乳酸乳球菌乳酸亚种HFY14及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种乳酸乳球菌乳酸亚种HFY14及其应用，属于生物技术领域，该乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcuslactissubsp.lactis)命名为HFY14，保藏编号CGMCC No.16647，该菌株分离自自然发酵酸奶中，并且通过动物实验、组织病理学观察等实验验证了使用该菌株的活菌液灌胃降植烷诱导的狼疮性肾炎小鼠能够使其肾功能异常得到明显改善，效果接近于药物泼尼松。本发明专利技术为乳酸乳球菌乳酸亚种HFY14的后续开发利用以及其作为益生菌改善肾病肾功能的应用提供了理论基础，该菌株具备对狼疮性肾炎进行长期干预改善肾功能的应用潜质。进行长期干预改善肾功能的应用潜质。进行长期干预改善肾功能的应用潜质。

【技术实现步骤摘要】
乳酸乳球菌乳酸亚种HFY14及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，特别是涉及一种乳酸乳球菌乳酸亚种HFY14及其在制备药物中的应用。

技术介绍

[0002]青藏高原的地理环境特殊，具有海拔高、气温低、日照强的特点，这些地理因素促进了青藏高原形成了大片草场，自古以来就是天然的畜牧业发达的地区。青藏高原上居住的藏族牧民自古便有饲养牦牛的传统，通过畜牧业除了获得牦牛肉外，还形成了食用牦牛乳和发酵牦牛乳获得酸乳的习惯。现代科学研究分析发现牦牛乳含有的营养物质优于普通牛乳，富含蛋白质和微量元素，由牦牛乳经过自然发酵得到的牦牛酸乳得益于青藏高原的地理环境和藏族牧民的生活习惯，形成了特殊的风味和营养组成，还包括富含相当数量未经鉴定和开发的微生物资源。现在已有从自然发酵牦牛酸乳中分离的微生物应用在酸奶发酵制作和益生菌产品开发中，酸奶和益生菌产品均具有肠道调节、减脂和等保健功效。研究还发现地处青藏高原的四川红原地区牧民也保持食用自然发酵牦牛乳的习惯，且当地发酵酸奶中含有的微生物不仅种类丰富，还具有良好的抗性，是潜在的益生菌发掘资源。
[0003]狼疮性肾炎是一种是免疫失调引发的肾炎，严重的肾脏疾病出现后常常导致狼疮性肾炎，进而引起肾小球出现严重的炎症。狼疮性肾炎发生后会引起机体一系列病变，除了肾小球炎症外，还会出现淋巴结出现增生，严重时机体免疫失调，出现肾脏硬化，代谢及排毒失调，从而危及生命。机体免疫系统中B细胞及T细胞被过度激活也是狼疮性肾炎的主要表现，从而使体内的T细胞出现分化，影响正常的免疫系统工作。有研究显示益生菌干预下能够保持T细胞在机体中的平衡，发挥益生菌干预肾炎的作用。益生菌自身的肽聚糖和脂磷壁酸等成分能够激活和加强免疫系统，提高机体免疫力；同时益生菌还能分泌出刺激免疫系统的活性物质，也能发挥提高免疫力的作用，机体免疫力提高后，炎症引起的体内毒性物质被加速排出，促进了肾脏病变的恢复。乳酸乳球菌乳酸亚种作为益生菌常用于食品
，其在药物制备，尤其是在预防和/或治疗狼疮性肾炎药物的制备方面鲜有研究。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供乳酸乳球菌乳酸亚种HFY14及其在制备药物，尤其是在制备预防和/或治疗狼疮性肾炎的药物中的应用，以解决上述现有技术存在的问题。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0006]本专利技术提供一种乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactissubsp.Lactis)HFY14，其已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.16647，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏时间为2018年10月29日。
[0007]本专利技术还提供一种根据所述乳酸乳球菌乳酸亚种HFY14在制备预防和/或治疗狼疮性肾炎的药物中的应用。
[0008]本专利技术还提供一种根据所述乳酸乳球菌乳酸亚种HFY14在制备改善肾功能的药物
中的应用。
[0009]本专利技术还提供一种根据所述乳酸乳球菌乳酸亚种HFY14在制备提高集体免疫力的药物中的应用。
[0010]本专利技术还提供一种药物，包括所述乳酸乳球菌乳酸亚种HFY14以及药学上可接受的辅料。
[0011]进一步地，所述药物用于提高免疫器官指数、保持血清中免疫因子的正常水平以及保持肾功能指标正常水平。
[0012]进一步地，所述药物用于降低血清中dsDNA阳性率以及上调IL
‑
4的表达和下调IL
‑
1β、TGF
‑
β的表达。
[0013]进一步地，所述免疫因子包括IL
‑
2、IL
‑
12、IFN
‑
γ、TGF
‑
β和IgG。
[0014]进一步地，所述肾功能指标包括SCr、BUN、TC、TG、TP和ALB。
[0015]本专利技术公开了以下技术效果：
[0016]本专利技术从四川红原高原藏族牧民自然发酵酸奶中分离出了一株菌——乳酸乳球菌乳酸亚种HFY14，并且通过动物实验验证了该菌株能够提高由降植烷诱导的狼疮性肾炎小鼠的免疫器官指数；抑制小鼠血清中IL
‑
2、IL
‑
12、IFN
‑
γ、TGF
‑
β和IgG水平的变化，从而改善小鼠的免疫失调；控制小鼠肾脏组织中IL
‑
4、TGF
‑
β和IL
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1β的异常表达，从而改善小鼠肾功能，同时乳酸乳球菌乳酸亚种HFY14还能够降低dsDNA抗体的阳性率，效果接近于药物泼尼松。因此，乳酸乳球菌乳酸亚种HFY14对狼疮性肾炎小鼠的免疫功能起到了明显的调节作用，由此可进一步改善狼疮性肾炎的肾功能异常，具备对狼疮性肾炎进行长期干预改善肾功能的应用潜质。
附图说明
[0017]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0018]图1为乳酸杆菌菌落形态；
[0019]图2为乳酸杆菌细胞形态；
[0020]图3为15株乳酸菌PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳图；M，D2000 DNAMarker；0，阴性对照组；1
‑
15代表编号为1
‑
15的菌株，其中14为HFY14菌株；
[0021]图4为小鼠免疫器官指数，其中(A)为小鼠胸腺器官指数，(B)为小鼠脾脏器官指数；
[0022]图5为小鼠血清中免疫因子水平，其中(A)为IL
‑
2细胞因子水平，(B)为IL
‑
12细胞因子水平，(C)为IFN
‑
γ细胞因子水平，(D)为TGF
‑
β细胞因子水平，(E)为IgG细胞因子水平；
[0023]图6为小鼠血清指标水平，其中(A)为SCr指标水平，(B)为BUN指标水平，(C)为TC指标水平，(D)为TG指标水平，(E)为TP指标水平，(F)为ALB指标水平；
[0024]图7为小鼠肾脏组织的H&E染色病理观察；
[0025]图8为小鼠肾组织中的IL
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4、TGF
‑
β和IL
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1β相对mRNA表达强度；
[0026]图9为小鼠肾组织中的IL
‑
4、TGF
‑
β和IL
‑
1β蛋白质凝胶电泳结果，其中由左到右泳
道依次表示正常组、模型组、HFY14
‑
L、HFY14
‑
H、泼尼松组；
[0027]图10为小鼠肾组织中的IL
‑
4、TGF
‑
β和IL
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subsp.lactis)HFY14，其已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.16647，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏时间为2018年10月29日。2.一种根据权利要求1所述的乳酸乳球菌乳酸亚种HFY14在制备预防和/或治疗狼疮性肾炎的药物中的应用。3.一种根据权利要求1所述的乳酸乳球菌乳酸亚种HFY14在制备改善肾功能的药物中的应用。4.一种根据权利要求1所述的乳酸乳球菌乳酸亚种HFY14在制备提高机体免疫力的药物中的应用。5.一种药物，其特征在于，包括权利要求1所述的乳酸乳球菌乳酸亚种HFY14以及药学上可接受的辅料。6.根据权利要求5...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵欣，
申请(专利权)人：重庆第二师范学院，
类型：发明
国别省市：