用于制备HBVcccDNA的核酸、载体和宿主细胞制造技术

本发明专利技术涉及一种用于制备HBV cccDNA的核酸、载体和宿主细胞。该用于制备HBV cccDNA的核酸包括第一节段和与所述第一节段连接的第二节段，第一节段和第二节段各自独立转录，第一节段包括编码核心蛋白的Core基因、编码HBV聚合酶的Pol基因和编码HBx的X基因，第二节段包括与前基因组RNA对应的核酸片段和与起始密码子对应的核酸片段，与起始密码子对应的核酸片段位于与前基因组RNA对应的核酸片段的转录方向的3

【技术实现步骤摘要】
用于制备HBV cccDNA的核酸、载体和宿主细胞


[0001]本专利技术涉及基因工程
，特别是涉及一种用于制备HBV cccDNA的核酸、载体和宿主细胞。

技术介绍

[0002]慢性乙型肝炎是由于感染乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)引起的疾病。HBV是一种DNA病毒，属于嗜肝DNA病毒科(Hepadnaviridae)。在乙肝病毒的复制过程中，病毒DNA进入宿主细胞核，在DNA聚合酶的作用下，两条链的缺口均被补齐，形成超螺旋的共价、闭合、环状DNA分子(covalently closed circular DNA，cccDNA)。cccDNA是乙肝病毒前基因组RNA复制的原始模板，在病人肝脏组织内，即使在病毒复制最为活跃的阶段，每个肝细胞内也只有不超过50个拷贝。作为产生新病毒的模板，HBV cccDNA虽然其含量较少，但对乙肝病毒的复制、感染状态建立、临床治疗过程中的病毒再激活等病毒具有十分重要的意义。只有完全清除了细胞核内的HBV cccDNA，才能达到彻底治愈HBV感染和携带状态，才能获得乙肝患者完全治愈本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于制备HBV cccDNA的核酸，其特征在于，包括第一节段和与所述第一节段连接的第二节段，所述第一节段和所述第二节段各自独立转录，所述第一节段包括编码核心蛋白的Core基因、编码HBV聚合酶的Pol基因和编码HBx的X基因，所述第二节段包括与前基因组RNA对应的核酸片段和与起始密码子对应的核酸片段，所述与起始密码子对应的核酸片段位于所述与前基因组RNA对应的核酸片段的转录方向的3
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端，在所述第二节段中，所述与起始密码子对应的核酸片段仅有一个，所述核酸不含编码HBs蛋白的S基因的表达框。2.根据权利要求1所述的核酸，其特征在于，所述第二节段还包括报告基因，所述报告基因、所述与前基因组RNA对应的核酸片段及所述起始密码子对应的核酸片段在所述第二节段的转录方向上依次连接。3.根据权利要求2所述的核酸，其特征在于，所述报告基因选自荧光素酶基因、氯霉素乙酰转移酶基因、β
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半乳糖苷酶基因、分泌性人胎盘碱性磷酸酶基因和绿色荧光蛋白基因中的至少一种。4.根据权利要求3所述的核酸，其特征在于，所述Core基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；及/或，所述Pol...

【专利技术属性】
技术研发人员：李锋，冯成千，
申请(专利权)人：广州市第八人民医院，
类型：发明
国别省市：