一种评价HPV疫苗生产过程质量的方法技术

本公开涉及一种评价HPV疫苗生产过程质量的方法。本公开通过采用红外检测目标蛋白的方法，同时利用化学计量方法建立了基于HPV疫苗目标蛋白红外光谱的HPV疫苗原液质量评价模型，可以实现对制备HPV疫苗的中间产品

【技术实现步骤摘要】
一种评价HPV疫苗生产过程质量的方法


[0001]本公开涉及红外检测
，尤其涉及一种评价HPV疫苗生产过程质量的方法。

技术介绍

[0002]HPV疫苗主要利用HPV病毒内部蛋白质组装成的病毒样颗粒，诱发机体产生免疫反应，尤其是体液免疫反应，产生特异性抗体及活化T细胞，由此带来免疫防御作用。目前，全球上市的HPV预防性疫苗有3种，即双价疫苗、四价疫苗和九价疫苗。双价疫苗涉及的中间产品为16型和18型HPV原液；四价疫苗涉及的中间产品为6型、11型、16型和18型HPV原液；九价疫苗涉及的中间产品为6型、11型、16型、18型、31型、33型、45型、52型和58型原液。
[0003]上述HPV疫苗产品共涉及9种价态疫苗原液，均为使用蛋白质分离技术对制品进行提取、纯化而获得。这些原液经制剂工艺生产称为符合人体使用条件的成品制剂，如注射剂、口服制剂等，因此，生产过程中HPV疫苗原液质量的一致性，很大程度地保证了终产品的质量。
[0004]目前对人用疫苗提出了对人用疫苗生产提出过程控制的要求，分为三个层次，全过程质量控制、批间一致性的控制、目标成分及非目标成分的控制，即从原材料、中间产物、产品三个方面对疫苗的整个生产过程进行有效控制，以保证终产品的质量。
[0005]目前关于基因工程重组蛋白疫苗原液的鉴别主要采用N端氨基酸序列测定、抗独特型免疫等特异性高的方法对目标蛋白进行鉴别，并规定“每年至少测定一次”。氨基酸测序的方法虽然专属性强，结果准确，但成本高、耗时，更重要的是，该方法无法对批间一致性进行表征和评价。因此，目前的评价方法无法做到在生产过程中的日常检验和过程质量控制，目前尚缺乏一种专属性强但低成本、操作简便的快速过程质量评价方法。
[0006]红外光谱能够实现蛋白质的定性分析，专属性强，但灵敏度较低；HPV疫苗原液中目标蛋白质含量较低，且HPV疫苗原液中的水对红外光谱影响大；而各HPV分型的目标蛋白差异较小。因此常规红外光谱方法无法直接用于HPV疫苗的过程质量控制。
[0007]因此，目前亟需一种对于HPV疫苗原液的质量以及批间一致性的快速且准确的评价方法。

技术实现思路

[0008]为了解决上述技术问题，本公开提供了一种评价HPV疫苗生产过程质量的方法。
[0009]第一方面，本公开提供了一种评价HPV疫苗生产过程质量的方法，所述生产过程质量包括HPV疫苗原液的质量以及HPV疫苗原液的批间一致性，所述方法包括如下步骤：
[0010](1)利用对照HPV疫苗原液样品的红外光谱建立HPV疫苗原液质量评价模型以及通过对HPV疫苗原液质量评价模型的验证确定评价标准，所述HPV疫苗原液质量评价模型包括各分型的HPV疫苗原液评价模型；
[0011](2)利用步骤(1)得到的各分型HPV原液交叉验证的匹配值，计算统计过程控制参数，建立一致性评价模型；
[0012](3)对待测HPV疫苗原液样品中的目标蛋白进行富集，制备红外检测样品进行红外光谱检测；
[0013](4)根据待测HPV疫苗原液的种类，选择对应的HPV疫苗原液质量评价模型对得到的待测HPV疫苗原液样品的红外光谱进行分析计算，得到多个匹配值，然后将匹配值与评价标准进行对比，通过对比结果实现对待测HPV疫苗原液样品的质量评价；
[0014](5)根据质量评价结果，利用步骤(4)得到的匹配值，进一步利用一致性评价模型，实现对HPV疫苗原液的批间一致性评价。
[0015]对于HPV疫苗原液质量评价模型的应用，在进行待测样品分析时，需要根据具体待测产品进行选择，例如双价HPV疫苗产品的原液生产过程控制中，只分别需选择HPV16质量评价模型和HPV18质量评价模型。
[0016]本公开提供的检测方法专属性强且成本低，操作简便，同时不仅能检测疫苗原液的质量，还可以对批间一致性进行表征和评价。
[0017]本公开通过采用红外检测的方法，同时利用化学计量方法建立了基于HPV疫苗原液中目标蛋白红外光谱的HPV疫苗原液质量评价模型，可以解决各种HPV分型的目标蛋白差异较小，且多种HPV分型原液批间一致性表征困难等引起的评价困难问题，能够实现不同分型(或厂家)HPV疫苗原液的准确评价。
[0018]作为本公开的一种优选技术方案，步骤(2)所述一致性评价模型的建立方法包括：利用各分型HPV疫苗原液质量评价模型交互验证输出的匹配值，应用统计过程控制方法，建立一致性评价模型。
[0019]作为本公开的一种优选技术方案，所述一致性评价模型参数包括质量目标和质量变异性上限；
[0020]作为本公开的一种优选技术方案，所述一致性评价模型参数的确定方法包括：
[0021](A)将9种分型HPV原液样品的匹配值分组统计，分别计算每组匹配值的中位数，代表每种分型的质量水平；
[0022](B)取9种分型的质量水平的平均数作为质量目标；
[0023](C)用平均绝对偏差的中位数估计估算质量离散性；
[0024](D)以质量目标与3倍质量离散性计算质量变异性上限。
[0025]对于本公开所述质量目标和质量变异性上限的确定方法，本公开提供如下确定方法：
[0026](A)将9种分型HPV原液样品的匹配值分组统计，利用式I所示公式分别计算每组匹配值的中位数，代表每种分型的质量水平；
[0027][0028]其中，X
imed
表示每组匹配值的中值，x
ij
表示第j个匹配值；
[0029](B)取9种分型的质量水平的平均数作为质量目标，具体计算方法见式II；
[0030][0031]其中，表示平均质量水平；X
imed
表示每组匹配值的中值，m表示有m个匹配值；
[0032](C)用平均绝对偏差的中位数估计估算质量离散性，具体计算方法见式III；
[0033][0034]其中，表示质量离散性，x
ij
表示第i组(HPV分型)第j个匹配值，表示第i组的平均匹配值；
[0035](D)以质量目标与3倍质量离散性计算统计过程控制区间上限(UCL)，具体计算方法见式IV；
[0036][0037]在本公开中，由上述确定方法最终确定的平均质量水平为质量目标，统计过程控制区间上限(UCL)为质量变异性上限。
[0038]作为本公开的一种优选技术方案，步骤(5)所述HPV疫苗原液的批间一致性评价的方法包括：
[0039]根据HPV疫苗原液一致性评价模型中包括的质量目标及质量变异性上限，比较待测HPV疫苗原液样品的匹配值分布特点与质量目标和质量变异性上限的关系，评价批间一致性及其对应的质量风险。
[0040]在本公开中，批间一致性实际上指的就是质量变异性，若质量变异性较小，在限度范围之内，则质量风险较低；若质量变异性较大，超出限度，则表明生产过程中存在较高的质量风险。
[0041]作为本公开的一种优选技术方案本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种评价HPV疫苗生产过程质量的方法，其特征在于，所述生产过程质量包括HPV疫苗原液的质量以及HPV疫苗原液的批间一致性，所述方法包括如下步骤：(1)利用对照HPV疫苗原液样品的红外光谱建立HPV疫苗原液质量评价模型以及通过对HPV疫苗原液质量评价模型的验证确定评价标准，所述HPV疫苗原液质量评价模型包括各分型的HPV疫苗原液评价模型；(2)利用步骤(1)得到的各分型HPV原液交叉验证的匹配值，计算统计过程控制参数，建立一致性评价模型；(3)对待测HPV疫苗原液样品中的目标蛋白进行富集，制备红外检测样品进行红外光谱检测；(4)根据待测HPV疫苗原液的种类，选择对应的HPV疫苗原液质量评价模型对得到的待测HPV疫苗原液样品的红外光谱进行分析计算，得到多个匹配值，然后将匹配值与评价标准进行对比，通过对比结果实现对待测HPV疫苗原液样品的质量评价；(5)根据质量评价结果，利用步骤(4)得到的匹配值，进一步利用一致性评价模型，实现对HPV疫苗原液的批间一致性评价。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述一致性评价模型的建立方法包括：利用各分型HPV疫苗原液质量评价模型交互验证输出的匹配值，应用统计过程控制方法，建立一致性评价模型；优选地，所述一致性评价模型参数包括质量目标和质量变异性上限；优选地，所述一致性评价模型参数的确定方法包括：(A)将9种分型HPV原液样品的匹配值分组统计，分别计算每组匹配值的中位数，代表每种分型的质量水平；(B)取9种分型的质量水平的平均数作为质量目标；(C)用平均绝对偏差的中位数估计估算质量离散性；(D)以质量目标与3倍质量离散性计算质量变异性上限。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(5)所述HPV疫苗原液的批间一致性评价的方法包括：根据HPV疫苗原液一致性评价模型中包括的质量目标及质量变异性上限，比较待测HPV疫苗原液样品的匹配值分布特点与质量目标和质量变异性上限的关系，评价批间一致性及其对应的质量风险。4.根据权利要求1
‑
3中的任一项所述的方法，其特征在于，步骤(1)建立HPV疫苗原液质量评价模型的方法包括：(i)对9种分型的对照HPV疫苗原液样品中的目标蛋白进行富集，并制备红外检测样品进行红外检测，每种对照HPV疫苗原液样品均制备多个红外检测样品，对所有红外光谱进行筛选，得到质量合格的红外光谱；(ii)将质量合格的红外光谱分成训练集和验证集，并分别对每个红外光谱进行一阶导数预处理；(iii)根据训练集包括的所有红外光谱，选择目标蛋白特异性谱区中相同HPV分型差异小而不同HPV分型差异大的至少一段连续谱段作为评价谱区；(iv)对训练集包括的所有红外光谱的每个评价谱区分别进行矢量归一化处理，并计算
出每...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵瑜，尹利辉，秦晓东，许明哲，黄维金，柳军凯，朱俐，刘颖，田冶，
申请(专利权)人：中国食品药品检定研究院，
类型：发明
国别省市：