一种基于多肽微阵列的抗原表位筛选方法及装置制造方法及图纸

本发明专利技术公开了一种基于多肽微阵列的抗原表位筛选方法及装置，该方法包括：确定蛋白质一级序列、多肽微阵列合成仪设置多肽序列长度和微阵列分布、制备多肽芯片、多肽芯片活化及多肽芯片应用；装置包括多肽微阵列合成仪，多肽微阵列合成仪包括高效过滤安全罩、机械臂、点样针、氨基酸溶液放置平台、点样针清洗模块、载体放置平台、预点样平台、微量注射泵。依据免疫反应原理，可筛选COVID

【技术实现步骤摘要】
一种基于多肽微阵列的抗原表位筛选方法及装置


[0001]本专利技术属于多肽阵列芯片
，具体涉及基于多肽微阵列的抗原表位筛选方法及装置。

技术介绍

[0002]多肽微阵列是一种新型的研究分子间相互作用的技术，为生物医学研究和药物开发提供强有力的平台。该技术通过多肽模拟蛋白分子与抗体或药物的结合，采用高通量分析技术，研究其分子间的相互作用，在疾病筛查、早期诊断、药物筛选等方面有显著优势。多肽芯片技术是将蛋白质分子分解成连续的多肽片段，采用固相合成技术将其固定在经过特殊处理的载体基质上，形成的微阵列芯片。这些多肽片段具有相应的生物分子特性，可捕获与之特异性结合的蛋白或药物，经过相应的生化分析，以获取相应的作用关系，如抗原表位识别、药物作用靶点的选择等。
[0003]多肽芯片是一种生物芯片，其原理是通过多肽微阵列合成仪将氨基酸按照设定序列，通过接触式点印技术将其固定在经特殊处理的载体基质上，经过后续处理而成多肽芯片。该多肽阵列具有极高密度特征，包含成百上千的多肽微阵列。将这些微阵列与待检测抗体、血清、蛋白反应，可用于高通量抗原表位筛选，用以揭示氨基酸与氨基酸、蛋白与蛋白之间的相互关系。现有的多肽合成，多为人工定制且单一多肽，该类合成技术产品效率低、产品纯度低、制作成本高，无法满足客户需求。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种多肽合成仪器，通过精准、定量移液至同一载体基质上同时合成不同序列的多肽，合成效率高、节省逐步合成反应的等待时间，有效节省了劳动时间，满足客户多种类多肽需求；该仪器搭载化学固相合成方法制作的多肽微阵列芯片，产品纯度高、稳定性高，应用于抗原表位筛选，助力疫苗开发；
[0005]为了实现本专利技术的上述目的，特采用如下技术方案：
[0006]所述多肽微阵列芯片设计：
[0007](1)依据客户使用需求，将待研究的抗原/蛋白质的一级结构序列导入合成仪软件；
[0008](2)以12个氨基酸为一个多肽，通过上述软件设计多肽微阵列，多肽的氨基酸数目可以大于或小于12个氨基酸；
[0009](3)设定多肽芯片上微阵列排布，包括阵列点上样体积、阵列排布和点间距离；
[0010]所述多肽微阵列芯片制作：
[0011](1)准备合成所需的氨基酸及其他试剂，氨基酸可为天然氨基酸衍生物也可为含至少一个氨基和一个羧基的化合物；
[0012](2)运行仪器，点样针将按照预先设定从氨基酸溶液放置平台精准定量移取指定溶液；
[0013](3)机械臂稳定移动带动点样针将移取的氨基酸溶液点印至载体基质上的指定位置；
[0014](4)载体基质平稳固定在载体放置平台上，平台上可同时放置一张或多张载体基质，载体所用基质材料依据用户需求而准备；
[0015](5)氨基酸溶液放置平台配制40样品孔板，试剂全开放，其中20个样品孔板固定氨基酸位置、20个样品孔板开放使用；
[0016](6)点样针每移取完一种氨基酸将自动清洗，以防止样品交叉污染。点样针清洗槽包含废液收集槽和清洗槽，各自独立设置在点样针清洗模块的两侧；
[0017](7)点样针通过连接微量注射泵实现精准定量洗液和喷液；
[0018]所述多肽微阵列芯片活化处理：
[0019](1)仪器将氨基酸溶液点印至经过特殊处理的载体基质的指定的位置上，获得多肽芯片半成品；
[0020](2)芯片钝化封闭。将合成的芯片静置于封闭液中，封闭芯片上未反应的活化基团，经乙醇洗涤后自然晾干，待下一步使用；
[0021](3)重复上述步骤(1)和(2)直至完成设定的点印设定，获得多肽芯片半成品；
[0022](4)芯片活性激活。将芯片静置于激活液中移除氨基酸上的保护基团以释放芯片上的氨基的活性，获得具有活性的多肽芯片；
[0023](5)晾干后
‑
20℃密封保存备用；
[0024]所述多肽微阵列芯片应用：
[0025](1)将上述制备的具有活性的多肽芯片水化；
[0026](2)将上述水化后的芯片与相应的抗体杂交反应；
[0027](3)将上述反应后的芯片放置于ECL化学发光试剂中反应，并用相应仪器扫描芯片，分析结果。
[0028]本专利技术同
技术介绍
相比所产生的有益效果：
[0029]通过采用上述技术方案，本专利技术利用一种多肽微阵列合成装置固相合成多肽芯片，用以抗原表位筛选。采用多肽微阵列仪，设计多肽序列，逐层在经过特殊处理的载体基质上点印氨基酸合成多肽芯片。所合成的芯片可以应用于COVID
‑
19Omicron的抗原的开发、相应疫苗基药物的开发与研究。
【附图说明】
[0030]图1为多肽微阵列合成仪示意图；
[0031]图2为多肽微阵列合成仪平台示意图；
[0032]图3为微量注射器左视图；
[0033]图4为微量注射器主视图。
【具体实施方式】
[0034]下面结合说明书的附图，通过对本专利技术的具体实施方式作进一步的描述，使本专利技术的技术方案及其有益效果更加清楚、明确。下面通过参考附图描述实施例是示例性的，旨在解释本专利技术，而不能理解为对本专利技术的限制。
[0035]一种基于多肽微阵列的抗原表位筛选方法，包括如下步骤：
[0036]1、一种用于COVID
‑
19Omicron刺突蛋白(S蛋白)抗原表位筛查的多肽阵列合成方法，包括以下步骤:
[0037]1.1、在多肽微阵列仪VERSA 110SPOTTER中导入COVID
‑
19Omicro刺突蛋白(S蛋白)的一级结构序列；
[0038]1.2、设置所制备的多肽微阵列芯片上肽链长度，以12个氨基酸为一个多肽，通过Aurora多肽微阵列仪VERSA 110SPOTTER软件设计多肽阵列点，多肽的氨基酸数目可以大于或小于12个氨基酸；
[0039]1.3、设定该多肽芯片上微阵列排布，阵列点上样体积、阵列排布和点间距离；
[0040]2、多肽微阵列芯片制作：
[0041]2.1、配制实验所需的氨基酸溶液，分装后冷藏保存，点印前平衡至室温使用；
[0042]2.2、运行仪器，点样针将从氨基酸溶液放置平台精准移取氨基酸溶液；
[0043]2.3、机械臂稳定移动带动点样针将移取的氨基酸溶液点印至载体基质上的指定位置；
[0044]2.4、氨基酸溶液放置平台配制40样品孔板，试剂全开放，其中20个样品孔板固定氨基酸位置、20个样品孔板开放使用；
[0045]2.5、点样针每移取完一种氨基酸将自动清洗，以防止样品交叉污染。点样针清洗槽包含废液收集槽和清洗槽，各自独立设置在点样针清洗模块的两侧；
[0046]2.6、每点印完一层氨基酸溶液，待其干燥后，将多肽芯片半成品置于芯片钝化液中，封闭芯片上未反应的活化基团，经乙醇洗涤后自然晾干，待下一步使用；...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于多肽微阵列的抗原表位筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：1.1、打开多肽微阵列合成仪电源的开关、连接电脑；1.2、打开合成仪操作软件，依据客户使用需求，将待研究蛋白的一级序列导入软件，设置多肽长度及芯片微阵列排布；1.3、准备合成所需的氨基酸及其他试剂，运行仪器，仪器将取氨基酸溶液点印至设定位置，直到多肽芯片制备完成。2.根据权利要求1所述的基于多肽微阵列的抗原表位筛选方法，其特征在于，所述合成仪操作软件包括如下步骤：2.1、以12个氨基酸为一个多肽，通过上述软件设计多肽微阵列，多肽的氨基酸数目可以大于或小于12个氨基酸；2.2、多肽微阵列排布可通过上述软件进行设置，包括阵列点上样体积、阵列排布和点间距离。3.一种装置，包括权利要求1所述的多肽微阵列合成仪，其特征在于，所述多肽微阵列合成仪包括高效过滤安全罩、机械臂、点样针、工作台、氨基酸溶液放置平台、点样针清洗模块、载体放置平台、预点样平台以及微量注射泵。4.根据权利要求3所述的装置，其特征在于，所述高效过滤安全罩包括封闭式UV外罩、负压排气、紫外杀菌、LED灯。5...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁洞泉，赵媛，梁柏堂，
申请(专利权)人：药明激创佛山生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：