基于适配体的多特异性治疗剂制造技术

本发明专利技术提供一种工程化的多特异性抗原结合分子，其包括由连接体连接的两个或更多个不同适配体部分。抗原结合分子能够特异性结合到一个或多个抗原，并桥接不同类型的细胞，例如免疫细胞和癌细胞。连接的适配体可用于调节和增强免疫功能。增强免疫功能。增强免疫功能。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】基于适配体的多特异性治疗剂
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2019年7月26日提交的第62/879,413号美国临时申请；以及2019年7月26日提交的编号为62/879,401的美国临时申请；以及2019年7月26日提交的编号为PCT/IB2019/000890的PCT申请；以及2020年7月27日提交的编号为PCT/US2020/43778的PCT申请的优先权。上述每一项申请均以引用方式全部并入本文。

技术介绍

[0003]适配体(aptamer)是合成的单链(ss)DNA或RNA分子，形成特定的二级和三级结构。它们可以特异性地结合天然折叠蛋白质、毒素或其他具有高亲和力和特异性的细胞靶标。它们是非免疫原性的，但与抗体一样，适配体可以激活或抑制受体功能。它们体积小、稳定性好、成本效益高、化学合成高度可控，使适配体成为极具吸引力的治疗剂。因此，适配体被认为是用于诊断和治疗目的的有前景的单克隆抗体合成替代品。
[0004]多特异性适配体是两个或两个以上的适配体连接在一起，设计用于以高特异性和亲和力来特异性结合不同的表位。多聚(multimeric)特异性开启了广泛的研究、诊断和临床应用，包括将细胞重新定向到另一种细胞类型(例如，T细胞或NK细胞到肿瘤细胞)，阻断两种不同的信号通路，双重靶向不同的疾病介体，以及向特定细胞提供有效载荷。在这些应用中，精确的靶向性以及在某些情况下影响特定细胞功能的能力是成功研究、诊断和治疗应用的重要决定因素。

技术实现思路

[0005]本专利技术提供了一种工程化抗原结合分子，其包括两个或多个连接在一起的并且能够特异性结合一个或多个癌细胞抗原和一个或多个免疫效应细胞抗原的不同适配体部分。
[0006]本专利技术的一个方面是将关注的适配体连接在一起的方法。在一些实施方案中，这可以通过点击化学来实现。在一些实施方案中，所述连接体(linker)的长度、连接体赋予靶向部分的灵活性或移动性，并且连接体的类型可影响免疫效应器细胞功能或对影响亲和力、特异性和/或构象的靶向适配体部分进行干扰。在一些实施方案中，所述连接体的选择可影响多特异性适配体的药代动力学和药效学性质。在一些实施方案中，所述连接体的选择可影响活性和安全性(例如，免疫原性)。在一些实施方案中，所述多特异性适配体的抗原结合部分可识别具有高亲和力和特异性的特异性抗原。
[0007]本专利技术的另一方面是一种多特异性抗原分子，其包括两个或多个具有不同靶标结合特异性的连接适配体。在一些实施方案中，所述多特异性适配体可结合表达靶向抗原的邻近细胞并将其带入其中。
[0008]在一些实施方案中，所述多特异性适配体允许将免疫效应细胞重定向至癌细胞。反过来，所述工程化的多特异性适配体与各自的靶向表位的结合允许免疫效应细胞被激活并发挥其抗癌杀伤功能。
[0009]在一些实施方案中，所述多特异性适配体的抗原结合部分可将表达CD3、CD8、CD4
或其他T细胞特异性抗原的免疫效应T细胞重定向至其他关注的细胞靶标，例如CD19、上皮细胞粘附分子、CD20、CD22、CD123、BCMA、B7H3、CEA、PSMA、Her2、CD33、CD38、DLL3、EGF
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R、MHC I类相关蛋白MR1或间皮素。
[0010]在一些实施方案中，所述多特异性适配体的抗原结合部分可将免疫效应器NK细胞(例如通过CD16A、NKG2D或其他NK细胞特异性抗原)重定向至其他关注的细胞靶标，例如CD30、CD19、上皮细胞粘附分子、CD20、CD22、CD123、BCMA、B7H3、CEA、PSMA、Her2、CD33、CD38、DLL3、EGF
‑
R、MHC I类相关蛋白MR1或间皮素。
[0011]在一些实施方案中，所述多特异性适配体可通过同时靶向两个免疫调节靶标，从而阻断抑制性靶标、耗尽抑制性细胞、或激活效应细胞(例如，涉及靶细胞，如PD
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1、PD
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L1、CTLA04、Lag
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3、TIM
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3或OX40)和肿瘤微环境(TME)调节因子(如CD47或VEGF)。
[0012]在一些实施方案中，所述多特异性适配体可靶向一种或多种肿瘤相关抗原，例如PRAME、NY
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ESO
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1、MAGEA4、MAGEA3/A6、MAGEA10、AFP。
[0013]在一些实施方案中，所述多特异性适配体可靶向参与炎症或自身免疫疾病、心脏代谢疾病、呼吸系统疾病、眼科疾病、神经系统疾病或感染性疾病的抗原。
[0014]在一些实施方案中，所述多特异性适配体能够激活和刺激免疫效应细胞以杀死表达特异性靶向抗原的细胞。
[0015]在一些实施方案中，所述多特异性适配体结合但不激活其结合的靶细胞，例如免疫效应细胞，而仅用作两个靶细胞之间的桥梁，例如免疫效应细胞和癌细胞之间的桥梁。
[0016]在一些实施方案中，所述多特异性适配体可以是用于预防、治疗或改善增殖性疾病、肿瘤性疾病、炎症性疾病、免疫紊乱、自身免疫性疾病、感染性疾病、病毒性疾病、过敏反应、寄生虫反应、移植物抗宿主病或有需要的对象的移植物抗宿主病、代谢疾病、神经疾病、眼科疾病。
[0017]在一些实施方案中，所述多特异性适配体可以是递送系统(例如，基因治疗应用)。
[0018]在一些实施方案中，所述多特异性适配体可用于诊断应用。
[0019]在一些实施方案中，所述多特异性适配体可用于纯化系统中。
[0020]在一些实施方案中，所述多特异性适配体可用于细胞选择或富集应用。
[0021]目前的技术也可以总结在以下特征清单中。
[0022]1.一种基于适配体的多特异性抗原结合分子，包括1)两个或更多个具有不同靶标结合特异性的靶标结合适配体区域，以及2)一个或多个连接适配体区域的连接体。
[0023]2.如特征1所述的基于适配体的多特异性抗原结合分子，其中所述连接体包括选自共价键、单链核酸、双链核酸、自组装互补寡核苷酸、肽、多肽、低聚糖、多糖、合成聚合物、腙、硫醚、酯、三唑、纳米粒子、胶束、脂质体、细胞、点击化学产物及其组合的连接部分(linker moiety)，或由它们组成。
[0024]3.如特征1或特征2所述的基于适配体的多特异性抗原结合分子，可结合一个或多个人类细胞、免疫细胞、癌细胞、转基因细胞、细菌或病毒上的特定靶标。
[0025]4.基于适配体的多特异性抗原结合分子，具有上述任何特征，可将一种细胞类型的结合从一个靶细胞重定向到另一个靶细胞。
[0026]5.基于适配体的多特异性抗原结合分子，具有上述任何特征，可在免疫细胞和癌细胞之间形成桥梁。
[0027]6.一种基于适配体的多特异性抗原结合分子，具有上述任何特征，可以刺激和激活免疫细胞。
[0028]7.如特征6所述的基于适配体的多特异性抗原结合分子，其中所述免疫细胞是T本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种基于适配体的多特异性抗原结合分子，其包括1)两个或更多个具有不同靶标结合特异性的靶标结合适配体区域，以及2)一个或多个连接所述适配体区域的连接体。2.根据权利要求1所述的基于适配体的多特异性抗原结合分子，其中所述连接体包括选自共价键、单链核酸、双链核酸、自组装互补寡核苷酸、肽、多肽、低聚糖、多糖、合成聚合物、腙、硫醚、酯、三唑、纳米粒子、胶束、脂质体、细胞、点击化学产物及其组合的连接部分，或由它们组成。3.根据权利要求2所述的基于适配体的多特异性抗原结合分子，其中所述连接体包括点击化学产物。4.根据前述任一项权利要求所述的基于适配体的多特异性抗原结合分子，其可结合到一个或多个人类细胞、免疫细胞、癌细胞、转基因细胞、细菌或病毒上的特定靶标。5.根据前述任一项权利要求所述的基于适配体的多特异性抗原结合分子，其可将一种细胞类型的结合从一个靶细胞重定向到另一个靶细胞。6.根据前述任一项权利要求所述的基于适配体的多特异性抗原结合分子，其可在免疫细胞和癌细胞之间形成桥梁。7.根据前述任一项权利要求所述的基于适配体的多特异性抗原结合分子，其可刺激和激活免疫细胞。8.根据权利要求7所述的基于适配体的多特异性抗原结合分子，其中所述免疫细胞为T细胞、NK细胞或巨噬细胞，且所述结合导致与基于适配体的多特异性抗原结合分子的靶标结合适配体结合的靶标细胞被破坏。9.根据前述任一项权利要求所述的基于适配体的多特异性抗原结...

【专利技术属性】
技术研发人员：安娜，
申请(专利权)人：艾夏卡法国有限公司，
类型：发明
国别省市：