中华小长臂虾微孢子虫绝对荧光定量PCR检测方法、试剂盒及引物技术

一种中华小长臂虾微孢子虫绝对荧光定量PCR检测方法、试剂盒及引物，属于分子生物学技术领域。具体检检测方法：采集样本；中华小长臂虾微孢子虫DNA的提取；合成扩增片段大小为141bp的上下游引物；绝对荧光定量PCR方法的建立；标准曲线的绘制；绝对荧光定量PCR方法的灵敏度和特异性试验。本发明专利技术建立快速，灵敏的中华小长臂虾微孢子虫分子检测方法，与传统的PCR检测方法相比，具有省事、高效、灵敏、定量的特点。特点。特点。

【技术实现步骤摘要】
中华小长臂虾微孢子虫绝对荧光定量PCR检测方法、试剂盒及引物


[0001]本专利技术属于分子生物学
，特别是涉及一种中华小长臂虾微孢子虫绝对荧光定量PCR检测方法、试剂盒及特异性引物。

技术介绍

[0002]微孢子虫最早被报道于1857年，(Nageli 1857)，是典型的专性胞内寄生的单细胞真核生物，微孢子虫自身具有着独特的特征，如独特的侵染装置，孢子发芽时弹出极丝，将具有感染性的胞原质运输到细胞内。国际动物命名委员会(ICZN)已确定微孢子虫门包括200多个属(Becnel et al.，2014)。 Thelohania属侵染直额长臂虾(Palaemon rectirostris)、锯齿长臂虾 (Palaemon serratus)和海洋褐虾(Crangon vulgaris)和淡水龙虾和奥斯塔欧洲鳌虾(Astacus fluviatilis)等虾类(Edgerton BF et al，2002； Stentiford GD et al，2013)。
[0003]Enterocytospora artemiae(EAM)最本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种中华小长臂虾微孢子虫绝对荧光定量PCR检测的特异性引物，其特征在于：根据中华小长臂虾微孢子虫的靶基因序列，合成扩增片段大小为141bp的上下游引物，所述引物的序列如下：上游引物为:5
’‑
ATTCCCTCGTTCGTTGAGTCAGATTG
‑3’
，下游引物为：5
’‑
GTGGCATTGTCATCATCCCTTTGTTG
‑3’
，引物浓度有要求为10μM/μL。2.一种中华小长臂虾微孢子虫绝对荧光定量PCR检测的试剂盒，其特征在于：包括权利要求1所述的上下游引物以及中华小长臂虾微孢子虫质粒标准品。3.根据权利要求1所述的用于中华小长臂虾微孢子虫绝对荧光定量PCR检测的试剂盒，其特征在于：所述中华小长臂虾微孢子虫质粒标准品由Eb99F/Eb99R引物进行扩增得到目的片段制备而成，
‑
20℃保存。4.如权利要求1
‑
2任一项所述的引物在中华小长臂虾微孢子虫绝对荧光定量PCR检测中的应用。5.一种中华小长臂虾微孢子虫绝对荧光定量PCR检测方法，其特征在于：绝对荧光定量PCR方法的建立：使用2
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ChamQ Universal SYBR qPCR...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜宏波，刘京慧，包杰，陈启军，
申请(专利权)人：沈阳农业大学，
类型：发明
国别省市：