一种栓皮栎和麻栎的区分方法技术

本发明专利技术公开了一种栓皮栎和麻栎的区分方法，包括以下步骤：首先准备栓皮栎样本材料和麻栎材料，将准备好的栓皮栎材料和麻栎材料分别进行抽真空和固定处理，获得栓皮栎固化样本和麻栎固化样本，将栓皮栎固化样本和麻栎固化样本分别依次进行软化和脱水处理，获得栓皮栎脱水样本和麻栎脱水样本，获得栓皮栎透明样本和麻栎透明样本，获得栓皮栎石蜡样本和麻栎石蜡样本，获得纯净的栓皮栎样本和麻栎样本，获得栓皮栎观察样本和麻栎观察样本，观察样本细胞大小区分栓皮栎和麻栎。通过石蜡切片配合显微镜观察样本细胞形态，可直观准确区分栓皮栎和麻栎，尤其是针对树龄较小，准确性高，并且能够排除个体差异的影响。够排除个体差异的影响。够排除个体差异的影响。

【技术实现步骤摘要】
一种栓皮栎和麻栎的区分方法


[0001]本专利技术涉及生物领域，特别是涉及一种栓皮栎和麻栎的区分方法。

技术介绍

[0002]栓皮栎(Quercus variabilis Bl.)在我国分布广泛，具有重要的生态效益，其木栓形成层分化产生的木栓层绿色可再生，俗有“软黄金”之称，在航空、交通、建材等领域应用广泛，极具经济价值和应用前景。麻栎(Quercus acutissima)是栓皮栎的近源物种。
[0003]目前对于栓皮栎和麻栎的区分一般通过感官上对树皮凹陷程度、树叶背部颜色及叶背是否密被绒毛等进行判断，麻栎叶片幼嫩时，叶背覆浅绿色绒毛，成熟后叶片光滑，叶面背部呈浅绿色；栓皮栎成熟叶片背偏白色、密被绒毛，未见系统区分方法的描述，这种区分方法一般适用于多年生的栓皮栎与麻栎，且该方法具有受生长时期限制的缺点，对于怎样准确有效地在显微形态上对二者进行区分未见系统报道，并且上述区分方法存在一定的局限性：
[0004]1、凭个人对二者认知的经验上进行区分容易产生主观误差，不严谨科学；
[0005]2、当树木落叶后，无法根据叶片进行物种判断；
[0006]3、一般适用于多年生的栓皮栎与麻栎，当树龄较小时，二者树皮及叶片形态结构相似，树皮光滑，叶背都密被绒毛，且颜色区分不显著，不能通过树皮和叶片形态特征进行判断。且存在栓皮栎叶片背部颜色有时会表现出个体差异性，易与麻栎混淆(如1～2年生不同家系的栓皮栎单株，极个别叶背颜色较绿，易被误认为麻栎)。

技术实现思路

[0007]针对目前栓皮栎和麻栎区分方法误差较大，并且对于树龄较小时，容易出现误判的技术问题，本申请提出了一种栓皮栎和麻栎的区分方法。
[0008]本专利技术通过以下技术方案来实现上述目的：
[0009]本申请公开了一种栓皮栎和麻栎的区分方法，包括以下步骤：
[0010]S1、首先准备栓皮栎样本材料和麻栎材料；
[0011]S2、将准备好的栓皮栎材料和麻栎材料分别进行抽真空和固定处理，获得栓皮栎固化样本和麻栎固化样本；
[0012]S3、将栓皮栎固化样本和麻栎固化样本分别依次进行软化和脱水处理，获得栓皮栎脱水样本和麻栎脱水样本；
[0013]S4、将栓皮栎脱水样本和麻栎脱水样本进行脱色处理，获得栓皮栎透明样本和麻栎透明样本；
[0014]S5、将栓皮栎透明样本和麻栎透明样本分别进行浸蜡和包埋处理，获得栓皮栎石蜡样本和麻栎石蜡样本；
[0015]S6、将栓皮栎石蜡样本和麻栎石蜡样本分别进行切片处理，获得栓皮栎石蜡切片和麻栎石蜡切片；
[0016]S7、将栓皮栎石蜡切片和麻栎石蜡切片展开在载玻片上，吸取载玻片上水分，并烘干处理；
[0017]S8、将烘干处理后的栓皮栎石蜡切片和麻栎石蜡切片分别进行脱蜡和复水处理，获得纯净的栓皮栎样本和麻栎样本；
[0018]S9、将纯净的栓皮栎样本和麻栎样本分别进行染色处理，获得栓皮栎染色样本和麻栎染色样本；
[0019]S10、将栓皮栎染色样本和麻栎染色样本分别依次进行透明和封片处理，获得栓皮栎观察样本和麻栎观察样本；
[0020]S11、将栓皮栎观察样本和麻栎观察样本分别放置在显微镜下观察，观察样本细胞大小区分栓皮栎和麻栎。
[0021]优选地，所述步骤S1中栓皮栎样本材料和麻栎样本材料取自栓皮栎树皮和麻栎树皮或不足一年生的栓皮栎茎段基部和麻栎茎段基部。
[0022]优选地，所述步骤S2中抽真空和固定处理方法包括将栓皮栎样本材料和麻栎样本材料放置于FAA固定液中抽真空，直至FAA固定液中未见气泡冒出为止，随后将栓皮栎样本材料和麻栎样本材料在FAA固定液中固定至少72小时。
[0023]优选地，所述步骤S3中软化和脱水处理方法包括将固定处理后的栓皮栎固化样本和麻栎固化样本放置于沸水中蒸煮1小时进行软化，随后将软化后的栓皮栎样本和麻栎样本依次放置在70％酒精、85％酒精、95％酒精以及无水乙醇中分别浸泡1小时，最后再将浸泡后的栓皮栎样本和麻栎样本再次放置在新的无水乙醇中浸泡1小时，完成栓皮栎样本和麻栎样本的脱水处理。
[0024]优选地，所述步骤S4中脱色处理方法包括将脱水处理后的栓皮栎样本和麻栎样本放置在无水乙醇和二甲苯按照1:1混合的混合溶液中浸泡12小时，随后将栓皮栎样本和麻栎样本分别放置经过两次二甲苯溶液浸泡，每次浸泡2小时。
[0025]优选地，所述步骤S5中浸蜡和包埋处理方法，包括以下步骤：
[0026]S51、将栓皮栎透明样本和麻栎透明样本放入小坩埚中，加入少量二甲苯，并将溶蜡沿坩埚壁加入，使溶蜡在二甲苯液上凝固，石蜡不与栓皮栎透明样本和麻栎透明样本接触，随后静置1小时，待石蜡凝固后，将坩埚放置到36℃恒温箱中放置12小时；
[0027]S52、将恒温箱内的温度逐渐升温至62℃位置，对栓皮栎透明样本和麻栎透明样本进行变温处理；
[0028]S53、将经过变温处理后的栓皮栎透明样本和麻栎透明样本分别从小坩埚中取出，并放入到62℃恒温箱中的1号杯中浸泡2小时，随后将各样本分别转入到2号杯中再次浸泡2小时；
[0029]S54、将融化后的石蜡倒入器皿中，并去除器皿边缘气泡，随后利用加热后的镊子将栓皮栎样本和麻栎样本放在石蜡中，调整栓皮栎样本和麻栎样本位置，将栓皮栎样本和麻栎样本待切面对准边部。
[0030]优选地，所述步骤S8中脱蜡和复水处理方法包括将栓皮栎石蜡切片和麻栎石蜡切片首先通过二甲苯浸泡30分钟后，再次通过更换后的二甲苯溶液浸泡10分钟完成脱蜡，随后依次通过无水乙醇和二甲苯按照1：1混合的混合溶液、100％乙醇、95％乙醇、85％乙醇、70％乙醇、50％乙醇以及30％乙醇浸泡，每次浸泡10分钟。
[0031]优选地，所述步骤S9中染色方法包括将纯净的栓皮栎样本和麻栎样本放入0.05％甲苯胺蓝水溶液中浸泡5
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6分钟，随后将纯净的栓皮栎样本和麻栎样本利用清水洗浮色2次，每次20秒，然后依次通过30％酒精、50％酒精、70％酒精、85％酒精、95％酒精以及无水乙醇浸泡，每次浸泡10分钟。
[0032]优选地，所述步骤S11中，当栓皮栎观察样本和麻栎观察样本分别选自半年生栓皮栎茎段皮层和半年生麻栎茎段皮层时，通过观察表皮下层细胞长度，当表皮下层细胞长度为30
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33μm，且与表皮层细胞及韧皮部细胞相比显著较大，则为栓皮栎；当表皮下层细胞厚度为6
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9μm时，且与表皮层细胞及韧皮部细胞大小相近，则为麻栎。
[0033]优选地，所述步骤S11中，当栓皮栎观察样本和麻栎观察样本分别选自一年生栓皮栎茎段皮层和一年生麻栎茎段皮层时，观察细胞分布形状，当观察具有7
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9层呈砖形、排列整齐紧密的木栓细胞，厚度为55
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60μm，且木栓细胞层数与木栓层厚度随树龄增长不断增大，并且横切面上表皮细胞及木栓细胞排列规整，表面相对光滑，则为栓皮栎；当观察表皮本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种栓皮栎和麻栎的区分方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、首先准备栓皮栎样本材料和麻栎材料；S2、将准备好的栓皮栎材料和麻栎材料分别进行抽真空和固定处理，获得栓皮栎固化样本和麻栎固化样本；S3、将栓皮栎固化样本和麻栎固化样本分别依次进行软化和脱水处理，获得栓皮栎脱水样本和麻栎脱水样本；S4、将栓皮栎脱水样本和麻栎脱水样本进行脱色处理，获得栓皮栎透明样本和麻栎透明样本；S5、将栓皮栎透明样本和麻栎透明样本分别进行浸蜡和包埋处理，获得栓皮栎石蜡样本和麻栎石蜡样本；S6、将栓皮栎石蜡样本和麻栎石蜡样本分别进行切片处理，获得栓皮栎石蜡切片和麻栎石蜡切片；S7、将栓皮栎石蜡切片和麻栎石蜡切片展开在载玻片上，吸取载玻片上水分，并烘干处理；S8、将烘干处理后的栓皮栎石蜡切片和麻栎石蜡切片分别进行脱蜡和复水处理，获得纯净的栓皮栎样本和麻栎样本；S9、将纯净的栓皮栎样本和麻栎样本分别进行染色处理，获得栓皮栎染色样本和麻栎染色样本；S10、将栓皮栎染色样本和麻栎染色样本分别依次进行透明和封片处理，获得栓皮栎观察样本和麻栎观察样本；S11、将栓皮栎观察样本和麻栎观察样本分别放置在显微镜下观察，观察样本细胞大小区分栓皮栎和麻栎。2.如权利要求1所述的栓皮栎和麻栎的区分方法，其特征在于，所述步骤S1中栓皮栎样本材料和麻栎样本材料取自栓皮栎树皮和麻栎树皮或不足一年生的栓皮栎茎段基部和麻栎茎段基部。3.如权利要求1所述的栓皮栎和麻栎的区分方法，其特征在于，所述步骤S2中抽真空和固定处理方法包括将栓皮栎样本材料和麻栎样本材料放置于FAA固定液中抽真空，直至FAA固定液中未见气泡冒出为止，随后将栓皮栎样本材料和麻栎样本材料在FAA固定液中固定至少72小时。4.如权利要求1所述的栓皮栎和麻栎的区分方法，其特征在于，所述步骤S3中软化和脱水处理方法包括将固定处理后的栓皮栎固化样本和麻栎固化样本放置于沸水中蒸煮1小时进行软化，随后将软化后的栓皮栎样本和麻栎样本依次放置在70％酒精、85％酒精、95％酒精以及无水乙醇中分别浸泡1小时，最后再将浸泡后的栓皮栎样本和麻栎样本再次放置在新的无水乙醇中浸泡1小时，完成栓皮栎样本和麻栎样本的脱水处理。5.如权利要求1所述的栓皮栎和麻栎的区分方法，其特征在于，所述步骤S4中脱色处理方法包括将脱水处理后的栓皮栎样本和麻栎样本放置在无水乙醇和二甲苯按照1:1混合的混合溶液中浸泡12小时，随后将栓皮栎样本和麻栎样本分别放置经过两次二甲苯溶液浸泡，每次浸泡2小时。6.如权利要求1所述的栓皮栎和麻栎的区分方法，其特征在于，所述步骤S5中浸蜡和包
埋处理方法，包括以下步骤：S51、将栓皮栎透明样本和麻栎透明样本放入小坩埚...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱景乐，李慧，唐骏，周宗顺，杨霞，陈梦娇，刘亚心，张婉，乔永胜，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院经济林研究所，
类型：发明
国别省市：