一种检测血液中二氯甲烷的方法技术

本发明专利技术公开了一种检测血液中二氯甲烷的方法，属于检验检测技术领域，其方法是以血液样本为检测对象，采用气相色谱

【技术实现步骤摘要】
一种检测血液中二氯甲烷的方法


[0001]本专利技术涉及检验检测
，尤其涉及一种检测血液中二氯甲烷的方法。

技术介绍

[0002]二氯甲烷(Dichloromethane,DCM；CH2Cl2；CAS NO.75
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09
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2)属于氯代甲烷家族，是无色、透明、易挥发液体，微溶于水、易溶于有机溶剂，对生物体有毒性，目前归为二类致癌物。除自然界可产生少量的二氯甲烷外，每年全球有100万吨以上的二氯甲烷由人类工业化产生，其作为有机溶剂广泛应用于航天、电子、胶片、医药等领域的化学合成、提取、纯化和金属清洗。二氯甲烷可通过呼吸、吞食和皮肤吸收三种途径进入人体，由于其不稳定性，环境中二氯甲烷主要存在于空气中，因此吸入为主要途径。人体吸入二氯甲烷后，呼吸和中枢神经系统受损，导致头晕、恶心、呕吐等症状，高浓度的职业暴露可导致共济失调、意识丧失甚至死亡。
[0003]随着二氯甲烷对于环境和人体危害日益积累和显现，并鉴于氯代甲烷家族在非正常死亡、性侵案件方面的不断报道。
[0004]二十世纪八十年代以前，二氯甲烷主要作为麻醉和镇静剂用于医学领域，由于其良好的有机物溶解性能，逐渐在医药、化工等行业广泛使用，不仅对环境造成较严重污染，同时职业暴露和误吸导致的中毒和致死案件不断有报道，其毒性逐渐显现，危害不容小觑。据美国毒物控制中心协会(AAPPC)记录，1985
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2017年美国有37201例二氯甲烷中毒事件；1980
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2018年有85例致死案件报道，大部分为职业暴露导致，如使用二氯甲烷作为油漆去除剂、脱脂剂、粘合剂等。国内尚未有针对二氯甲烷中毒和致死事件的回顾性统计分析，但急、慢性中毒事故持续有报道，如使用二氯甲烷作为除锈剂、误吸等导致中毒或死亡。因此，对疑似二氯甲烷中毒或致死案件中生物检材检测方法的探索优化和应用具有法医学实践意义。
[0005]目前报道的二氯甲烷检测方法均为顶空气相色谱法，且应用集中在环境监测、卫生健康领域，未见基于气相色谱
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质谱法定性和气相色谱法定量的法医学检测应用。目前报道的顶空气相色谱法应用于血液中二氯甲烷的定性定量检测，结果特异性较差，且检测效率较低，比如所需样本量较多，至少需要1ml，,前处理时间较久；平衡时间至少需要20min；分离度不够，二氯甲烷和三氯甲烷的分离度分别为5.02和4.56，专属性不够，因为其仅依靠气相色谱定性，本方法使用更为精准的质谱定性。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的就在于提供一种快速、准确检测血液中二氯甲烷的方法，以解决上述问题。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案是这样的：一种检测血液中二氯甲烷的方法，以血液样本为检测对象，采用气相色谱
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质谱联用仪与顶空气相色谱分别进行定性和/或定量检测。
[0008]作为优选的技术方案：在检测前对样品进行前处理，处理方法为：取待检测血液，加入到含有内标工作液的顶空瓶内，立即压盖，轻微摇匀，放置于60
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70℃水浴5
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15min，即完成前处理。
[0009]作为优选的技术方案：所述顶空气相色谱的顶空条件为：加热箱温度65℃，定量环温度105℃，传输线温度110℃，样品瓶加热平衡时间10min，样品瓶加压时间0.1min，定量环充满时间0.1min，定量环平衡时间0.05min，进样时间1min；前述顶空条件主要用于定量。
[0010]作为进一步优选的技术方案所述顶空气相色谱的色谱条件为：双色谱柱，柱温40℃；高纯氦气作载气，流速3mL/min，分流比20∶1；进样口温度200℃；双FID检测器，检测器温度均为250℃。前述色谱条件主要用于定量。
[0011]专利技术人通过试验发现，一根色谱柱可能会出现不同物质在相同时间段出峰，导致不能有效分离和鉴别，而优选采用两根色谱柱则能避免此情况发生，让定性结果更准确。
[0012]作为优选的技术方案：所述气相色谱
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质谱联用的气相色谱条件为：
[0013]柱温程序：100℃，保持0min；以15℃/min的速率升温至220℃，保持4min；高纯氦气作载气，流速1mL/min，分流比20∶1；进样口温度200℃。前述气相色谱条件主要用于定性。
[0014]作为进一步优选的技术方案：所述气相色谱
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质谱联用的质谱条件为：
[0015]传输线温度230℃；电子轰击离子源，电子能量70eV；离子源温度230℃；全扫描模式，扫描质量数范围10
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200amu。前述质谱条件主要用于定性。
[0016]与现有技术相比，本专利技术的优点在于：
[0017]本专利技术顶空气相色谱和气相色谱
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质谱联用法，建立了血液中二氯甲烷定性定量的快速、稳定检测方法，并成功应用于两例二氯甲烷致死案件的法医毒物学检测和分析。
[0018]本专利技术以法医鉴定实践中常见的血液样本为检测对象，通过仪器设备参数探索优化，以保留时间、特征碎片离子和谱库分析为依据，提供了快速、准确的气相色谱
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质谱(GC
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MS)定性方法，同时提供了匹配的顶空气相色谱(HS
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GC)定量方法，在不同色谱柱上均得到了方法学验证。与现有技术相比，本专利技术不仅增加了质谱定性确证，且对前处理条件进行了优化使得采用本方法时，所需样本量降至0.5ml，平衡时间更少，仅需10min左右，分离度更好，二氯甲烷与氯仿的分离度在双柱上分别达到46.4和33.2，定量曲线更为合理(内标
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校准曲线法)，以本专利技术应用为例，两名死者血样在双柱上定量结果的相对相差RD值分别为0.05％、0.3％，表明该定量方法稳定、可靠，可用于疑似二氯甲烷中毒或致死案件的毒物学检测分析。
附图说明
[0019]图1为空白血添加二氯甲烷的总离子流色谱图；
[0020]图2为空白血添加的质谱图；
[0021]图3为二氯甲烷的谱库检索；
[0022]图4为空白血的总离子流色谱图；
[0023]图5为二氯甲烷与乙醇等8种挥发性化合物在HS
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GC双色谱柱上的分离情况；
[0024]图6为血液中二氯甲烷的A柱HS
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GC校准曲线；
[0025]图7为血液中二氯甲烷的B柱HS
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GC校准曲线。
具体实施方式
[0026]下面将结合附图对本专利技术作进一步说明。
[0027]下述实施例所用到的主要仪器与试剂：
[0028]Trace 1300/ISQQD气相色谱
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质谱(美国ThermoFisher公司)；7697A/8860顶空气相色谱(美国Agilent公司)；天平(梅特勒
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托利多仪器上海有限公司)；超纯水系统(四川优普越纯科技有限公司)；本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测血液中二氯甲烷的方法，其特征在于：以血液样本为检测对象，采用气相色谱
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质谱联用仪与顶空气相色谱分别进行定性和/或定量检测。2.根据权利要求1所述的一种检测血液中二氯甲烷的方法，其特征在于：在检测前对样品进行前处理，处理方法为：取待检测血液，加入到含有内标工作液的顶空瓶内，立即压盖，轻微摇匀，放置于60
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70℃水浴5
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15min，即完成前处理。3.根据权利要求1所述的一种检测血液中二氯甲烷的方法，其特征在于：所述顶空气相色谱的顶空条件为：加热箱温度65℃，定量环温度105℃，传输线温度110℃，样品瓶加热平衡时间10min，样品瓶加压时间0.1min，定量环充满时间0.1min，定量环平衡时间0.05min，进样时间1min。4.根据权利要求3所述的一种检测血液中二氯甲...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢翔，廖勇，亓宇，
申请(专利权)人：四川基因格司法鉴定中心，
类型：发明
国别省市：