具有促进烟株生长功能的微生物菌肥、制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种具有促进烟株生长功能的微生物菌肥、制备方法及其应用。本发明专利技术具有促进烟株生长功能的微生物菌肥的制备方法包括如下步骤：分别制备解淀粉芽孢杆菌YWF

【技术实现步骤摘要】
具有促进烟株生长功能的微生物菌肥、制备方法及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物肥料
，尤其涉及一种具有促进烟株生长功能的微生物菌肥、制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]烟草是中国重要的叶用经济作物之一，其生长发育、营养获取和品质形成与微生物学特性和土壤环境密切相关。微生物菌肥在烟草种植中的主要作用表现为以下几点：(1)协助烟草对营养的吸收；(2)改良植烟土壤，改善农业生态环境；(3)提高烟叶的产量和质量；(4)提高烟草抗病虫害能力。
[0003]云南烟草近年来受到干旱影响的情况时有发生，加之各地烟草品种、育苗水平及种植管理水平等均存在差异，导致烟草生长发育参差不齐，烟株抗性有差别，加之烟叶生产过程中，对农残管控严格，利用功能微生物提升烟叶产质量、提高烟叶抗性是烟草农业绿色、生态发展的必然要求。
[0004]因此，筛选针对烟草生根、壮根的功能菌剂制备成微生物菌肥用于提高烟草生根数量及促进根系发育健壮，从而提高烟株对养分的吸收，降低烟株因根系发育弱而产生根部病害的风险，提升烟叶营养抗性，保证烟叶生产质量和产量，已成为本领域技术人员亟待解决的技术问题。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提出一种具有促进烟株生长功能的微生物菌肥、制备方法及其应用，解决了现有技术中烟叶生产过程中，烟草生长发育参差不齐、抗病虫害能力存在差异的技术问题。本专利技术优选技术方案所能产生的诸多技术效果详见下文阐述。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供了以下技术方案：
[0007]本专利技术具有促进烟株生长功能的微生物菌肥的制备方法，包括如下步骤：
[0008]分别制备解淀粉芽孢杆菌YWF
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0001和枯草芽孢杆菌D23的发酵液；
[0009]将所述解淀粉芽孢杆菌YWF
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17
‑
0001发酵液和所述枯草芽孢杆菌D23发酵液混合制得具有促进烟株生长功能的复合微生物菌液；
[0010]将复合微生物菌液与助剂混合制得具有促进烟株生长功能的微生物菌肥，并使每克微生物菌肥中的有效活菌数为2.0
×
108cfu/g
‑
4.0
×
108cfu/g。
[0011]本专利技术的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)，其编号为YWF
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0001，保藏登记号为CGMCC No.23617，保藏日期2021年10月18日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。解淀粉芽孢杆菌YWF
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0001形态特征：在PDA培养基上呈乳白色圆形菌落，表面及边缘光滑，无隔膜，菌落半透明，较为浓稠。
[0012]本专利技术的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，其编号为D23，保藏登记号为CGMCC No.23613，保藏日期2021年10月18日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生
物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。枯草芽孢杆菌D23形态特征：在LB培养基上呈淡黄色圆形菌落，表面呈火山口状凹陷，边缘光滑，无隔膜，菌落半透明，无粘
[0013]根据一个优选实施方式，制备具有促进烟株生长功能的复合微生物菌液时，将所述解淀粉芽孢杆菌YWF
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17
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0001发酵液和所述枯草芽孢杆菌D23发酵液按照重量比为2∶1的比例混合，并使复合微生物菌液中的有效活菌数大于2.0
×
109cfu/g。
[0014]根据一个优选实施方式，将复合微生物菌液与助剂混合制得具有促进烟株生长功能的微生物菌肥时，所述复合微生物菌液的重量百分数为10
‑
20％，所述助剂的重量百分数为80
‑
90％，所述复合微生物菌液的重量百分数与所述助剂的重量百分数之和为100％，并且所述复合微生物菌液与所述助剂混合后连续搅拌10min以上即制得具有促进烟株生长功能的微生物菌肥。
[0015]根据一个优选实施方式，所述助剂包括如下重量份的成分：3.5％聚谷氨酸4
‑
6份，蒙脱石粉8
‑
12份，凹凸棒4
‑
6份，阳离子型聚丙烯酰胺1
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2份，油枯型腐熟有机肥25
‑
30份。
[0016]根据一个优选实施方式，分别制备解淀粉芽孢杆菌YWF
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17
‑
0001和枯草芽孢杆菌D23的发酵液包括如下步骤：
[0017]菌种活化：将－80℃条件下采用甘油保存的解淀粉芽孢杆菌YWF
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17
‑
0001和枯草芽孢杆菌D23保存液取0.1ml接种到10ml的牛肉膏蛋白胨液体培养基中，在温度为30℃
‑
37℃、转速为150rpm条件下活化培养36h
‑
48h，得到解淀粉芽孢杆菌YWF
‑
17
‑
0001菌种和枯草芽孢杆菌D23菌种的活化培养液；
[0018]菌种纯化：采用灭菌接种环将活化培养液中的菌种接种到牛肉膏蛋白胨固体培养基平板上，进行纯化划线培养，在温度为33℃
‑
37℃的培养箱中培养1
‑
3天，选取菌落特征符合功能菌种菌落特征的单一较大菌落作为活化后的种子菌落；
[0019]种子液制备：用无菌接种环刮取一环前一步中活化的种子菌落接种到50ml牛肉膏蛋白胨液体培养基中，在温度为33℃
‑
37℃、转速为150rpm条件下活化培养54h
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72h，得解淀粉芽孢杆菌YWF
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0001和枯草芽孢杆菌D23的种子液；
[0020]发酵液制备：按照1
‰
的比例分别将解淀粉芽孢杆菌YWF
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17
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0001和枯草芽孢杆菌D23的种子液接种到发酵罐中的发酵培养液中，在温度为33℃
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37℃，转速为160rpm/min条件下培养48h
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60h分别得解淀粉芽孢杆菌YWF
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0001和枯草芽孢杆菌D23的发酵液。
[0021]根据一个优选实施方式，所述牛肉膏蛋白胨液体培养基包括如下重量份的成分：牛肉膏1
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2份、蛋白胨4
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6份、氯化钠2
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3份、水450
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550份，并且所述牛肉膏蛋白胨液体培养基的pH采用盐酸和氢氧化钠调节至6
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8。
[0022]根据一个优选实施方式，所述牛肉膏蛋白胨固体培养基包括如下重量份的成分：牛肉膏1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有促进烟株生长功能的微生物菌肥的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：分别制备解淀粉芽孢杆菌YWF
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0001和枯草芽孢杆菌D23的发酵液；将所述解淀粉芽孢杆菌YWF
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17
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0001发酵液和所述枯草芽孢杆菌D23发酵液混合制得具有促进烟株生长功能的复合微生物菌液；将复合微生物菌液与助剂混合制得具有促进烟株生长功能的微生物菌肥，并使每克微生物菌肥中的有效活菌数为2.0
×
108cfu/g
‑
4.0
×
108cfu/g。2.根据权利要求1所述的具有促进烟株生长功能的微生物菌肥的制备方法，其特征在于，制备具有促进烟株生长功能的复合微生物菌液时，将所述解淀粉芽孢杆菌YWF
‑
17
‑
0001发酵液和所述枯草芽孢杆菌D23发酵液按照重量比为2∶1的比例混合，并使复合微生物菌液中的有效活菌数大于2.0
×
109cfu/g。3.根据权利要求1所述的具有促进烟株生长功能的微生物菌肥的制备方法，其特征在于，将复合微生物菌液与助剂混合制得具有促进烟株生长功能的微生物菌肥时，所述复合微生物菌液的重量百分数为10
‑
20％，所述助剂的重量百分数为80
‑
90％，所述复合微生物菌液的重量百分数与所述助剂的重量百分数之和为100％，并且所述复合微生物菌液与所述助剂混合后连续搅拌10min以上即制得具有促进烟株生长功能的微生物菌肥。4.根据权利要求1所述的具有促进烟株生长功能的微生物菌肥的制备方法，其特征在于，所述助剂包括如下重量份的成分：3.5％聚谷氨酸4
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6份，蒙脱石粉8
‑
12份，凹凸棒4
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6份，阳离子型聚丙烯酰胺1
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2份，油枯型腐熟有机肥25
‑
30份。5.根据权利要求1至4中任一项所述的具有促进烟株生长功能的微生物菌肥的制备方法，其特征在于，分别制备解淀粉芽孢杆菌YWF
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17
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0001和枯草芽孢杆菌D23的发酵液包括如下步骤：菌种活化：将－80℃条件下采用甘油保存的解淀粉芽孢杆菌YWF
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17
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0001和枯草芽孢杆菌D23保存液取0.1ml接种到10ml的牛肉膏蛋白胨液体培养基中，在温度为30℃
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37℃、转速为150rpm条件下活化培养36h
‑
48h，得到解淀粉芽孢杆菌YWF
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17
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0001菌种和枯草芽孢杆菌D23菌种的活化培养液；菌种纯化：采用灭菌接种环将活化培养液中的菌种接种到牛肉膏蛋白胨固体培养基平板上，进行纯化划线培养，在温度为33℃
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37℃的培养箱中培养1
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3天，选取菌落特征符合功能菌种菌落特征的单一较大菌落作为活化后的种子菌落；种子液制备...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙军伟，尚海丽，范志勇，户艳霞，王德勋，李娟，余源，何海萍，苏家恩，蒯雁，盘文政，王斌，张琪，
申请(专利权)人：云南省微生物发酵工程研究中心有限公司，
类型：发明
国别省市：