2019)21:9)。因此，缺乏关于多种LM调节剂的IL
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17靶接合水平的信息。
[0008]此外，尽管已使用疾病相关的生物标志物来监测患者中的抗IL
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17治疗作用，但是还未开发出生物标志物来监测健康受试者中的抗IL
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17作用，该健康受试者通常包括在临床评估的早期阶段。因此，可证明IL
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17LM调节剂与受试者(例如，人)中的IL
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17的靶接合的测量对于通过临床研究推进LM调节剂是重要的。还另外需要一种或多种方法来评估样品中LM调节剂的IL
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17接合，以研究临床相关参数，诸如药代动力学(PK)和药效学(PD)信息，这继而可帮助确定用于安全和有效疗法的最佳剂量。因此，仍然需要一种稳健的免疫测定来评估总IL
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17的量(例如，结合和未结合到LM调节剂的IL
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17)，并且进一步提供涉及较大数量的LM调节剂的样品中的靶接合信息。

技术实现思路

[0009]在一般方面，本申请涉及一种免疫测定，其可检测包含IL
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17和LM调节剂的样品中的总IL
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17(即游离IL
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17和调节剂结合的IL
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17两者)，使得可通过从总IL
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17的水平中减去游离IL
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17的水平来评估LM调节剂的靶接合。
[0010]本文提供了一种确定包含IL
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17和IL
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17的大分子(LM)调节剂的样品中IL
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17(游离IL
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17和LM调节剂结合的IL
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17)的总量的方法，该方法包括：
[0011]i.使样品与捕获抗体接触以形成包含第一复合物和第二复合物的混合物，该第一复合物包含捕获抗体和未结合到LM调节剂的IL
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17，该第二复合物包含捕获抗体和结合到LM调节剂的IL
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17；
[0012]ii.使来自步骤i)的混合物与检测剂接触，从而形成包含捕获抗体、未结合到LM调节剂的IL
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17和检测剂的第三复合物，以及包含捕获抗体、结合到LM调节剂的IL
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17和检测剂的第四复合物；以及
[0013]iii.通过测量第三复合物和第四复合物中检测剂的量来确定总IL
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17的量，
[0014]其中，该捕获抗体是抗IL
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17抗体AF
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317，并且该检测剂是mAb4538。
[0015]在该方法的另一个实施方案中，在步骤(ii)中使来自步骤i)的第一混合物与检测剂接触之前执行洗涤步骤。
[0016]在该方法的另一个实施方案中，LM调节剂具有在约2,000道尔顿
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250,000道尔顿、或约5,000道尔顿
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160,000道尔顿范围内的分子量。
[0017]在该方法的另一个实施方案中，LM调节剂选自由以下项组成的组：苏金单抗(secukinumab)、mAb7024和mAb732，优选地该LM调节剂是苏金单抗或mAb7024。
[0018]在该方法的另一个实施方案中，检测剂用可检测标记进行标记。
[0019]在该方法的另一个实施方案中，可检测标记是酶或生物素。
[0020]在该方法的另一个实施方案中，样品是从用LM调节剂离体或体内治疗的受试者获得的生物样品。
[0021]在该方法的另一个实施方案中，受试者是哺乳动物，优选地人。
[0022]在该方法的另一个实施方案中，生物样品选自由以下项组成的组：由细胞、组织或血清、血浆或另一生物流体样本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种确定包含IL
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17和IL
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17的大分子（LM）调节剂的样品中IL
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17（游离IL
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17和LM调节剂结合的IL
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17）的总量的方法，所述方法包括：i. 使所述样品与捕获抗体接触以形成包含第一复合物和第二复合物的混合物，所述第一复合物包含所述捕获抗体和未结合到所述LM调节剂的IL
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17，所述第二复合物包含所述捕获抗体和结合到所述LM调节剂的IL
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17；ii. 使来自步骤i)的所述混合物与检测剂接触，从而形成包含所述捕获抗体、未结合到所述LM调节剂的IL
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17和所述检测剂的第三复合物，以及包含所述捕获抗体、结合到所述LM调节剂的IL
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17和所述检测剂的第四复合物；以及iii. 通过测量所述第三复合物和所述第四复合物中的所述检测剂的量来确定总IL
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17的所述量，其中，所述捕获抗体是抗IL
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17抗体AF
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317，并且所述检测剂是mAb4538。2.根据权利要求1所述的方法，其中，在步骤(ii)中使来自步骤i)的所述第一混合物与所述检测剂接触之前执行洗涤步骤。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述LM调节剂具有在约2,000道尔顿
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250,000道尔顿、或约5,000道尔顿
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160,000道尔顿范围内的分子量。4.根据权利要求1
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3中任一项所述的方法，其中，所述LM调节剂选自由以下项组成的组：苏金单抗、mAb7024和mAb732，优选地所述LM调节剂是苏金单抗或mAb7024。5.根据权利要求1
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【专利技术属性】
技术研发人员：梁慧萍，J，
申请(专利权)人：詹森药业有限公司，
类型：发明
国别省市：