一种精准调控α-葡聚糖酶解反应并定向萃取特定分子量产物的方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种精准调控α

【技术实现步骤摘要】
一种精准调控
α
‑
葡聚糖酶解反应并定向萃取特定分子量产物的方法及其应用


[0001]本专利技术属于生化分离
，涉及一种水相萃取技术的扩展应用，尤其涉及一种精准调控α
‑
葡聚糖酶解反应并定向萃取特定分子量产物的方法及其应用。

技术介绍

[0002]食品或者药品工业目前所需低分子量的α
‑
葡聚糖生产流程为：发酵
‑
乙醇沉淀
‑
水解
‑
分离纯化
‑
冻干。其中水解方法主要有酶解和酸解两种，也有方法将发酵和水解工序同时进行，例如CN101205257是通过发酵得到高分子量的α
‑
葡聚糖后酸解到目标分子量产物，再经多级膜分离、离子交换树脂脱盐和活性炭脱色等步骤获得成品。酸解对最终产物的分子量分布范围控制能力较好，但强酸会引起较多副反应，特别是产生大量单糖，可能增大下游产品色值。CN103993052是通过使用水解酶在发酵过程中直接对分子量进行控制，实现一步制备。酶解具有较高特异性，但不同来源的同工酶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种精准调控α
‑
葡聚糖酶解反应并定向萃取特定分子量产物的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)标准曲线的制备a)分别配置质量分数为0％～25％的α
‑
葡聚糖标准溶液和质量分数为50％～60％的聚乙二醇溶液，将上述α
‑
葡聚糖标准溶液逐滴加入聚乙二醇溶液中至混合液出现浑浊，记录混合液中质量分数为0％～25％的α
‑
葡聚糖溶液变浑浊时对应的聚乙二醇溶液的质量分数，以混合液中α
‑
葡聚糖标准溶液的质量分数为横坐标，聚乙二醇溶液的质量分数为纵坐标制作α
‑
葡聚糖
‑
聚乙二醇标准曲线；b)分别配置质量分数为0％～25％的盐溶液和质量分数为50％～60％的聚乙二醇溶液，将上述盐溶液逐滴加入聚乙二醇溶液中至混合液出现浑浊，记录混合液中质量分数为2％～14％的盐溶液变浑浊时对应的聚乙二醇溶液的质量分数，以混合液中盐溶液的质量分数为横坐标，聚乙二醇溶液的质量分数为纵坐标制作盐
‑
聚乙二醇标准曲线；c)根据步骤a)的α
‑
葡聚糖
‑
聚乙二醇标准曲线和步骤b)的盐
‑
聚乙二醇标准曲线结合发酵液中α
‑
葡聚糖的质量分数确定实际萃取过程中聚乙二醇溶液和盐溶液的用量；(2)按步骤(1)中制作的标准曲线指示，取聚乙二醇(PEG8000)和待测α
‑
葡聚糖的混合液，震荡混合，静置分层，从上到下分成两层，上相为聚乙二醇相、下相为α
‑
葡聚糖相，将α
‑
葡聚糖酶溶液加入到下相两相界面接近处，轻微震荡后，保温，观察到两相开始混合后，向混合液中注入盐溶液至其最终质量分数为2％～14％，静置待重新分层，离心，此时液体分成两相，取下相，加入酒精，离心，取沉淀即为目标低分子量α
‑
葡聚糖；上相加入硫酸镁溶液，震荡后静置分层，上相为聚乙二醇相，下相为盐溶液相，取下相，超滤脱盐浓...

【专利技术属性】
技术研发人员：黎志德，张九花，黄曾慰，梁达奉，柳颖，刘桂云，常国炜，
申请(专利权)人：广东省科学院生物工程研究所，
类型：发明
国别省市：