一种船舶压载水微藻含量的原位检测方法技术

本发明专利技术属于船舶压载水微藻含量检测技术领域，具体涉及一种船舶压载水微藻含量的原位检测方法。所述方法利用荧光探针的发射峰与压载水微藻叶绿素a的吸收峰高度重叠，发生竞争发射，引起探针荧光强度的改变，建立微藻密度与探针发光强度之间的关系模型，从而快速计算压载水样本中微藻的生物量。本发明专利技术采用近红外光(NIR)作为激发光源，光毒性低、背景荧光低、检测灵敏度高；采用的无机上转换纳米粒子，其光物理化学性质稳定、无光闪烁、无光漂白现象，并且适用于有腐蚀性的压载水环境；表面功能化修饰赋予探针良好的水溶性以及生物相容性，可直接进入微藻细胞，实现压载水中微藻细胞数量的原位快速检测。的原位快速检测。的原位快速检测。

【技术实现步骤摘要】
一种船舶压载水微藻含量的原位检测方法


[0001]本专利技术属于船舶压载水微藻含量检测
，具体涉及采用表面功能化的红色上转换纳米荧光探针，通过竞争性荧光分析法，实现微藻含量的原位快速检测。

技术介绍

[0002]随着社会的快速发展，经济趋于全球化，国际经济贸易日益繁荣，船舶承载着90％以上的货运任务。为了通过调整船舶的吃水和稳定，减少船体变形和船体阻力并降低船体的振动，改善船舶的适航性，船舶普遍使用水作为压载物。然而，船舶压载水的排放也成为了海洋生物和病原体传播的主要途径，日益严重地破坏着海洋生物链，给全球经济造成了极大的损失，已被被国际海事组织(IMO)认定为海洋所面临的四大威胁之一。压载水传播的外来生物中微藻占很大一部分比例，微藻入侵使世界各地海岸饱受“赤潮”影响，造成当地生物生病或死亡、破坏当地生态系统及鱼类资源和休闲设施等，这些微藻在富营养化的水体中还会大量繁殖，在世界范围内造成巨大的经济及环境损失(国际航行船舶压舱水生物监测调查报告，航海技术，2003，26，2
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4)。因此，压载水在排放之前必须对其中的微藻进本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种船舶压载水微藻含量的原位检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1)：将表面功能化的上转换纳米荧光探针分散在溶剂中，配制成浓度为1
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10mol/L的探针储备液A；步骤2)：取含不同微藻生物量的压载水水样，将探针储备液A分别加入各组压载水水样中共同孵育，进行荧光光谱测量，由于微藻细胞内叶绿素a与探针在红光区产生竞争发射，从而建立压载水水样微藻生物量与探针荧光强度之间的关系曲线；步骤3)：取待测压载水水样，加入探针储备液A，共同孵育后，进行荧光光谱测量，根据步骤2)建立的微藻生物量与探针荧光强度之间的关系曲线，获得待测压载水水样中的微藻生物量。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤1)中的溶剂包括二甲基亚砜、乙醇、N，N
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二甲基甲酰胺中的一种或两种以上。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤1)中，表面功能化的上转换纳米荧光探针以750～850nm、940～1100nm、1450～1600nm中的一个或两个以上波长作为近红外光激发源波长，发射光为位于640
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670nm的红色荧光。4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，孵育时间为0.2
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2h。5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，将探针储备液A加入压载水水样共同孵育，使上转换纳米荧光探针的浓度为0.1
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1mol/L。6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述微藻包括小球藻、扁藻、叉鞭藻、新月藻、三角褐指藻、角毛藻、海链藻或杜式盐藻。7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤1)中表面功能化的上转换纳米荧光探针的制...

【专利技术属性】
技术研发人员：田莹，辛芳云，付姚，邢明铭，庞强，李佳瑶，
申请(专利权)人：大连海事大学，
类型：发明
国别省市：