一种表达靶向B7-H5的shRNA和/或shRNA-miR的多能干细胞或其衍生物制造技术

本发明专利技术公开了一种表达靶向B7

【技术实现步骤摘要】
stem cells，iPSCs)等，这类细胞由于其强大的功能，并且可以一定程度地通过伦理限制，因此具有十分深远和广泛的应用前景。
[0005]因此，开发一种可以在人体中表达靶向B7
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H5的shRNA和/或shRNA
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miR及分泌该靶向B7
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H5的shRNA和/或shRNA
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miR的外泌体的多能干细胞或其衍生物具有重要意义。
[0006]但是，无论是自体iPSCs细胞库，还是免疫配型PSCs细胞库的构思或建立都需要花费极大的财力、物力和人力。同种异基因供受体的器官、组织或细胞移植的分子免疫学基础主要是基于经典的主要组织相容性复合体MHC
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I和MHC
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II(人又作HLA
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I、HLA
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II)的配型。截至2019年6月，已鉴定和命名的HLA系统等位基因已超过20000个，仅经典的HLA
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A、B、C的等位基因数分别都超过5000个，这些经典的HLA
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I/II型等位基因各种可能的随机本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述多能干细胞或其衍生物的基因组导入有靶向B7
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H5的shRNA和/或shRNA
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miR的表达序列。2.根据权利要求1所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述靶向B7
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H5的shRNA和/或shRNA
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miR的靶序列如SEQ ID NO.101～SEQ ID NO.103所示。3.根据权利要求1所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述多能干细胞或其衍生物的B2M和/或CIITA基因被敲除。4.根据权利要求1所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述多能干细胞或其衍生物的基因组中还导入有第一核酸分子；且所述多能干细胞或其衍生物中的免疫应答相关基因的3
’
UTR区域导入有第二核酸分子；所述第一核酸分子编码介导RNA干扰的小核酸分子，所述小核酸分子特异性靶向第二核酸分子的转录产物，且所述小核酸分子不靶向所述多能干细胞或其衍生物的任何其他的mRNA或lncRNA。5.根据权利要求4所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于，所述小核酸分子包括短干扰核酸、短干扰RNA、双链RNA，优选为miRNA、shRNA、shRNA
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miR中的至少一种。6.根据权利要求5所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于，所述多能干细胞或其衍生物来源于人类；所述小核酸分子的序列为不靶向人类任何mRNA或lncRNA的非人类物种的随机序列。7.根据权利要求4所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于，所述第二核酸分子包括至少3个重复的小核酸分子序列的反向互补序列，优选为6～10个重复的小核酸分子序列的反向互补序列。8.根据权利要求1所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述多能干细胞或其衍生物的基因组还导入一种或多种免疫兼容分子表达序列，所述免疫兼容分子用于调控多能干细胞细胞或其衍生物中与免疫应答相关的基因的表达。9.根据权利要求4或8所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述与免疫应答相关的基因包括：(1)主要组织相容性复合体基因，包括HLA
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A、HLA
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B、HLA
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C、HLA
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DRA、HLA
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DRB1、HLA
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DRB3、HLA
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DRB4、HLA
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DRB5、HLA
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DQA1、HLA
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DQB1、HLA
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DPA1和HLA
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DPB1中的至少一种；(2)主要组织相容性复合体相关基因，包括B2M和CIITA中的至少一种。10.根据权利要求8所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述免疫兼容分子包括以下的任一种或多种：(1)免疫耐受相关基因，包括CD47或HLA
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G；(2)HLA
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C类分子，包括人群中比例合计超过90％的HLA
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C复等位基因，或者超过90％的HLA
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C复等位基因与B2M构成的融合蛋白基因；(3)靶向主要组织相容性复合体基因的shRNA和/或shRNA
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miR，所述主要组织相容性复合体基因包括HLA
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A、HLA
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B、HLA
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C、HLA
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DRA、HLA
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DRB1、HLA
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DRB3、HLA
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DRB4、HLA
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DRB5、HLA
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DQA1、HLA
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DQB1、HLA
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DPA1和HLA
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DPB1中的至少一种；(4)靶向主要组织相容性复合体相关基因的shRNA和/或shRNA
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miR，所述主要组织相容性复合体相关基因包括B2M和CIITA中的至少一种。11.根据权利要求10所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：
所述靶向B2M的shRNA和/或shRNA
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miR的靶序列选自SEQ ID NO.8～SEQ ID NO.10中的一种；所述靶向CIITA的shRNA和/或shRNA
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miR的靶序列选自SEQ ID NO.11～SEQ ID NO.13中的一种；所述靶向HLA
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A的shRNA和/或shRNA
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miR的靶序列选自SEQ ID NO.14～SEQ ID NO.16中的一种；所述靶向HLA
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B的shRNA和/或shRNA
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miR的靶序列选自SEQ ID NO.17～SEQ ID NO.19中的一种；所述靶向HLA
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C的shRNA和/或shRNA
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miR的靶序列选自SEQ ID NO.20～SEQ ID NO.22中的一种；所述靶向HLA
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DRA的shRNA和/或shRNA
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miR的靶序列选自SEQ ID NO.23～SEQ ID NO.25中的一种；所述靶向HLA
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DRB1的shRNA和/或shRNA
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miR的靶序列选自SEQ ID NO.26～SEQ ID NO.28中的一种；所述靶向HLA
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DRB3的shRNA和/或shRNA
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miR的靶序列选自SEQ ID NO.29～SEQ ID NO.30中的一种；所述靶向HLA
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DRB4的shRNA和/或shRNA
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miR的靶序列选自SEQ ID NO.31～SEQ ID NO.33中的一种；所述靶向HLA
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DRB5的shRNA和/或shRNA
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miR的靶序列选自SEQ ID...

【专利技术属性】
技术研发人员：王淋立，陈月花，杨建国，莫健，
申请(专利权)人：王淋立，
类型：发明
国别省市：