新型抗-Nogo-A抗体制造技术

提供了新型人源单克隆中和Nogo

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】新型抗
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Nogo
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A抗体


[0001]本专利技术总体上涉及新型人源抗体及其片段、衍生物和生物技术变体，其特异性结合至Nogo
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A并中和Nogo
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A，可以用于治疗中枢神经系统的疾病和创伤，包括视网膜病变。

技术介绍

[0002]包括视网膜在内的中枢神经系统组织(CNS)仅具有再生受损组织的有限能力。由各种细胞内在的生长信号传导的阻抑基因以及细胞外在机制阻止CNS再生。后者包括胶质瘢痕中和髓磷脂中所富含的生长抑制因子。Nogo
‑
A已被确定为髓磷脂相关因子之一，其限制脉管系统和神经元细胞两者的受损中枢神经系统的恢复量和可塑性(et al.,PNAS,2013)。它是网状蛋白家族的成员，并且具有至少两种生物活性和药理学不同的结构域，Nogo
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66和Nogo
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AΔ20，两者均已被示出对神经突生长具有强抑制活性(GrandPre et al.,Nature 417(2002),547
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51；Oertle et al.,J.Neurosci.23(2003),5393
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406)。因此，已将阻断Nogo
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A的抑制活性披露为通过改善和促进血管和神经元的修复和生长来治疗伴随有CNS组织的血管和神经元损伤或退化的疾患或病症的有价值药物靶标(在Pernet,BBA
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Molecular Basis of Disease,2017中有综述)。
[0003]在此情况下，已有报道，鼠单克隆抗体IN
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1促进CNS损伤后的轴突再生和功能恢复，IN
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1是针对NI
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220/250产生的，NI
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220/250是大鼠髓磷脂蛋白，是神经突生长的有效抑制剂(并且随后由nogo A基因编码示出)(Schnell and Schwab,Nature 343(1990),269
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272；Bregman et al.,Nature 378(1995),498
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501，Thallmair et al.,Nature Neuroscience 1(1998),124
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131和Chen et al.,Nature 403(2000),434
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439)。已有进一步尝试开发靶向Nogo
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A的在治疗上有效的单克隆抗体。例如，WO2004/052932A2描述了鼠抗体11C7，其已示出在体外和体内有效地阻断Nogo
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A诱导的抑制(Oertle et al.(2003)，上文提及；Liebscher et al.,Annals of Neurology 58(2005),706
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719)。例如，在活体动物中，施用11C7能够刺激大鼠脊髓病变后的轴突生长和行进恢复，并且示出促进CNS缺血性损伤后的血管再生(Liebscher et al.(2005)，上文提及；Joly et al.,Glia 66(2018),2079
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2093；Rust et al.,PNAS 116(2019),14270
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14279)。另外，由Lindau et al.,Brain(2013)的研究中，已经观察到在皮层脊髓束横断后或在单侧次全光照血栓性卒中后对感觉运动皮质鞘内应用抗体11C7(Wahl et al.,Science 344(2014),1250
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5)导致成年大鼠精细前肢运动功能高度恢复。在具有颈脊髓或运动皮质损伤的猕猴中也观察到了通过鞘内应用抗Nogo
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A抗体大幅恢复臂
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手功能(Freund et al.,Nat Med.12(2006),790
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2；Hamadjida et al.,Exp Brain Res.223(2012),321
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40)。此外，可以示出Nogo
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A失活改进了视网膜损伤后的视觉可塑性和恢复；参见，例如，Mdzomba et al.,Cell Death and Disease(2018)9:727。
[0004]进一步的单克隆抗Nogo
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A抗体公开于国际申请WO2005/061544A2(鼠抗体2A10及其人源化形式H1L11)、WO2007/068750A2和WO2009/056509A1(ATI355，衍生自单克隆抗体6A3，其在HuMabmouse
TM
中生成；这种基因重组的小鼠由Medarex Inc生产，其中，人免疫球蛋
白基因取代了它们的鼠对应物)。这些抗体中的几个是用于治疗脊髓损伤(SCI)、肌萎缩性侧索硬化(ALS)和多发性硬化(MS)的临床试验主题；参见Schmandke et al.(2014)，上文提及，和Kucher et al.,Neurorehabil.Neural Repair.(2018),578
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589。ATI335也被命名为NG
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101，并且目前在多中心、多国、安慰剂对照II期研究中进行探究在患有急性颈脊髓损伤(SCI)患者中的安全性和初步疗效，尤其是抗体疗法是否可以改进四肢瘫痪患者的运动功能和生活质量，其中，通过鞘内弹丸注射45mg施用抗体；参见，例如，Clinical Trials.gov标识符：NCT03935321。
[0005]总之，迄今为止，单克隆抗Nogo
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A抗体的开发对于伴随有包括视网膜在内的中枢神经系统(CNS)的损伤或疾患或退化的疾患或病症的预防性或治疗性治疗具有很大的前景，该障碍或病症诸如脊髓损伤(SCI)、卒中或视网膜病变包括视网膜血管病变。
[0006]然而，对于单克隆抗体，产品来源是影响免疫原性的重要因素。尽管与嵌合的、人源化的和人单克隆抗体相比，小鼠抗体已被示出在人中强烈地引发免疫应答，但应当注意的是，嵌合的、人源化的和人单克隆抗体也可以引发高比率的免疫原性，这取决于给药方案和患者群体。事实上，使用噬菌体展示开发的一些人抗体，以及甚至是源自转基因小鼠的全“人”抗体，都可能具有显著的抗药物抗体(ADA)应当；参见，例如，Harding et al.,MAbs.2010May
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Jun；2(3):256
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265和"Immunogenicity Assessment for Therapeutic Protein Products",U.S.Department of Health and Human Services Food and Drug Administration Center for Drug Evaluation and Research(CDER)Center for 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种人源重组单克隆抗Nogo
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A抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段与Nogo
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A
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Δ20结构域结合并且能够在卒中半暗区中诱导剂量依赖性神经突生长晕和/或血管生成。2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段与包括SEQ ID NO:21的氨基酸序列或由SEQ ID NO:21的氨基酸序列组成肽相结合，和/或包括含有VN互补决定区(CDR)1、2和3的可变重(VH)链和含有VL CDR 1、2和3的可变轻(VL)链，其中：(a)VH
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CDR1包括SEQ ID NO:3的氨基酸序列或其变体，其中，所述变体包括一个或两个氨基酸置换，(b)VH
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CDR2包括SEQ ID NO:4的氨基酸序列或其变体，其中，所述变体包括一个或两个氨基酸置换，(c)VH
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CDR3包括SEQ ID NO:5的氨基酸序列或其变体，其中，所述变体包括一个或两个氨基酸置换，(d)VL
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CDR1包括SEQ ID NO:8的氨基酸序列或其变体，其中，所述变体包括一个或两个氨基酸置换，(e)VL
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CDR2包括SEQ ID NO:9的氨基酸序列或其变体，其中，该变体包括一个或两个氨基酸置换，以及(f)VL
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CDR3包括SEQ ID NO:10的氨基酸序列或其变体，其中，所述变体包括一个或两个氨基酸置换；或者其中，所述抗体包括含有CDR 1、2和3的VH链，和/或含有VLCDR 1、2和3的VL链，其中：(g)VH
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CDR1包括SEQ ID NO:13的氨基酸序列或其变体，其中，所述变体包括一个或两个氨基酸置换，(h)VH
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CDR2包括SEQ ID NO:14的氨基酸序列或其变体，其中，所述变体包括一个或两个氨基酸置换，(i)VH
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CDR3包括SEQ ID NO:15的氨基酸序列或其变体，其中，所述变体包括一个或两个氨基酸置换，(j)VL
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CDR1包括SEQ ID NO:18的氨基酸序列或其变体，其中，所述变体包括一个或两个氨基酸置换，(k)VL
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CDR2包括SEQ ID NO:19的氨基酸序列或其变体，其中，所述变体包括一个或两个氨基酸置换，以及(l)VL
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CDR3包括SEQ ID NO:20的氨基酸序列或其变体，其中，所述变体包括一个或两个氨基酸置换。3.根据权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段，其中：(a)所述VH包括SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列或其变体，其中，所述变体包括一个或多个氨基酸置换；和(b)所述VL包括SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列或其变体，其中，所述变体包括一个或多个氨基酸置换；优选地，其中：所述VH和VL氨基酸序列与SEQ ID NO:2和7分别具有至少90％的同一性；或者(c)所述VH链包括SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列或其变体，其中，所述变体包括一个
或多个氨基酸置换；和(d)所述VL包括SEQ ID NO:17所示的氨基酸序列或其变体，其中，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：贝努瓦，
申请(专利权)人：诺华康制药股份公司，
类型：发明
国别省市：