用于侦测精子DNA片段化的方法以及试剂盒技术

本发明专利技术涉及用于侦测精子DNA片段化的方法以及试剂盒。本发明专利技术揭示一种用于侦测一精液样品中的精子的DNA片段化的方法，其包含下列步骤：令该精液样品包埋于一具有2nm以上且小于60nm的孔径的凝胶，而得到一包埋有精子的凝胶；以一裂解液来对该包埋有精子的凝胶进行一裂解处理，而使得所述精子的核蛋白被裂解，其中该裂解液包含有尿素以及十二烷基硫酸钠；令该经裂解处理的凝胶进行一DNA染色；以及观察在该经染色的凝胶上是否有光晕形成于各个精子的头部外围，其中光晕形成的存在是精子DNA片段化存在的表征。本发明专利技术亦揭示一种用于进行该方法的试剂盒。该方法的试剂盒。该方法的试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
用于侦测精子DNA片段化的方法以及试剂盒


[0001]本专利技术是有关于用于侦测一精液样品中的精子的DNA片段化的方法。本专利技术亦有关于用于进行该方法的试剂盒。

技术介绍

[0002]精子DNA(sperm DNA)的完整性是影响胚胎质量(embryo quality)、胚胎着床(embryo implantation)以及胚胎发育(embryo development)的主要因素之一。当精子DNA因精子形成(spermiogenesis)发生错误、精子凋亡(sperm apoptosis)、氧化性压力(oxidative stress)或辐射(radiation)等因素而断裂成片段(包括单
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与双
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链DNA断裂)，亦即精子DNA片段化(sperm DNA fragmentation,SDF)，会造成男性不孕症(male infertility)、体外人工授精(IVF)失败[in vitro fertilization(IVF)failure]以及流产(miscarriage)的发生。因此，精子DNA片段本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于侦测一精液样品中的精子的DNA片段化的方法，其特征在于：该方法包含下列步骤：(a)令该精液样品包埋于一具有2nm以上且小于60nm的孔径的凝胶，借此而得到一包埋有精子的凝胶，其中该凝胶包含有一选自于由下列所构成的群组中的成分：丙烯酰胺、丙烯酸、甲基丙烯酸、N
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异丙基丙烯酰胺、海藻酸盐以及聚乙二醇；(b)以一裂解液来对该包埋有精子的凝胶进行一裂解处理，而使得所述精子的核蛋白被裂解，其中该裂解液包含有具有一浓度范围落在0.5至4M内的尿素以及具有一浓度范围落在0.05至0.5％(w/v，g/mL)内的十二烷基硫酸钠；(c)令该经裂解处理的凝胶进行一DNA染色；以及(d)观察在该经染色的凝胶上是否有光晕形成于各个精子的头部外围，其中光晕形成的存在是精子DNA片段化存在的表征。2.根据权利要求1所述的用于侦测一精液样品中的精子的DNA片段化的方法，其特征在于：在步骤(a)中，该凝胶具有一范围落在2.5至25nm内的孔径。3.根据权利要求2所述的用于侦测一精液样品中的精子的DNA片段化的方法，其特征在于：在步骤(a)中，该凝胶具有一范围落在3至10nm内的孔径。4.一种用于侦测一精液样品中的精子的DNA片段化的方法，其特征在于：该方法包含下列步骤：(a)令该精液样品包埋于一具有丙烯酰胺含量范围落在3至24％(w/v，g/mL)内的聚丙烯酰胺凝胶，借此而得到一包埋有精子的聚丙烯酰胺凝胶；(b)以一裂解液来对该包埋有精子的聚丙烯酰胺凝胶进行一裂解处理，而使得所述精子的核蛋白被裂解，其中该裂解液包含有具有一浓度范围落在0.5至4M内的尿素以及具有一浓度范围落在0.05至0.5％(w/v，g/mL)内的十二烷基硫酸钠；(c)令该经裂解处理的聚丙烯酰胺凝胶进行一DNA染色；以及(d)观察在该经染色的聚丙烯酰胺凝胶上是否有光晕形成于各个精子的头部外围，其中光晕形成的存在是精子DNA片段化存在的表征。5.根据权利要求4所述的用于侦测一精液样品中的精子的DNA片段化的方法，其特征在于：在步骤(a)中，该聚丙烯酰胺凝胶具有一范围落在4至22％(w/v，g/mL)内的丙烯酰胺含量。6.根据权利要求4所述的用于侦测一精液样品中的精子的DNA片段化的方法，其特征在于：在步骤(a)中，该聚丙烯酰胺凝胶具有一范围落在3至10nm内的孔径。7.根据权利要求4所述的用于侦测一精液样品中的精子的DNA片段化的方法，其特征在于：在步骤(a)中，该聚丙烯酰胺凝胶是通过使用呈一范围落在19：1(w/w)至199：1(w/w)内的比例的丙烯酰胺与双丙烯酰胺而被形成。8.根据权利要求7所述的用于侦测一精液样品中...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐振腾，张立昇，李琇琴，
申请(专利权)人：邦睿生技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：