与乳腺癌有关的外泌体SmallRNA及其应用制造技术

本申请涉及生物医学技术领域，尤其涉及一种与乳腺癌有关的外泌体SmallRNA及其应用，提供了与乳腺癌有关的外泌体SmallRNA，所述外泌体SmallRNA包括外泌体miRNA和外泌体piRNA；其中，所述外泌体miRNA包括miR

【技术实现步骤摘要】
与乳腺癌有关的外泌体SmallRNA及其应用


[0001]本申请属于生物医学
，尤其涉及一种与乳腺癌有关的外泌体SmallRNA及其应用。

技术介绍

[0002]乳腺癌多年来一直高居全球女性恶性肿瘤新发和死亡率榜首，2020年甚至超越肺癌成为全球所有性别中新发病例最多的癌症。乳腺癌的确切病因和发病机理尚不完全清楚，乳腺癌的防控仍以早诊早治为主。因此，分析乳腺癌的危险因素，建立风险评估模型，对高危个体进行风险预测和筛查，采取有针对性的干预措施，实现高危人群的精准防治具有非常重要的科学意义。乳腺癌风险预测模型是以流行病学及遗传危险因素为基础，预测具有某些危险因素的女性在未来一定时间内发生乳腺癌的风险。目前国际上应用最广的模型是以Gail 模型为代表的经验型模型和以BRCAPRO模型为代表的基因型模型。经验型模型主要包括Gail 模型和Claus 模型；基因型模型主要包括BRCAPRO 模型、BOADICEA 模型、MyriadⅡ模型及Couch 模型。经验型模型纳入的是初潮年龄、初产年龄和家族史等因素；基因型模型纳入了与乳腺癌发病相关的BRCA1 和BRCA2等基因。
[0003]随着现代分子医学技术的发展，外泌体在乳腺癌发病机制中的作用逐渐被人们所重视。外泌体是指由细胞通过胞吐或芽生等方式分泌的直径在30
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150nm的囊泡，它来源于几乎所有类型的体细胞，其囊泡内包含的蛋白质、RNA和脂类，可参与调控重要的细胞生理活动，包括免疫应答、凋亡、血管生成、炎症反应和凝结等。而肿瘤细胞来源的外泌体被认为有望成为肿瘤的早期诊断标记物、靶向药物载体或治疗的潜在靶点。其中外泌体miRNA和piRNA被细胞生物学研究发现与乳腺癌细胞微环境形成、增殖分化、迁移有关。
[0004]目前乳腺癌相关基因的单核苷酸多态性(SNP)仍然是被广泛认可和应用的乳腺癌风险预测因素。国内外研究者已发现了许多与乳腺癌发病相关的SNP位点。利用这些位点所包含的遗传信息建立乳腺癌风险预测模型、制备诊断试剂、开发靶向药物等已得到应用。受技术的限制，外泌体小RNA在人群中的应用尚未得到推广。

技术实现思路

[0005]本申请的目的在于提供一种与乳腺癌有关的外泌体SmallRNA及其应用，旨在解决现有技术中尚未有与乳腺癌相关的外泌体小RNA相关应用的问题。
[0006]为实现上述申请目的，本申请采用的技术方案如下：第一方面，本申请提供一种与乳腺癌有关的外泌体SmallRNA，外泌体SmallRNA包括外泌体miRNA和外泌体piRNA；其中，外泌体miRNA包括miR
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484、miR
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548ap
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5p和miR
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6824
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3p中的至少一个，外泌体piRNA包括pir
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36340。
[0007]第二方面，本申请提供一种与乳腺癌有关的外泌体SmallRNA在制备乳腺癌早期诊断的产品中的应用，外泌体SmallRNA为与乳腺癌有关的外泌体SmallRNA。
[0008]第三方面，本申请提供一种用于预测乳腺癌患病风险的试剂盒，试剂盒包括用于
检测与乳腺癌有关的外泌体SmallRNA的试剂。
[0009]第四方面，本申请提供一种预测乳腺癌患病风险的系统，系统包括：数据获取单元：用于获取样本中与乳腺癌有关的外泌体SmallRNA的表达水平；数据分析单元：利用风险评分公式处理将表达水平的数据并进行正态转换，计算相应的风险评分；数据预测单元：确定阈值，将所述风险评分根据所述阈值进行区分，以预测乳腺癌患病风险。
[0010]本申请第一方面提供的一种与乳腺癌有关的外泌体SmallRNA，外泌体SmallRNA包括外泌体miRNA和外泌体piRNA；其中，外泌体miRNA包括miR
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484、miR
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548ap
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5p和miR
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6824
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3p，外泌体piRNA包括pir
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36340；提供的外泌体miRNA和piRNA与乳腺癌细胞微环境形成、增殖分化、迁移有关，通过对miR
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484、miR
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548ap
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5p、miR
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6824
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3p、pir
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36340进行检测，可有效判断乳腺癌的患病风险，并且外泌体SmallRNA含量稳定，易于获得，在检测过程中方法简单、速度较快，有利于推广应用。
[0011]本申请第二方面提供的与乳腺癌有关的外泌体SmallRNA在制备乳腺癌早期诊断的产品中的应用，采用4种外泌体小RNA miR
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484、miR
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548ap
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5p、miR
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6824
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3p、pir
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36340进行相关的诊断产品的制备，得到的产品在检测分析过程中，不需要筛选和制备特异性抗体，可直接进行检测，在检测过程中，提高了检测速率，检测简单快速，不会造成假阳性，更有利于全面、准确用于预测乳腺癌患病风险。
[0012]本申请第三方面提供的用于预测乳腺癌患病风险的试剂盒，试剂盒包括用于检测与乳腺癌有关的外泌体SmallRNA的试剂，根据提供的试剂可快速检测相应的外泌体小RNA，简单快速，成本较低，速度快，效率高，可信度高，结果可靠。
[0013]本申请第四方面提供的用于预测乳腺癌患病风险的系统，提供的系统包括数据获取单元、数据分析单元、数据预测单元；该系统首先获取的外泌体小RNA的表达水平的数据，再利用特定的风险评分公式进行处理得到相应的风险评分，利用有统计学关键的因素建立风险评估模型，利用该模型可进行乳腺癌风险评估和筛查，准确快速预测乳腺癌患病风险，预测结果准确度较高，可信度较高，对识别出来的高危样本采取有针对性的干预措施，可广泛应用。
附图说明
[0014]为了更清楚地说明本申请实施例中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0015]图1是本申请实施例提供的外泌体的粒径和浓度分析图。
[0016]图2是本申请实施例提供的外泌体透射电镜观察图。
[0017]图3是本申请实施例提供的外泌体特异表面蛋白标志物检测图。
[0018]图4是本申请实施例提供的外泌体small RNA火山图分析。
[0019]图5是本申请实施例提供的 Logistic回归模型ROC曲线分析。
[0020]图6是本申请实施例提供的流式细胞仪检测外泌体特异性标记蛋白CD63和CD81结
果图。
[0021]图7是本申请实施例提本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种与乳腺癌有关的外泌体SmallRNA，其特征在于，所述外泌体SmallRNA包括外泌体miRNA和外泌体piRNA；其中，所述外泌体miRNA包括miR
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484、miR
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548ap
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5p和miR
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6824
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3p中的至少一个，所述外泌体piRNA包括pir
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36340。2.根据权利要求1所述的与乳腺癌有关的外泌体SmallRNA，其特征在于，所述外泌体SmallRNA包括miR
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484、miR
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548ap
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5p、miR
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6824
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3p、pir
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36340中的一个或多个。3.根据权利要求2所述的与乳腺癌有关的外泌体SmallRNA，其特征在于，所述外泌体SmallRNA包括miR
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484、miR
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548ap
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5p、miR
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6824
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3p、pir
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36340中的任意二个。4.根据权利要求2所述的与乳腺癌有关的外泌体SmallRNA，其特征在于，所述外泌体SmallRNA包括miR
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484、miR
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548ap
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5p、miR
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6824
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3p、pir
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36340中的任意三个。5.一种与乳腺癌有关的外泌体SmallRNA在制备乳腺癌早期诊断的产品中的应用，其特征在于，所述外泌体S...

【专利技术属性】
技术研发人员：莫俊銮，洪文旭，刘扩军，彭绩，雷林，杨慧，
申请(专利权)人：深圳市慢性病防治中心深圳市皮肤病防治研究所，深圳市肺部疾病防治研究所，
类型：发明
国别省市：