一种富马酸丙酚替诺福韦中L-丙氨酸异丙酯的高效液相检测方法技术

本发明专利技术属于药物质量控制领域，具体涉及一种富马酸丙酚替诺福韦原料药和片剂中L

An HPLC method for the determination of L-alanine isopropyl ester in propofol fumarate and tenofovir

【技术实现步骤摘要】
一种富马酸丙酚替诺福韦中L
‑
丙氨酸异丙酯的高效液相检测方法


[0001]本专利技术属于药物质量控制
，特别涉及一种富马酸丙酚替诺福韦中 L
‑
丙氨酸异丙酯的高效液相检测方法。

技术介绍

[0002]富马酸丙酚替诺福韦(Tenofovir Alafenamide Fumarate)是抗乙肝病毒药物。在生产的过程中用到L
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丙氨酸异丙酯盐酸盐作为起始物料。L
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丙氨酸异丙酯响应较低，于210nm处有较大吸收，在末端吸收下易受其他杂质干扰，且L
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丙氨酸异丙酯常用色谱条件下峰形较差，无法准确定量积分。因此，为了更好的控制产品质量，我们选择了针对L
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丙氨酸异丙酯选择性较高的Agilent Eclipse XDB
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C18 色谱柱进行分离，选择L
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丙氨酸异丙酯的较强吸收波长210nm作为检测波长，并采用0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(pH8.0)
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乙腈体系作为流动相，以梯度洗脱进行本品的L
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丙氨酸异丙酯盐酸盐检测。
[0003]因此，专利技术一种富马酸丙酚替诺福韦中L
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丙氨酸异丙酯的高效液相检测方法来解决上述问题很有必要。

技术实现思路

[0004]针对上述问题，本专利技术提供了一种富马酸丙酚替诺福韦中L
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丙氨酸异丙酯的高效液相检测方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种富马酸丙酚替诺福韦中 L
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丙氨酸异丙酯的高效液相检测方法，包括以下步骤：
[0006]S1：配制富马酸丙酚替诺福韦原料药和片剂供试品，所述富马酸丙酚替诺福韦原料药和片剂与溶剂[磷酸二氢钾溶液
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乙腈(90:10)]配制为供试品溶液；
[0007]S2：配制L
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丙氨酸异丙酯盐酸盐对照品溶液，称取L
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丙氨酸异丙酯盐酸盐对照品，与溶剂[磷酸二氢钾溶液
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乙腈(90:10)]配制成L
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丙氨酸异丙酯盐酸盐对照品溶液；
[0008]S3：测定方法，分析柱为十八烷基硅烷键合硅胶填料，流动相A为0.02mol/L 磷酸二氢钾溶液(pH8.0)，流动相B为乙腈，进行线性洗脱，检测波长为210nm，柱温为30℃，流速1.3ml/ml；
[0009]S4：分别精密量取供试品溶液和对照品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图；
[0010]S5：供试品溶液色谱图中L
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丙氨酸异丙酯杂质峰，按外标法以峰面积计算含量。
[0011]在上述检测方法中，所述富马酸丙酚替诺福韦供试品为富马酸丙酚替诺福韦原料药和片剂。
[0012]在上述检测方法中，所述线性洗脱的条件为：0min，流动相A％：流动相B％为90:10；23min，流动相A％：流动相B％为20:80；23.1min，流动相A％：流动相B％为90:10；32min，流动相A％：流动相B％为90:10；流速1.3ml/min。
[0013]通过上述的流动相方法，L
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丙氨酸异丙酯杂质峰与其他杂质能够得到有效的分
离，满足质量检测的要求。
[0014]进一步优选：流动相A为0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(pH8.0)，流动相B为乙腈，检测波长为210nm，柱温为30℃。
[0015]采用了L
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丙氨酸异丙酯吸收较强的210nm作为检测波长，可有效提高L
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丙氨酸异丙酯盐酸盐的检测灵敏度。
[0016]进一步优选，所述分析柱为Agilent Eclipse XDB
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C18 4.6*250mm 5μm。
[0017]使用了选择性较高的Agilent Eclipse XDB
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C18色谱柱进行分离，可将L
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丙氨酸异丙酯与其他杂质很好分离，避免了干扰。
[0018]进一步优选，上述杂质为L
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丙氨酸异丙酯。
[0019]进一步优选，供试品溶液色谱图中如有L
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丙氨酸异丙酯杂质峰，按外标法以峰面积计算含量，富马酸丙酚替诺福韦原料药供试品溶液色谱图中如有L
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丙氨酸异丙酯峰，含量应不得大于0.10％，富马酸丙酚替诺福韦片剂供试品溶液色谱图中如有L
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丙氨酸异丙酯峰，含量应不得大于0.5％。
[0020]进一步优选，取富马酸丙酚替诺福韦原料药和片剂适量，加溶剂[磷酸二氢钾溶液
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乙腈(90:10)]制成每1ml中约含富马酸丙酚替诺福韦20mg的溶液，作为供试品溶液。
[0021]表1：富马酸丙酚替诺福韦和L
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丙氨酸异丙酯盐酸盐信息表
[0022][0023](1)本专利技术富马酸丙酚替诺福韦中L
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丙氨酸异丙酯的HPLC测定方法，为满足供试品溶液检测浓度的需要，取L
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丙氨酸异丙酯盐酸盐对照品适量，用溶剂配制成为每1ml中约含L
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丙氨酸异丙酯0.02mg的溶液，作为对照品溶液。再分别用溶剂稀释制成一系列不同浓度的溶液，分别进样20μl，使之产生L
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丙氨酸异丙酯为基线噪音至少3倍的信号。经试验，最小检测量为80ng(S/N≥3)，若以样品检查时富马酸丙酚替诺福韦的浓度每1ml约含20mg计算，其检出限度为0.02％。
[0024](2)本专利技术富马酸丙酚替诺福韦中L
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丙氨酸异丙酯盐酸盐的HPLC测定方法，取L
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丙氨酸异丙酯盐酸盐对照品约20mg，精密称定，置100ml量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液，精密量取1ml置10ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。当对照品溶液浓度范围在 0.01～0.08mg/ml内时，峰面积与浓度呈良好的线性关
系，其线性方程为： y＝12.612x
‑
0.004，相关系数为0.9999。
[0025](3)本专利技术富马酸丙酚替诺福韦中L
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丙氨酸异丙酯盐酸盐的HPLC测定方法，为满足供试品溶液检测浓度的需要，取L
‑
丙氨酸异丙酯盐酸盐对照品适量，用溶剂配制成为每1ml中约含L
‑
丙氨酸异丙酯0.02mg的溶液，作为对照品溶液。再分别用溶剂稀释制成一系列不同浓度的溶液，分别进样20μl，使之产生L
‑
丙氨酸异丙酯为基线噪音至少10倍的信号，经试验，检测量约为200ng时，其S/N≥10，若以富马酸丙酚替诺福韦检查时的浓度20mg计算，其定量限约为0.05％水平。
[0026](4)本专利技术采用了选择性较本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种富马酸丙酚替诺福韦中L
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丙氨酸异丙酯的高效液相检测方法，包括，其特征在于：包括以下步骤：S1：配制富马酸丙酚替诺福韦原料药和片剂供试品，所述富马酸丙酚替诺福韦原料药和片剂与溶剂配制为供试品溶液；S2：配制L
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丙氨酸异丙酯盐酸盐对照品溶液，称取L
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丙氨酸异丙酯盐酸盐对照品，与溶剂配制成L
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丙氨酸异丙酯盐酸盐对照品溶液；S3：测定方法，分析柱为十八烷基硅烷键合硅胶填料，流动相A为0.02mol/L磷酸二氢钾溶液（pH8.0），流动相B为乙腈，进行线性洗脱，检测波长为210nm，柱温为30
°
C，流速1.3ml/ml；S4：分别精密量取供试品溶液和对照品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图；S5：供试品溶液色谱图中L
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丙氨酸异丙酯杂质峰，按外标法以峰面积计算含量。2.根据权利要求1所述的一种富马酸丙酚替诺福韦中L
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丙氨酸异丙酯的高效液相检测方法，其特征在于：所述步骤S1和S2中的溶剂为磷酸二氢钾溶液和乙腈，配比为90:10。3.根据权利要求1所述的一种富马酸丙酚替诺福韦中L
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丙氨酸异丙酯的高效液相检测方法，其特征在于：所述步骤S1中的供试品为富马酸丙酚替诺福韦原料药和片剂。4.根据权利要求1所述的一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：李静，陈文芝，孙利亚，
申请(专利权)人：南京百泽医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：