一种氨溴索半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于食品安全检测技术领域，具体提供了一种氨溴索半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用，本发明专利技术制备得到了一种氨溴索半抗原Abx

【技术实现步骤摘要】
一种氨溴索半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及食品安全检测
，更具体地，涉及一种氨溴索半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]氨溴索(Ambroxol)，别名溴环己胺醇、沐舒坦，是一种多糖纤维分解剂，能够分解糖蛋白的多糖纤维部分，使其断裂致痰粘稠度降低，并可增加支气管腺体分泌，因而可促进呼吸道内部黏稠分泌物的排除及减少黏液的滞留，具有显著促进排痰的作用。在临床上，氨溴索作为一种多重药理作用的药物，具有显著的祛痰作用、抗氧化作用、抗炎作用等，一般用于治疗伴有痰液分泌不正常及排痰功能不良的急性、慢性呼吸系统疾病。
[0003]凉茶，一种极具特色的岭南“饮料”，被认为具有清热解毒、化痰镇咳等功效，受到广大岭南消费者的青睐。因此，当出现头疼脑热、咳嗽痰多等症状时，大多数岭南消费者更愿意去“凉茶铺”购买对应症状的凉茶饮用以进行自我“药疗”。但是为了牟取暴利，一些不法商贩有可能向止咳祛痰类的凉茶中添加氨溴索以达到提高凉茶的疗效的目的。消费者在不知情的情况下大量饮用添加了氨溴索药物的凉茶，极有可能会产生不良反应，如出现恶心、呕吐、胃部不适、过敏反应以及呼吸困难等，存在严重危害消费者的身体健康的风险。在凉茶中非法添加氨溴索药物的行为已严重违反了相关法律，扰乱了凉茶市场的秩序。目前，市面上凉茶种类、功效繁多，但部分种类凉茶未被卫生及食品药品监管部门纳入监管范围，国家也未出台针对各种凉茶的检测标准，因此，加强凉茶中氨溴索的检测对于保证凉茶的质量安全和消费者的健康十分重要。
[0004]有关氨溴索的残留分析方法已有一些报道。目前，对于氨溴索残留的检测方法主要有高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography，HPLC)(王博,李洪起,徐芳,等.HPLC法测定盐酸氨溴索注射液中有关物质[J].现代药物与临床,2012,27(3):226
‑
228.)、气相色谱(Gas Chromatography，GC)、气相色谱
‑
质谱联用(Gas Chromatography
‑
Mass Spectrometer，GC
‑
MS)以及高效液相
‑
质谱联用(High Performance Liquid Chromatography
‑
Mass Spectrometer，HPLC
‑
MS)等方法。这些方法虽然结果可靠，灵敏度高，但需要昂贵的仪器、专业人员操作，检测步骤繁琐，因此这些方法一方面不能实现现场快速检测的目的；另一方面也很难在我国基层单位得以推广。
[0005]因此，建立高效的氨溴索检测方法很有必要，寻找能够产生针对氨溴索特异性高的抗体的半抗原、人工抗原等免疫分析原料势在必行。

技术实现思路

[0006]本专利技术要解决的技术问题是克服现有技术中氨溴索检测技术的缺陷和不足，提供一种氨溴索半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用。
[0007]本专利技术的目的在于提供一种氨溴索半抗原。
[0008]本专利技术的目的还在于提供氨溴索半抗原在制备氨溴索人工抗原中的应用。
[0009]本专利技术的目的还在于提供氨溴索人工抗原。
[0010]本专利技术的目的还在于提供所述氨溴索半抗原和/或氨溴索人工抗原在制备氨溴索抗体中的应用。
[0011]本专利技术的目的还在于提供一种氨溴索多克隆抗体。
[0012]本专利技术的目的还在于提供一种检测氨溴索的试剂盒。
[0013]本专利技术的目的还在于提供一种氨溴索的检测方法。
[0014]本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：
[0015]本专利技术提供了一种氨溴索半抗原，所述氨溴索半抗原(Abx
‑
SAA)的结构式如式(I)所示，
[0016][0017]所述氨溴索半抗原(Abx
‑
SAA)采用系统命名法命名为：4
‑
((2,4
‑
dibromo
‑6‑
((((1r,4r)
‑4‑
hydroxycyclohexyl)amino)methyl)phenyl)amino)
‑4‑
ox obutanoic acid，即4
‑
((2,4
‑
二溴
‑6‑
((((1r,4r)
‑4‑
羟基环己基)氨基)甲基)苯基)氨基)
‑4‑
氧代丁酸。
[0018]本专利技术式(I)所示化合物(Abx
‑
SAA)的制备方法，包括如下步骤：
[0019]将氨溴索的二甲基亚砜溶液与丁二酸酐、吡啶混合并充分反应；分离纯化后得到的反应产物，干燥，干燥后产物的乙酸乙酯溶液利用饱和氯化钠萃取，将萃取的乙酸乙酯层干燥，即得氨溴索半抗原(Abx
‑
SAA)。
[0020]优选地，将氨溴索溶解于二甲基亚砜溶液后，加入丁二酸酐和吡啶混合并充分反应4～6h；以石油醚和乙酸乙酯的混合液为展开剂，通过硅胶柱层析纯化反应产物，干燥后的产物溶于乙酸乙酯，然后用饱和氯化钠充分萃取，收集的酯层用无水硫酸钠进行干燥后，即得氨溴索半抗原(Abx
‑
SAA)。
[0021]优选地，所述展开剂石油醚：乙酸乙酯体积比为4:1。
[0022]优选地，所述氨溴索：丁二酸酐的质量比为2～6:1～4。
[0023]更优选地，所述氨溴索：丁二酸酐的质量比为4:3。
[0024]所述氨溴索的结构式为：
[0025][0026]所述丁二酸酐的结构式为：
[0027][0028]所述氨溴索半抗原在制备氨溴索人工抗原中的应用也在本专利技术的保护范围之内。
[0029]一种氨溴索人工抗原，由所述氨溴索半抗原(Abx
‑
SAA)偶联载体蛋白得到，氨溴索人工抗原的结构式如式(II)所示，其中，P为载体蛋白，
[0030][0031]优选地，所述载体蛋白(P)为钥孔血蓝蛋白(Keyhole limpet hemocyanin,KLH)、乳铁蛋白(Lactoferrin,LF)、鸡卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)或者牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)中的任意一种或几种。
[0032]本专利技术所述氨溴索人工抗原的制备方法，利用所述氨溴索半抗原(Abx
‑
SAA)，通过活泼酯法偶联载体蛋白制备。
[0033]作为上述方法的一个具体实施方式，所述氨溴索人工抗原的制备方法，包括如下步骤：
[0034](1)将Abx
‑
SAA、N
‑
羟基丁二酰亚胺(NHS)和1
‑
(3
‑
二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)溶于N本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种氨溴索半抗原，其特征在于，所述氨溴索半抗原的结构式如式(I)所示，2.如式(I)所示化合物的制备方法，其特征在于，将氨溴索的二甲基亚砜溶液与丁二酸酐、吡啶混合并充分反应；分离纯化后得到的反应产物，干燥，干燥后产物的乙酸乙酯溶液利用饱和氯化钠萃取，将萃取的乙酸乙酯层干燥，即得；3.权利要求1所述氨溴索半抗原在制备氨溴索人工抗原中的应用。4.一种氨溴索人工抗原，其特征在于，为权利要求1所述氨溴索半抗原偶联载体蛋白得到；所述氨溴索人工抗原的结构式如式(II)所示，其中，P为载体蛋白，5.权利要求4所述氨溴索人工抗原在制备氨溴索抗体中的应用。6.一种氨溴索多克隆抗体，其特征在于，利用权利要求4所述氨溴索人工抗原免疫动物制备得到。

【专利技术属性】
技术研发人员：雷红涛，全琦琪，潘康亮，方亚琳，王子安，王锦，沈兴，李向梅，韦晓群，徐小艳，徐振林，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：