【技术实现步骤摘要】
一种可降解免疫磁珠及其制备方法
[0001]本专利技术涉及纳米磁性材料领域和生物学领域,具体涉及一种可降解免疫磁珠及其制备方法。
技术介绍
[0002]胰岛移植是指分离和纯化供体胰腺中的胰岛细胞团,通常经门静脉将其输注移植至糖尿病患者的肝脏中,该手术方法作为1型糖尿病的根治手段之一,近年来也取得了许多进展。目前,胰岛移植领域主要存在以下问题和困惑:(1)供体短缺,移植所需胰岛数量多(>11000IEQ/kg体重);(2)移植物在宿主体内难以长期存活,患者不易获得长期胰岛素脱离状态;(3)免疫抑制存在的若干问题等。目前常规的临床胰岛细胞团分离过程耗时长,约需5
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8个小时,同时需4
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5人操作,胰岛分离的结果常受到患者住院时间长短、器官获取方法、保存时间和保存条件等因素的影响,常导致外分泌组织与胰岛组织之间的密度差很小,很难用密度梯度的方法实现胰岛和外分泌腺组织的分离。
[0003]免疫磁珠(IMM,immunomagnetic microspheres)一般是指均匀、 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种可降解免疫磁珠的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:S1:制备可降解磁珠微球原料取0.05
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0.5g海藻酸钠,加蒸馏水至10mL,在室温和磁力搅拌下溶解0.5
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1h,得0.5
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5%海藻酸钠溶液;取5
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10mL上述配制的海藻酸钠溶液,向其中加入2
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50μL浓度为50mg/mL且粒径为100
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500nm的磁珠,上下振荡,使磁珠与海藻酸钠混合均匀,作为水相;另外,取液体石蜡100
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1000ml,加至烧杯中,再向烧杯中加入0.5
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5mL司盘80,混合均匀,作为油相;随后将水相和油相混合,用玻棒搅拌均匀,油相简单分散水相,即得可降解磁珠微球原料;S2:采用快速膜乳化技术和步骤S1中制备的可降解磁珠微球原料制备获得海藻酸盐磁珠微球;S3:海藻酸盐磁珠微球与抗体的偶联取步骤S2制备的海藻酸盐磁珠微球置于试管中,用0.01mol/LPBS洗涤3次,最后定容到1
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5mL,加入1
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20mg EDC和5
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30mg suflo
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NHS,混匀后室温反应5
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30min,然后加入2
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20mg 6
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氨基己酸,室温旋转搅拌12
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28h后,用0.01mol/L PBS洗涤3遍;取上述已连接好6
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氨基己酸“手臂”分子的磁性微球于实验管中,用上述0.01mol/L PBS定容至1
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10mL,加入1
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20mg EDC和5
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