【技术实现步骤摘要】
一种利用功能土著菌群固体菌剂去除土壤中USEPA PAHs的方法
[0001]本专利技术属于土壤修复
,具体是一种利用功能土著菌群固体菌剂去除土壤中USEPA PAHs的方法。
技术介绍
[0002]作为一种全球性的有毒有机污染物,PAHs污染问题已引起世界各国重视。进入环境中的PAHs通过大气干湿沉降最终在土壤中积累,更为严重的是,进入土壤的PAHs 可通过食物链进入人体,进而威胁人群健康。可见如何有效治理 PAHs污染土壤,实现土壤资源化利用,具有迫切地社会需求。
[0003]在众多污染土壤修复技术中,微生物修复凭借其不会对土壤造成二次污染、处理效果较好、耗资少、保护土壤结构等特点占据独特优势,被公认为是一种环境友好的污染土壤修复方法。近年来,国内外学者已从不同环境介质中分离获得大量具有PAHs降解能力的功能微生物。在长期受有毒有机物污染的土壤中存在着一系列经自然驯化,菌群结构和功能完整、稳定且复杂的具有有毒有机物降解能力的土著微生物菌群。研究表明,土著菌群作为一种多菌体共存的生物群体,在其生长过程可以依靠 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种利用功能土著菌群固体菌剂去除土壤中USEPA PAHs的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、土著微生物菌群富集、驯化S1
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1、土著微生物富集将长期受PAHs污染的土壤样品加入盛有无菌水的锥形瓶中,随后置于摇床中,在30
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40℃的温度条件下,以150
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160rpm的转速震荡培养6
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8h,离心后,得到的上清液即为土著微生物菌液;S1
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2、土著微生物驯化取5
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6mL的土著微生物菌液转接至95
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100mL培养基中,加入USEPA PAHs混标,使培养基中PAHs浓度达到设定值,在30
‑
40℃的温度条件下,以150
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160rpm速率在摇床上震荡培养5
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6d,相同条件下连续培养5代后,获得稳定的具有高效降解PAHs能力的土著功能微生物菌群;S2、发酵罐培养S2
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1、将上述土著功能微生物菌群转接至LB培养基中活化,在30
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40℃的温度条件下,以150
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160rpm的转速摇床震荡培养24
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30h,作为一级种子液使用,按5wt%的接种量将一级种子液转接至发酵罐中进行放大发酵,培养至对数生长期,获得液体菌剂;S3、固体菌剂的研制选用玉米秸秆为固定化载体,按照重量比为1:10的比例称取玉米秸秆和液体菌剂,并置于锥形瓶中混合均匀,灭菌后冷却至常温,并置于恒温振荡培养箱内,在30
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40℃的条件下,以150
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160rpm的转速的培养2
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3d后取出,随后在离心机中以5000
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6000rpm的速率离心处理5
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10min后,得到上清液和下层固体,然后,用无机盐洗涤下层固体,再离心5
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10min后弃上清液,重复此过程2次,最终离心所得固体即为功能土著微生物菌群固体菌剂;S4、土壤的采集、污染老化从农田采集土壤样品,将采集的土壤样品风干30
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40d后,磨碎并充分打散混匀,过20目筛,向制备好的土壤样品中添加含有USEPA PAHs和丙酮的混合溶液,并充分混匀,待丙酮挥发完全后,老化土壤3
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4个月,保存备用,其中,USEPA PAHs占混合溶液总重量的25%,丙酮占混合溶液总重量的75%;S5、土壤接种向步骤S4得到的污染土壤中添加重量为2
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5wt%的土著微生物菌群固体菌剂,并充分混匀后,监测污染土壤中PAHs含量的变化。2.根据权利要求1所述的一种利用功能土著菌群固体菌剂去除土壤中USEPA PAHs的方法,其特征在于,所述步骤S3中,将玉米秸秆和液体菌剂进行混合前,先对玉米秸秆进行预处理...
【专利技术属性】
技术研发人员:凌婉婷,王建,孙雨豪,高彦征,
申请(专利权)人:南京农业大学,
类型:发明
国别省市:
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