一种老鹳草酸性多糖及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种老鹳草酸性多糖及其制备方法与应用，所述老鹳草酸性多糖由L

【技术实现步骤摘要】
一种老鹳草酸性多糖及其制备方法与应用


[0001]本专利技术属于天然产物提取
，具体涉及一种老鹳草酸性多糖及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]多糖在植物、藻类、菌类及动物体内广泛存在，是自然界中含量最丰富的生物大分子之一。研究表明多糖类成分具有多种药理活性，如调节免疫、抗炎、抗氧化、抗肿瘤等，在药品及保健食品领域有很多的研究与应用。目前对于多糖常见的提取技术有热水提取法、酸提取法、碱提取法，上述技术操作简单、成本也较小，但是对多糖的提取率普遍较低，同时也会对多糖的生物活性有所降低。
[0003]老鹳草（Geranium wilfordii Maxim.）为牻牛儿苗科老鹳草属植物，是我国常用中药之一，具有祛风湿、通经络等功效。目前，针对老鹳草中多糖的研究未见报道，为了更好的开发利用老鹳草资源，本专利技术旨在提供一种老鹳草酸性多糖的制备方法以及应用。

技术实现思路

[0004]本专利技术的第一目的是提供一种老鹳草酸性多糖，本专利技术的第二目的是提供一种老鹳草酸性多糖的制备方法，本专利技术的第三目的是提供一种老鹳草酸性多糖的应用。
[0005]本专利技术的第一目的是这样实现的，所述老鹳草酸性多糖由L
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鼠李糖：D
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阿拉伯糖：D
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甘露糖和D
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半乳糖组成，L
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鼠李糖：D
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阿拉伯糖：D
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甘露糖：D
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半乳糖摩尔比为1:24.42:3.42:4.65，分子量为2427 Da。
[0006]本专利技术的第二目的是这样实现的，所述老鹳草酸性多糖的制备方法按以下步骤实现：1）将老鹳草药材干燥为手搓易断碎或成粉末的程度后，粉碎为最粗粉，过10目筛，经甲醇回流脱脂2
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3次后以80
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85℃水提，每次提取2.5
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4h，提取次数为2
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3次，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；2）将步骤1得到的浸膏以80%
‑
85%乙醇醇沉，离心，弃去上清液，将沉淀用蒸馏水重溶，以sevege法除蛋白，离心，弃去沉淀，共5
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6次，直至离心再无沉淀，减压浓缩，冷冻干燥，得到老鹳草粗提物；3）将步骤2得到的老鹳草粗提物用蒸馏水溶解，离心过滤后，采用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析纯化，以NaCl溶液洗脱，收集洗脱液，经透析、浓缩后得到酸性多糖。
[0007]本专利技术的第三目的是这样实现的，所述老鹳草酸性多糖的应用为作为活性成分或者是药用载体在制备抗炎症及抗氧化药物中的应用。
[0008]本专利技术的有益效果为：1）本专利技术提供了一种从老鹳草中提取的酸性多糖，该酸性多糖具有较高的抗炎及抗氧化活性，其在浓度为50μg/mg时已经初步对TNF
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α及IL
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6的分泌水平有抑制作用，在浓
度为1.6 mg/mL时就已经具有了与VC持平的DPPH自由基清除能力。另外，本专利技术提供的酸性多糖毒副作用小，因此，在制备低毒高效的抗炎及抗氧化药品开发中具有广泛的应用前景，有利于老鹳草资源的进一步开发利用。
[0009]2）本专利技术制备酸性多糖的方法不仅操作简单成本低廉，同时更加高效更加实用，多糖的生物活性也得到了更好的保障，值得推广应用。
附图说明
[0010]图1为老鹳草酸性多糖GAP的葡萄糖标准曲线；图2为老鹳草酸性多糖GAP的纤维素阴离子交换柱分离谱图；图3为老鹳草酸性多糖GAP的气质联用色谱仪数据图；图4为老鹳草酸性多糖GAP 的HPGPC色谱图；图5为老鹳草酸性多糖GAP甲基化碎片的GC/MS重构总离子流图谱；图6为老鹳草酸性多糖GAP 的红外光谱图；图7为老鹳草酸性多糖GAP细胞活力检测示意图；图8为老鹳草酸性多糖GAP抑制脂多糖诱导的RAW 264.7巨噬细胞产生促炎细胞因子IL
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6的作用示意图；图9为GAP抑制脂多糖诱导的RAW 264.7巨噬细胞产生促炎细胞因子TNF
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α的作用示意图；图10为龙胆多糖IL
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6、TNF
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α指标检测示意图图11为老鹳草酸性多糖GAP及维生素C对DPPH自由基的清除作用的曲线图；图12为现有多糖白云参中性多糖（CJP
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C）以及白云参酸性多糖（CJP）DPPH自由基清除能力曲线图。
具体实施方式
[0011]下面结合附图和实施例对本专利技术作进一步的说明，但不以任何方式对本专利技术加以限制，基于本专利技术教导所作的任何变更或改进，均属于本专利技术的保护范围。
[0012]本专利技术提供了一种老鹳草酸性多糖，所述酸性多糖由L
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鼠李糖、D
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阿拉伯糖、D
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甘露糖和D
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半乳糖组成，L
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鼠李糖：D
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阿拉伯糖：D
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甘露糖：D
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半乳糖摩尔比为1:24.42:3.42:4.65，分子量为2427 Da。
[0013]本专利技术老鹳草酸性多糖的制备方法按以下步骤实现：1）将老鹳草药材干燥为手搓易断碎或成粉末的程度后，粉碎为最粗粉，过10目筛，经甲醇回流脱脂2
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3次后以80
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85℃水提，每次提取2.5
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4h，提取次数为2
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3次，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；2）将步骤1得到的浸膏以80%
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85%乙醇醇沉，离心，弃去上清液，将沉淀用蒸馏水重溶，以sevege法除蛋白，离心，弃去沉淀，共5
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6次，直至离心再无沉淀，减压浓缩，冷冻干燥，得到老鹳草粗提物；3）将步骤2得到的老鹳草粗提物用蒸馏水溶解，离心过滤后，采用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析纯化，以0.2mol/L NaCl洗脱，收集洗脱液，经透析、浓缩后得到目标酸性多糖。
[0014]步骤1中，甲醇回流脱脂的温度为60
‑
65℃，甲醇的浓度为80
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90%，甲醇的加入量为老鹳草药材重量的6
‑
10倍（V:m=6
‑
10）。
[0015]步骤1中，热水煮提的温度为80
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85℃。
[0016]步骤2中，乙醇浓度为80%
‑
85%，乙醇的加入量为所述浸膏的2
‑
3倍（V:m=2
‑
3）。
[0017]步骤3中，透析时的截流分子量为3400 Da。
[0018]本专利技术老鹳草酸性多糖的应用为作为活性成分或者是药用载体在制备抗炎症及抗氧化药物中的应用。
[0019]所述应用将所述老鹳草多糖加入药学上可接受的辅料制备成片剂、硬胶囊、软胶囊、散剂、丸剂、颗粒剂。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种老鹳草酸性多糖，其特征在于，所述老鹳草酸性多糖由L
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鼠李糖、D
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阿拉伯糖、D
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甘露糖和D
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半乳糖组成，L
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鼠李糖：D
‑
阿拉伯糖：D
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甘露糖：D
‑
半乳糖摩尔比为1:24.42:3.42:4.65，分子量为2427 Da；所述老鹳草酸性多糖的主要衍生物为2,3,6
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Me3
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Galp、2,3,4,6
‑
Me4
‑
Galp以及2,3,5
‑
Me3
‑
Araf，主要链接方式为
→
1)
‑
Galp
‑
(4
→
。2.权利要求1所述的一种老鹳草酸性多糖的制备方法，其特征在于，按以下步骤实现：1）将老鹳草药材干燥为手搓易断碎或成粉末的程度后，粉碎为最粗粉，过10目筛，经甲醇回流脱脂2
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3次后以80
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85℃水提，每次提取2.5
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4h，提取次数为2
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3次，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；2）将步骤1...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘录，冯佳怡，张鹏，周倩，周志宏，谭文红，杨竹雅，
申请(专利权)人：云南中医药大学，
类型：发明
国别省市：