一种通用型适体生物传感器及在标志物检测领域的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种通用型适体生物传感器及在标志物检测领域的应用。现有生物传感通常需要针对目标物设计整个传感器的识别单元，显著的限制了传感器应用的灵活性。本发明专利技术目的在于提供一种通用型的生物传感器，通过替换其中的识别元件即可实现灵敏检测。为了实现上述目的，本发明专利技术提供的通用型适体生物传感器，包括磁性探针模块和信号放大模块，其中，磁性探针模块为修饰识别探针的磁珠，所述识别探针中具有检测目标的适体序列；所述信号放大模块包括具孔载体，所述具孔载体包载荧光染料，表面修饰连接链，所述连接链中包括识别探针的反义序列，或包括适体序列。经验证，上述传感器可应用于多种肿瘤标志物的检测，具有良好的检测灵敏度。度。度。

【技术实现步骤摘要】
一种通用型适体生物传感器及在标志物检测领域的应用


[0001]本专利技术属于标志物检测生物传感器
，具体涉及一种通用型适体生物传感器、所 述通用型适体生物传感器在标志物检测领域的应用及一种标志物的检测方法。

技术介绍

[0002]公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为 承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
[0003]作为生命活动的物质基础，生物体内生物分子的稳态在细胞增殖、分化和凋亡等多种细 胞过程中发挥着不可或缺的作用。其中，某些生物分子的异常表达会导致癌症的发生与发展， 这些生物分子被称为癌症标志物。例如，三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate,ATP)，作为 细胞活动的基本能量分子，在癌细胞微环境中表达水平显著高于正常细胞；凝血酶，一种催 化纤维蛋白原转化为纤维蛋白的蛋白酶，在白血病细胞中表达水平升高；血小板衍生生长因 子
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BB(Platelet
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derived growth facto本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种通用型适体生物传感器，其特征在于，所述生物传感器包括磁性探针模块和信号放大模块；其中，磁性探针模块为修饰识别探针的磁珠，所述识别探针中具有检测目标的适体序列；所述信号放大模块包括具孔载体，所述具孔载体包载荧光染料，表面修饰连接链，所述连接链中包括识别探针的反义序列，或包括适体序列。2.如权利要求1所述通用型适体生物传感器，其特征在于，所述磁珠表面修饰链霉亲和素，所述识别探针依靠链霉亲和素与生物素的特异性结合连接在磁珠表面。3.如权利要求1所述通用型适体生物传感器，其特征在于，所述的信号放大模块中：所述具孔载体为内部中空并且载体表面分布通孔的球形材料，直径为1～2μm孔径为1～5nm，表面能够通过物理、化学方式固定连接链；优选的，所述球形载体为氨基化的介孔硅纳米颗粒，通过酰胺键与连接链连接；进一步的，所述介孔硅纳米颗粒采用共缩聚法，制备方法包括如下步骤：将CTAB水溶液缓慢加入碱液中，搅拌并加热反应一段时间，向反应液中滴加TEOS和硅烷偶联剂继续加热反应得到白色固体；分离所述白色固体洗涤并干燥后加入盐酸和甲醇溶液中回流以去除CTAB，即可得到MSN
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NH2；优选的，所述具孔载体内部包载荧光染料，所述荧光染料为包括但不限于罗丹明6G、罗丹明B、三苯胺及其衍生物中的一种。4.如权利要求3所述通用型适体生物传感器，其特征在于，所述介孔硅纳米颗粒表面修饰连接链的方式为，通过酰胺键连接；具体的，所述连接方式如下：将上述MSN
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NH2进行羧基化，将连接链通过酰胺缩合修饰至介孔硅颗粒表面；具体的，所述信号放大模块的制备方法如下：向MSN
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NH2的二甲基甲酰胺溶液中加入丁二酸酐反应后得到所述表面羧基化的介孔硅纳米颗粒；继续加入上述Rh6G溶液，避光搅拌即可得到载有Rh6G的MSN
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COOH红色固体，向其混悬液中加入1
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(3
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二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺盐酸盐和硫代琥珀酰亚胺，搅拌反应以活化羧基，再加入PBS缓冲液和氨基化的连接链，避光反应，即可得到所述信号放大模块。5.如权利要求1所述通用型适体生物传感器，其特征在于，所述识别探针包括锚定DNA及适配体，该实施方式中：所述适配体的3
’
端具有适体序列，用于结合检测目标；所述适体序列恰当的长度为20～40个碱基，优选的，为25～40个碱基；所述锚定DNA的5
’
端具有连接链的互补序列，其3
’
端修饰生物素，通过生物素和链霉亲和素的特异性结合连接至磁珠表面；所述连接链的5
’
端具有锚定DNA的互补序列，3
’
具有氨基通过酰胺键连接至具孔载体表面，其余位点通过封闭链进行封闭。6.如权利要求5所述通用型适体生物传感器，其特征在于，一种用于ATP检测的通用型适体生物传感器中，具体序列如下：适配体：GAGAGAACCTGGGGGAGTA...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜玮，张楠，丁胜勇，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：