胎盘外泌体的提取方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种胎盘外泌体的提取方法及应用。本发明专利技术的方法包括如下步骤：胎盘组织研磨匀浆，收集匀浆液；匀浆液离心，收集上清液；上清液抽滤及超滤，获得浓缩上清液；在4℃条件下，将浓缩上清液使用100

【技术实现步骤摘要】
胎盘外泌体的提取方法及应用


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种胎盘外泌体的提取方法及应用。

技术介绍

[0002]外泌体是细胞经过“内吞
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融合
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外排”等一系列调控过程形成的膜性脂质小囊泡，作为天然的细胞间通讯递质，在机体的多种生理病理进程中都起到了关键作用，包括细胞间信号传导、免疫调控、干细胞生长与分化等。外泌体在各细胞间充当通讯介质的方式主要有3种：一是直接识别靶细胞表面的信号分子并与受体结合，向细胞传递信息；二是与靶细胞质膜融合后，释放所携带的内容物，实现信息传递；三是通过释放胞内的信号分子作用于靶细胞表面受体，完成信息转运。不同来源的外泌体通常具有与其来源细胞相一致的生物学功能，例如间充质干细胞来源的外泌体具有促进干细胞分化的作用，因此被用来促进组织损伤的修复。此外，间充质来源的外泌体还可以抑制前期炎症因子的表达，通过加强细胞外基质的重塑达到抗炎、抗纤维化和促进组织再生的作用。
[0003]胎盘作为生命体的起源，内含丰富的干细胞成分，其释放的外泌体除具有间充质干细胞外泌体的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种胎盘外泌体的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)获取目标胎盘，清洗后加入30mM的NaHCO3缓冲液，将胎盘剪碎成组织块；(2)将剪碎后的组织块转入匀浆器中，在4℃条件下，点振式开启10秒，停10秒，循环3次，制得匀浆液；(3)将匀浆液采用离心机，在4℃条件下，7000rpm离心1h，取上层清液，再于7000rpm离心0.5h，收集上清液；(4)在4℃条件下，将上清液先用滤纸进行减压抽滤，再用0.45μm滤膜进行减压抽滤，最后使用0.22μm滤膜抽滤进行减压抽滤，收集抽滤物；(5)在4℃条件下，将步骤(4)得到的抽滤物使用100
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kDa膜包进行超滤浓缩，PBS缓冲液换液，得到浓缩液；(6)将浓缩液进行色谱尺寸排阻，然后采用离心超滤管进行浓缩，并使用生理盐水进行换液，得到胎盘外泌体。2.根据权利要求1所述的胎盘外泌体的提取方法，其特征在于：所述步骤(1)中胎盘与加入NaHCO3缓冲液的质量比为1：...

【专利技术属性】
技术研发人员：程放，武岳，王子豪，梁振涛，
申请(专利权)人：佛山热休生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：