一种缓解溃疡性结肠炎的长双歧杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种缓解溃疡性结肠炎的长双歧杆菌及其应用，属于微生物技术领域。本发明专利技术的长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)NSP001能够刺激人源结肠癌细胞Caco

【技术实现步骤摘要】
Crohns Colitis,2014,8:469
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479.)，但目前尚未有任何专利文献报道长双歧杆菌对结肠炎伴随的代谢紊乱的缓解作用。

技术实现思路

[0005]本专利技术筛选出了一种具有促进自由基清除、缓解溃疡性结肠炎的长双歧杆菌，并证明其在不同肠道菌群背景下均可缓解肠道炎症，同时还能够进一步预防或缓解肠炎伴随的机体代谢紊乱。在溃疡性结肠炎的膳食干预方面具有重要意义和广阔前景。
[0006]本专利技术提供一株长双岐杆菌(Bifidobacterium longum)NSP001及其应用，长双岐杆菌 (Bifidobacterium longum)NSP001在鼠源及人源肠道菌群环境下均能够缓解宿主溃疡性结肠炎。
[0007]本专利技术的第一个目的是提供一株长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)NSP001，已于2021 年1月19日保藏于广东省科学院微生物研究所，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59 号楼5楼，保藏编号为GDMCC No:61439。
[0008]所述长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)NSP001是从来源于江西南昌地区的健康人体粪便样本中分离得到的，该菌株经测序分析，并将测序得到的序列在NCBI中进行核酸序列比对，结果显示菌株为长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)。
[0009]所述的长双歧杆菌NSP001具有下列性质：
[0010]菌体特征：革兰氏染色阳性杆状细菌，有时呈Y型或V型，无孢子，无鞭毛，菌体约 0.5
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1.5μm宽，1.3
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8μm长。
[0011]菌落特征：在培养基上形成明显地菌落，直径在0.3
‑
2mm之间，正面形态圆形，中间凸起，边缘整齐，微白，不透明，表面湿润光滑。
[0012]生长特性：该菌株为专性厌氧菌，最适生长温度是36℃
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38℃，最适生长pH值为6.6
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7.0，在含有葡萄糖的培养基中生长良好，16
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24h可进入对数后期或稳定前期。
[0013]本专利技术第二个目的是提供含有所述长双歧杆菌NSP001的微生物菌剂。
[0014]在一种实施方式中，所述微生物菌剂的制备方法为：将长双歧杆菌NSP001接种至已灭菌的培养基中，接种量为2
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4％(v/v)，于35
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37℃厌氧培养16
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24h，离心并采用pH 7.2
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7.4 的磷酸盐缓冲液清洗3次，用冻干保护剂重悬，通过真空冷冻干燥工艺制备所得到的粉剂。
[0015]在本专利技术的一种实施方式中，所述培养基包含87.7％的水、10％的脱脂乳、0.5％的葡萄糖、1.5％的胰蛋白胨以及0.3％的酵母浸膏。
[0016]在本专利技术的一种实施方式中，所述培养基的pH为6.6
‑
7.0。
[0017]在本专利技术的一种实施方式中，所述培养基的灭菌方式为115～121℃条件下杀菌15～20 min。
[0018]在本专利技术的一种实施方式中，所述冻干保护剂包含90～110g/L的脱脂奶粉、125～175g/L 的海藻糖以及8～12g/L的L
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谷氨酸钠。
[0019]在本专利技术的一种实施方式中，所述微生物菌剂中，长双歧杆菌NSP001的活菌数不低于 1
×
106CFU/mL。
[0020]本专利技术的第三个目的是提供所述长双歧杆菌NSP001或上述微生物菌剂在制备用于预防和/或治疗溃疡性结肠炎的产品的应用。
[0021]在本专利技术的一种实施方式中，所述产品包括食品、药品及保健品。
[0022]在本专利技术的一种实施方式中，所述产品中，长双歧杆菌NSP001的活菌数不低于1
×
10
6 CFU/mL或1
×
106CFU/g。
[0023]本专利技术的一种实施方式中，所述食品包括饮料、奶制品或其他含有权利要求1所述的长双歧杆菌NSP001的食品。
[0024]在本专利技术的一种实施方式中，所述药物或保健品的剂型包括颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂或口服液等剂型。
[0025]在本专利技术的一种实施方式中，所述产品可以是由长双歧杆菌NSP001与可接受的辅料组成。
[0026]在本专利技术的一种实施方式中，所述可接受的辅料包括一种或多种通常使用的增稠剂、抗氧化剂、酸碱调节剂、乳化剂、防腐剂、填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂及矫味剂等。
[0027]本专利技术的一种实施方式中，所述填充剂为淀粉、蔗糖、乳糖、硫酸钙和/或微晶纤维素。
[0028]在本专利技术的一种实施方式中，所述粘合剂为纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和/或聚乙烯吡咯烷酮。
[0029]在本专利技术的一种实施方式中，所述润湿剂为水、乙醇、淀粉和/或糖浆。
[0030]在本专利技术的一种实施方式中，所述崩解剂为羧甲基淀粉钠、羧丙纤维素、交联羧甲基纤维素、琼脂、碳酸钙和/或碳酸氢钠。
[0031]在本专利技术的一种实施方式中，所述润滑剂为滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、微粉硅胶和/ 或聚乙二醇。
[0032]在本专利技术的一种实施方式中，所述矫味剂为单糖浆、蔗糖、卵磷脂、橙皮糖浆、樱桃糖浆、柠檬、茴香、薄荷油、海藻酸钠、阿拉伯胶、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、柠檬酸、酒石酸和/或碳酸氢钠。
[0033]有益效果：
[0034]1.本专利技术筛选出了一株长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)NSP001，具有促进自由基清除、缓解急性结肠炎症的作用，具体体现在：
[0035]1)能够上调人源结肠癌细胞Caco
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2产生的超氧化物歧化酶(SOD)，SOD表达水平上调2.44％促进自由基清除；
[0036]2)能够在鼠源及人源肠道菌群环境下降低溃疡性结肠炎小鼠的疾病活动指数(DAI)，改善结肠萎缩，缓解结肠炎症；
[0037]3)能够在鼠源及人源肠道菌群环境下降低溃疡性结肠炎小鼠的肠道通透性，缓解结肠组织损伤；
[0038]4)能够在鼠源及人源肠道菌群环境下降低溃疡性结肠炎小鼠的结肠组织中促炎因子 TNF
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α、IL
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6的分泌及髓过氧化物酶(MPO)的水平；
[0039]5)能够在鼠源及人源肠道菌群环境下增加溃疡性结肠炎小鼠的结肠内容物中短链脂肪酸的浓度。
[0040]6)在长双歧杆菌NSP001干预下，肠炎小鼠血清中与机体能量代谢相关的TCA循环及神经传导相关的关键代谢物得到明显恢复，从而改善相应的代谢通路，进而预防或恢复
肠炎伴随的代谢紊乱。
[0041]2.长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)是益生菌的一种，目前已被纳入卫生部下发的《可用于食品的菌种名单》。因此，本专利技术筛选得本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)NSP001，已于2021年1月19日保藏于广东省科学院微生物研究所，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为GDMCC No:61439。2.一种微生物菌剂，其特征在于，含有权利要求1所述长双歧杆菌NSP001。3.如权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于，长双歧杆菌NSP001的活菌数不低于106CFU/g。4.权利要求1所述长双歧杆菌NSP001或权利要求2所述的微生物菌剂在制备用于缓解溃疡性结肠炎的产品方面的应用。5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述产品包括食品、药品或保健品。6.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述产品中，长双歧杆菌NSP00...

【专利技术属性】
技术研发人员：聂少平，谭惠子，陈梦麟，姚虹，陈晓敏，吴泉勇，兰天，
申请(专利权)人：南昌大学，
类型：发明
国别省市：