一种不同基原淫羊藿的鉴别方法技术

本发明专利技术涉及一种不同基原淫羊藿的鉴别方法，借助现有的液相和质谱分析技术，建立各个不同产地及品种的淫羊藿的特征图谱，对淫羊藿个特征组分进行检测及比对，大大提高的淫羊藿的品种及产地鉴别效率，操作简单，准确性高；有利于市面上淫羊藿药材的分类储存，辅助食品药品行业公司提升药材质量标准，促进不同基原淫羊藿资源的健康可持续应用。羊藿资源的健康可持续应用。羊藿资源的健康可持续应用。

【技术实现步骤摘要】
一种不同基原淫羊藿的鉴别方法


[0001]本专利技术属于植物提取物分析领域，具体涉及一种不同基原淫羊藿的鉴别方法。

技术介绍

[0002]淫羊藿最早记载于《神农本草经》，应用广泛、历史悠久、开发潜力大。淫羊藿产地分布范围广泛，郭宝林调查发现柔毛淫羊藿主要来源于四川；朝鲜淫羊藿主要来源于东北；淫羊藿主要来源于甘肃；箭叶淫羊藿分布较广，有安徽、江西、湖南、浙江、福建、广西、广东等地，以安徽和江西为主，其余地方分布量较小；巫山淫羊藿的分布面积较小，仅分布于四川东北部、重庆北部以及陕西安康地区。
[0003]《中国药典》(2015版)收录淫羊藿主要有效成分为淫羊藿总黄酮、淫羊藿苷，要求总黄酮以淫羊藿苷计，不得少于5.0％，淫羊藿苷含量(按照干燥品计)不得少于0.50％。《中国药典》(2020版)引入淫羊藿总黄酮、总黄酮醇苷含量测定方法，要求总黄酮以淫羊藿苷计，不得少于5.0％。总黄酮醇苷含量(按照干燥品计)朝鲜淫羊藿不得少于0.50％，淫羊藿、柔毛淫羊藿、箭叶淫羊藿均不得少于1.5％。
[0004]现代研究表明，淫羊藿属植物中含有黄酮、木脂素、苯酚苷、生物碱、多糖等多类化学成分。其中，黄酮苷类成分主要包括淫羊藿苷、淫羊藿素、朝藿定A～C等，淫羊藿中至少含有50多种相同母核结构的淫羊藿苷类成分。目前，淫羊藿的多基原、多产地、难鉴别的特点是淫羊藿质量控制中应重点关注的问题。淫羊藿的品种、产地、采收期均会影响淫羊藿质量。不同品种、不同产地、不同采收期的淫羊藿中淫羊藿苷的含量差异明显，同一品种的植株个体间差异也很大。淫羊藿中很多黄酮苷类具有相同的黄酮母核，在结构上仅有糖基连接位置、糖基种类、糖基数目的差异。有研究表明淫羊藿中淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C的含量不同产地、不同品种间差异均很大。可能是由于淫羊藿苷类成分在淫羊藿植株体内存在相互转化关系，影响其转化的关键酶基因，如糖基转移酶基因等对光、热、温度等生态因素较为敏感，少量的外部刺激均会影响该类基因的表达。目前淫羊藿质量控制中存在的主要问题主要有:指标性成分过于单一，且淫羊藿苷在淫羊藿中含量不稳定，市场上很多淫羊藿药材及饮片质量不合格；中成药在投料的过程中若投入淫羊藿茎及地下部分，仅靠当前的质量评价方法难以鉴别，因淫羊藿茎及地下部位中均含有淫羊藿苷，总黄酮的含量也不低。寻找合适的质量控制指标是解决目前淫羊藿质量控制问题的前提。其次对不同品种、不同产地、不同采收期、不同加工方法的淫羊藿作系统的质量分析，完善淫羊藿质量评价方法。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于，提出一种不同基原淫羊藿的鉴别方法，解决淫羊藿不同基原区分困难的问题。
[0006]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：一种不同基原淫羊藿的鉴别方法，包括以下测定条件及步骤：
[0007]对照品溶液的制备：精密称取淫羊藿苷对照品，使用甲醇溶解制成对照品溶液；
[0008]供试品的制备：精密称取多个不同基原的淫羊藿粉末，分别加入稀乙醇溶解制成淫羊藿溶液；
[0009]色谱分析条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，水为流动相B，按规定进行梯度洗脱；检测波长为270nm；
[0010]特征图谱的建立：精密吸取对照品溶液10μL注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，即得对照品色谱图；精密吸取多个不同基原的淫羊藿溶液各10μL，分别注入液相色谱仪进行测定，记录色谱图，得到多个不同基原的淫羊藿色谱图，作为淫羊藿基原鉴别特征图谱；
[0011]图谱的应用：将待测试的淫羊藿色谱图与淫羊藿基原鉴别特征图谱对比，根据特征峰和相似度即可确定淫羊藿基原。
[0012]优选的是，所述对照品溶液的制备步骤中，对照品溶液浓度为30μg/ml。
[0013]优选的是，所述淫羊藿溶液的配制步骤为：精密称取淫羊藿粉末1.0g放置于三角烧瓶中，加入稀乙醇100mL，超声(250W，40KHz)30分钟后，放置冷却至室温，摇匀，过滤，即得淫羊藿溶液。
[0014]优选的是，所述色谱分析条件中，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，水为流动相B，洗脱梯度如下：
[0015]时间(分钟)流动相A(％)流动相B(％)02278152872302971561000
[0016]优选的是，所述色谱分析条件中，理论塔板数按淫羊藿苷峰计算应不低于8000。
[0017]优选的是，所述指纹图谱建立步骤中，至少选取5个不同基原的各15批次不同产地淫羊藿溶液进行液相色谱分析。
[0018]优选的是，所述指纹图谱的应用步骤中，按液相色谱图中特征峰数量、相对峰面积及相似度对淫羊藿基原进行对比鉴别。
[0019]本专利技术产生的有益效果是：利用现有的高效液相色谱分析技术，通过同一高效液相色谱条件，不仅能够测定淫羊藿中的成分种类，还能对其含量进行测定，建立不同基原的淫羊藿特征色谱图，对淫羊藿基原进行快速测定。本专利技术中的检测方式操作简单，准确性高，在液相色谱仪的帮助下可以有效全面地监控原料质量，从而保障产品的质量稳定、均匀、可控。
附图说明
[0020]图1是柔毛淫羊藿特征图谱；
[0021]图2是心叶淫羊藿特征图谱；
[0022]图3是朝鲜淫羊藿特征图谱；
[0023]图4是箭叶淫羊藿特征图谱；
[0024]图5是巫山淫羊藿特征图谱；
[0025]图6是未知产地淫羊藿液相图谱。
具体实施方式
[0026]实施例
[0027]精密称取淫羊藿苷(纯度为94.2％)对照品10.42mg，加甲醇制成每1mL含97.2144μg的对照品溶液。分别精密称取基原为柔毛、心叶、朝鲜、箭叶和巫山淫羊藿的粉末1.0g于三角烧瓶中，加入100mL稀乙醇，超声(250W，40KHz)溶解30分钟后，放置冷却至室温，摇匀，过滤，即得淫羊藿溶液。
[0028]接着分别对对照品溶液和淫羊藿溶液进行高效液相色谱分析，色谱分析条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈
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0.1％乙酸为流动相按规定进行梯度洗脱，洗脱梯度如表1；柱温为35℃，检测波长为270nm；同时理论塔板数按淫羊藿苷峰计算应不低于8000。
[0029]表1
[0030]时间(分钟)流动相A(％)流动相B(％)02278152872302971561000
[0031]精密吸取对照品溶液10μL注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，即得对照品色谱图；精密吸取5个不同产地淫羊藿溶液各10μL，分别注入液相色谱仪进行测定，记录色谱图，得到5个不同产地淫羊藿溶液色谱图；最终获得如图1
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5的淫羊藿特征对比图谱。
[0032]接下来对色谱条件与系统适用性进行试验
[0033]精密称取淫羊藿苷(纯度为94.2％)对照品15.86mg，精密称定，加甲醇制成每1mL含74.7006μg的对照品溶液。
[0034]精密称取未知产地的淫羊藿的粉末1.0g于三本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种不同基原淫羊藿的鉴别方法，其特征在于：包括以下测定条件及步骤：对照品溶液的制备：精密称取淫羊藿苷对照品，使用甲醇溶解制成对照品溶液；供试品的制备：精密称取多个不同基原的淫羊藿粉末，分别加入稀乙醇溶解制成淫羊藿溶液；色谱分析条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，水为流动相B，按规定进行梯度洗脱；检测波长为270nm；特征图谱的建立：精密吸取对照品溶液10μL注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，即得对照品色谱图；精密吸取多个不同基原的淫羊藿溶液各10μL，分别注入液相色谱仪进行测定，记录色谱图，得到多个不同基原的淫羊藿色谱图，作为淫羊藿基原鉴别特征图谱；图谱的应用：将待测试的淫羊藿色谱图与淫羊藿基原鉴别特征图谱对比，根据相似度和特征峰即可确定淫羊藿基原。2.据权利要求1所述一种不同基原淫羊藿的鉴别方法，其特征在于：所述对照品溶液的制备步骤中，对照品溶液浓度为30μg/ml。3.根据权利要求1所述一种不同基原淫羊藿的鉴别方法，其特征在于：所...

【专利技术属性】
技术研发人员：王玉，陈志元，孙代华，陈搏，马闯，
申请(专利权)人：劲牌持正堂药业有限公司，
类型：发明
国别省市：