一种基于控制释放ZIF-8屏蔽壳层的光电化学NSE传感器的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种基于葡萄糖酸分解ZIF

【技术实现步骤摘要】
一种基于控制释放ZIF
‑
8屏蔽壳层的光电化学NSE传感器的制备方法


[0001]本专利技术属于纳米功能材料、免疫分析以及生物传感
，具体将氧化铟纳米颗粒和钒酸铋以及ZIF
‑
8 (In2O
3 NPs/BiVO
4 NPs/ZIF
‑
8)作为基底材料，二氧化硅(SiO2)负载的葡萄糖氧化酶作为二抗标记物，构建了检测神经元特异性烯醇化酶的光电化学传感器的制备方法。

技术介绍

[0002]神经元特异性烯醇化酶(NSE)是参与糖酵解途径的烯醇化酶中的一种，存在于神经组织和神经内分泌组织中，是一种有前景的用于小细胞癌诊断的疾病标志物，它比其他已知的疾病标志物对脓毒症的诊断更灵敏。NSE在正常人体内的含量低于16.3 ng/mL，但当发生小细胞癌(SCLC)、神经母细胞瘤时，血清中的含量会迅速增加。临床医学的研究表明，神经元特异性烯醇化酶(NSE)是一种在临床上很有应用价值的分子学标记物。这是从2个方面的应用来评述的，一是NSE可以作为肺癌和儿童神经母细胞瘤的肿瘤标记物，用于小本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于控制释放ZIF
‑
8屏蔽壳层的光电化学NSE传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1) 将2.5 cm
ꢀ×ꢀ
0.8 cm的ITO导电玻璃依次用丙酮、乙醇和超纯水分别超声清洗30 min，氮气吹干；2) 将10
ꢀµ
L、5
‑
8 mg/mL 分散均匀的In2O3的悬浮液滴涂在ITO导电玻璃上，在室温下晾干；3) 然后分别将涂覆In2O3的ITO导电玻璃在15
‑
25 mM Bi(NO)3和15
‑
20 mM NH4VO3溶液中蘸60 s，称之为一个循环，每一个循环要用超纯水轻轻冲洗，并且重复上述循环20
‑
30次；此时电极变为In2O
3 NPs/BiVO
4 NPs电极；4) 在In2O
3 NPs/BiVO
4 NPs电极上滴涂10
ꢀµ
L ZIF
‑
8溶液得到In2O
3 NPs/BiVO
4 NPs/ZIF
‑
8电极；5) 首先取80
‑
100
ꢀµ
L、1
ꢀµ
g/mL NSE捕获抗体Ab1溶液滴加到96
‑
微孔板中，4℃冰箱保湿过夜，之后用磷酸盐缓冲溶液（PBS）洗涤三次；6) 继续加入100
ꢀµ
L、质量分数为0.1~1.0 %的牛血清白蛋白溶液，室温下孵育1 h以封闭未结合Ab1的非特异性活性位点；7) 继续用PBS洗涤两到三次，加入100
ꢀµ
L、0.1 pg/mL ~ 10 ng/mL NSE抗原溶液，室温下孵育1 h；8) 继续加入100
ꢀµ
L SiO2‑
GOx
‑
Ab2的孵化物，室温下孵育1 h，用PBS洗涤两到三次后，加入10
‑
25 mM的葡萄糖溶液，孵育1 h，取孵育后的溶液10
ꢀµ
L滴涂在In2O
3 NPs/BiVO
4 NPs/ZIF
‑
8电极表面，4 ℃冰箱中保湿后晾干，制得了修饰完全的ITO电极，即一种检测NSE分离式光电化学免疫传感器。2.如权利要求1所述的一种基于控制释放ZIF
‑
8屏蔽壳层的光电化学NSE传感器的制备方法，所述In2O
3 NPs的制备，步骤如下：140
‑
146.5 mg的五水合硝酸铟（In(NO3)3·
5H2O）与0.1
‑
1.0 g尿素彻底混合，溶于8
‑
13 mL二甘醇0
‑
2 mL超纯水的混合溶液中，磁力搅拌至完全溶解，转移至含有聚四氟乙烯内胆的反应釜中加热至150
‑
200 ℃反应24 h，待温度冷却到室温后，得到的产品分别用水和乙醇离心清洗几次，最后在真空干燥箱中干燥过夜后得到In2O
3 NPs。3.如权利要求1所述的一种基于控制释放ZIF
‑
8屏蔽壳层的光电化学NSE传感器的制备方法，所述BiVO
4 NPs的制备，步骤如下：BiVO
4 NPs的制备是通过连续的离子吸附与反应：分别将10
ꢀµ
L、5
‑
10 mg/mL分散均匀的In2O
3 NPs的悬浮液滴涂在ITO导电玻璃上，在室温下晾干；然后分别将涂覆In2O
3 NPs的ITO导电玻璃在15
‑
25 mM Bi(NO)3和1...

【专利技术属性】
技术研发人员：白宇，冯涛，刘成庆，徐晓龙，周金芝，鞠熀先，魏琴，
申请(专利权)人：济南大学，
类型：发明
国别省市：