包含可溶性gp130二聚体的制剂和使用方法技术

本发明专利技术属于生物医药研究领域，描述了一种包含多肽二聚体的制剂。该多肽二聚体包含两个可溶gp130分子，其中所述每一个gp130分子融合到IgG1蛋白的Fc结构域。该多肽二聚体可以选择性抑制IL

【技术实现步骤摘要】
包含可溶性gp130二聚体的制剂和使用方法


[0001]本专利技术属于生物医药研究领域，具体涉及一种包含gp130二聚体的制剂，以及用来治疗各种IL
‑
6介导的病症，包括炎性疾病和癌症的用途。

技术介绍

[0002]糖蛋白130(也称为gp130，IL6ST，IL6
‑
beta或CD130)是一种跨膜蛋白。它形成IL
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6受体家族中I型细胞因子受体的一个亚基。它对于细胞因子参与后的信号转导很重要。在结构上，gp130在其细胞外部分由五个纤连蛋白III型结构域和一个免疫球蛋白样C2型结构域组成。
[0003]IL
‑
6受体家族的成员都通过与gp130形成复合体以进行信号转导。例如，IL
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6与IL
‑
6受体结合。然后，这两种蛋白质的复合物与gp130缔合。然后，由3种蛋白质组成的复合物均二聚化，形成可以产生下游信号的六聚体复合物。
[0004]IL
‑
6是由造血细胞和非造血细胞产生的多效细胞因子，例如响应于感染和组织损伤。IL
‑
6通过两种主要信号转导途径发挥其多重生物活性，一种是通过主要存在于肝细胞和某些白细胞上的膜结合IL
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6R的所谓经典配体
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受体途径，以及一种是通过源自膜结合IL
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6R的蛋白水解切割或源自选择性剪接的循环sIL
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6R(soluble IL
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6R，或称可溶性IL
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6R)的跨信号转导途径(反式信号途径)。
[0005]在经典途径中，IL
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6直接与有限范围细胞类型的表面上的膜结合的 IL
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6R结合。IL
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6/IL
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6R复合物与信号转导性gp130受体蛋白质的预先形成的二聚体缔合，引起gp130同二聚体的空间变化，并从而引发细胞内信号转导级联。经典信号转导负责急性炎症防御机制和关键的生理学IL
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6 功能，如肠上皮细胞的生长和再生信号。IL
‑
6R和gp130的细胞外结构域可通过翻译选择性剪接的mRNA而产生，无膜
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锚定结构域，从而产生sIL
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6R和gp130变体。
[0006]IL
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6/sIL
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6R复合物的活性通常由循环中存在的高水平可溶性sgpl30 (soluble gp130)控制，其与膜结合的gp130有效竞争。本专利技术中的gp130 二聚体比天然sgpl30具有更高结合亲和力并因此具有更强的抑制IL
‑
6信号转导的能力。本专利技术的制剂让该gp130二聚体能够在生产、运输和运用中更稳定。

技术实现思路

[0007]为了克服现有技术中所存在的问题，本专利技术描述了一种包含gp130二聚体的制剂，以及用来治疗各种IL
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6介导的病症，包括炎性疾病和癌症的用途。该制剂包含一个组氨酸盐缓冲体系，在pH7.6左右，有很高的稳定性，并且可以安全地以各种剂量施用于人类。
[0008]在一种实施方式中，本说明书描述了一种水性制剂，其包含一种多肽二聚体和10
‑
40mM组氨酸盐，而且其pH为7.2
‑
8.2，所述多肽二聚体包含两个氨基酸序列为SEQ ID NO:1的单体由一个或多个二硫键相连接。在一些实施方式中，其包含至少20mg/mL，25mg/mL，或者至少30mg/mL该多肽二聚体。
[0009]在一些实施方式中，所述水性制剂的pH为7.4
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7.8。在一些实施方式中，所述水性制剂的pH为7.6。在一些实施方式中，所述水性制剂包含15
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25mM组氨酸盐。在一些实施方式中，所述水性制剂包含20mM组氨酸盐。
[0010]在一些实施方式中，所述水性制剂进一步包括一种张度剂、一种表面活性剂、一种抗氧化剂、或者一种防腐剂。
[0011]在一些实施方式中，所述每个多肽二聚体分子包含不多于6个半乳糖
‑
α
ꢀ‑
1,3
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半乳糖。在一些实施方式中，所述每个多肽二聚体分子包含不多于3个， 2个，或者1个半乳糖
‑
α
‑
1,3
‑
半乳糖。
[0012]在一些实施方式中，所述多肽二聚体包含聚糖，其中平均至少52％所述聚糖包含一个或多个唾液酸残基。在一些实施方式中，所述多肽二聚体包含聚糖，其中平均至少54％所述聚糖包含一个或多个唾液酸残基。在一些实施方式中，所述多肽二聚体包含聚糖，其中平均52
‑
65％所述聚糖包含一个或多个唾液酸残基。
[0013]在一些实施方式中，所述的水性制剂，用于治疗人类中的炎性疾病或IL
‑ꢀ
6介导的病症。在一些实施方式中，其中所述炎性疾病或IL
‑
6介导的病症是炎症性肠病，优选地其中所述治疗诱导炎症性肠病的缓解。在一些实施方式中，其中所述炎症性肠病是克罗恩氏病或溃疡性结肠炎，优选地其中所述治疗维持炎症性肠病的缓解。在一些实施方式中，其中所述炎性疾病或IL
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6介导的病症是类风湿性关节炎、牛皮癣、葡萄膜炎或动脉粥样硬化。在一些实施方式中，其中所述炎性疾病或IL
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6介导的病症是与炎症性肠病无关的结肠炎，优选地其中所述结肠炎是放射性结肠炎、憩室结肠炎、缺血性结肠炎、感染性结肠炎、脂泻病、自身免疫性结肠炎、或由影响结肠的过敏引起的结肠炎。
附图说明
[0014]图1，pH/缓冲体系筛选DSC结果。
[0015]图2，pH/缓冲体系筛选HT
‑
DLS结果。
具体实施方式
[0016]定义
[0017]所有数字标号(例如pH、温度、时间、浓度和分子量，包括范围)均为以0.1或10％的增量
⑴
或㈠变化的近似值。应了解，尽管并非始终明确地陈述，所有数字标号之前均有术语“约”。还应了解，尽管并非始终明确地陈述，本文所述的试剂仅为示例性的并且其相等物为本领域中已知的。
[0018]术语“蛋白”和“多肽”可互换使用并且以其最广泛意义指代两种或更多种亚单位氨基酸、氨基酸类似物或肽模拟物的化合物。所述亚单位可由肽键键联。在另一实施方案中，所述亚单位可由例如酯、醚等其它键键联。蛋白或肽必须含有至少两种氨基酸并且关于可构成蛋白或肽的序列的氨基酸的最大数目并无限制。如本文所用，术语“氨基酸”指代天然和/或非天然或合成氨基酸，包括甘氨酸和D和L光学异构体、氨基酸类似物和肽模拟物。天然存在氨基酸的单字母和三字母缩写列于下文。
[0019]“组合物”意图意指活性剂和另一惰性(例如，可检测试剂或标记)或活性化合物或组合物(如佐剂)的组合本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种水性制剂，其包含一种多肽二聚体和10
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40mM组氨酸盐，而且其pH为7.2
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8.2，所述多肽二聚体包含两个氨基酸序列为SEQ ID NO:1的单体由一个或多个二硫键相连接。2.根据权利要求1所述的水性制剂，其中所述水性制剂的pH为7.4
‑
7.8。3.根据权利要求1所述的水性制剂，其中所述水性制剂的pH为7.6。4.根据权利要求1所述的水性制剂，其中所述水性制剂包含15
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25mM组氨酸盐。5.根据权利要求1所述的水性制剂，其中所述水性制剂包含20mM组氨酸盐。6.根据权利要求1所述的水性制剂，其进一步包括一种张度剂、一种表面活性剂、一种抗氧化剂、或者一种防腐剂。7.根据权利要求1所述的水性制剂，其中，所述每个多肽二聚体分子包含不多于6个半乳糖
‑
α
‑
1,3
‑
半乳糖。8.根据权利要求7所述的水性制剂，其中，所述每个多肽二聚体分子包含不多于3个半乳糖
‑
α
‑
1,3
‑
半乳糖。9.根据权利要求7所述的水性制剂，其中，所述多肽二聚体...

【专利技术属性】
技术研发人员：田烨，乔君华，朱静，陆树云，王静，刘淑芹，
申请(专利权)人：天境生物科技杭州有限公司，
类型：发明
国别省市：