【技术实现步骤摘要】
一种碱性磷酸酶活性的荧光检测方法及试剂盒
[0001]本申请涉及酶检测
，尤其涉及一种碱性磷酸酶活性的荧光检测方法及试剂盒。
技术介绍
[0002]碱性磷酸酶(ALP)是一种哺乳动物组织中的重要水解酶，具有催化磷酸酯的水解和磷酸化功能。作为医疗诊断的关键生物标记物，ALP主要存在于肝脏、肾脏、肠道、骨骼和血清中，健康成人血清中ALP活性范围为46～190mU/mL，若表达水平异常，会造成心力衰竭、肾功能恶化、肝功能障碍、胆汁淤积、血管钙化、骨病和乳腺癌等疾病。为了保护人类健康，对ALP进行早期诊断与检测是迫在眉睫的事情。迄今为止，对ALP的检测方法主要包括：比色法、表面增强拉曼散射法、电化学分析法和色谱分析法等。在这些检测方法中，荧光检测技术因其固有的优势，如高灵敏度、实时检测和原位成像的特点而被广泛关注。目前，有机荧光分子、半导体量子点、金纳米簇、铜纳米簇等多种荧光材料被用于ALP的检测中。但是有机荧光探针水溶性较差，半导体量子点毒性较大，荧光共聚物制备步骤复杂且费时，贵金属纳米簇成本较高且稳定性差。因此，开发能够用...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种碱性磷酸酶活性的荧光检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：将4
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氨基苯磷酸钠盐添加至缓冲液中，获得第一混合液；S2：在所述第一混合液中，加入碱性磷酸酶得到第二混合液；S3：加热使所述第二混合液反应后得到第三混合液；S4：在所述第三混合液中，加入(3
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氨基丙基)三甲氧基硅烷液体，继续加热得到第四混合液；S5：通过荧光光谱仪收集所述第四混合液在455nm处的发射峰强度，并根据发射峰强度计算碱性磷酸酶的活性。2.根据权利要求1所述的碱性磷酸酶的荧光检测方法，其特征在于，所述第一混合液中4
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氨基苯磷酸钠盐溶液的浓度为1
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100mM。3.根据权利要求1所述的碱性磷酸酶的荧光检测方法，其特征在于，所述步骤S3的加热温度为40
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90℃，所述步骤S3的加热时间为15
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120min。4.根据权利要求1所述的碱性磷酸酶的荧光检测方法，其特征在于，步骤S4中所述(3
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氨基丙基)三甲氧基硅烷液体与所述第三混合液的体积比为1:7
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3:4。5.根据权利要求1所述的碱性磷酸酶的荧光检测方法，其特...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘玉菲，韩亚琴，张国秀，张佳婧，李美铮，
申请(专利权)人：重庆大学，
类型：发明
国别省市：
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