用于环境检测的荧光探针及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种用于环境检测的荧光探针及其制备方法和应用，荧光探针具有式(1)所示的结构式，由化合物A和化合物B合成制得，光学性能稳定(探针可室温稳定存放六个月以上，其光谱性质保持不变)，灵敏度较高，对铜离子识别能力强，检测时溶液由黄色变为红色，可实现裸眼识别，且选择性好，响应速度较快(响应时间5min)，响应范围为0.1

【技术实现步骤摘要】
用于环境检测的荧光探针及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及化学分析检测
，具体涉及一种用于环境检测的荧光探针及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]铜是人体的第三大必须微量元素，在很多生理过程中起到非常重要的作用，如维持蛋白的功能结构，参与细胞呼吸作用、基因表达及相关金属酶催化反应。但另一方面，铜含量的异常及代谢的紊乱会导致与一系列神经退行性疾病(如阿尔茨海默病、帕金森病、朊病毒病等)相关的氧化应激反应。美国国家环境保护局规定了铜离子的安全限量值为1.3ppm(20μmol
·
L
‑1)。鉴于铜离子的重要生理和病理功能，因此，开发高灵敏、高选择检测铜离子的方法是非常必要的。
[0003]传统检测铜离子的方法主要有原子吸收光谱法(Gonz
á
lesA.P.S.Anal.Chim.Acta2009,636,198.)，原子发射光谱法(LiuY.Talanta2005,68,25.)，电感耦合等离子体质谱法(WuJ.Anal.Chem.1997,69,2464.)，比色法(ShiraishiY.ACSAppl.Mater.Interfaces2013,5,3454.)及伏安法(Pathirathnap.PAnal.Chem.2012,84,6298.)。但这些方法一般都耗时较长、涉及复杂繁琐的样品处理过程或需要昂贵的精密仪器等。而利用分子探针荧光法检测铜离子具有样品处理简洁、成本低廉及操作简便快速等优点，近年来得到了快速发展与利用。但目前开发的用于检测铜离子的荧光探针分子其激发及发射波长大都在中短波段区域(ChenT.Biosens.Bioelectron.2015,66,259；YangM.Sens.ActuatorsB2014,204,710；ZhangL.Bioorg.Med.Chem.Lett.2013,23,3511.)，这样不利于复杂样品背景干扰的消除，由于波段的光生物穿透能力弱且存在生物损伤性，因此不利于生物样品的检测。

技术实现思路

[0004]本专利技术提供了一种用于环境工程监测和检测的荧光探针及其制备方法和应用，用以解决目前现有检测方法耗时较长、涉及复杂繁琐的样品处理过程或需要昂贵的精密仪器的缺点，以及现有荧光探针难以应对复杂样品背景干扰的技术问题。
[0005]为解决上述技术问题，本专利技术采用以下技术方案：
[0006]一种用于环境检测的荧光探针，其分子结构式如式(1)所示：
[0007]式中，X为卤族元素。
[0008]上述技术方案的设计思路在于，本专利技术一方面利用铜离子能选择性地水解吡啶甲酸酯的特有反应性质，将其作为荧光探针中铜离子的响应基团；另一方面在分子结构中引入二氰基异氟尔酮电子基团，利用其分子结构中酚羟基为给电子基团的大π共轭推拉体系具有很好的长波长荧光发射性能这一分子特性设计荧光基团，并在其中的酚羟基邻位引入卤素原子，使得探针的pKa值可调节，由于卤素原子较氢原子更强的电负性，因此荧光团的更容易形成酚氧负离子，从使探针可在生理pH值溶液体系中产生强的荧光发射，且通过在酚羟基位引入不同的吸电子基团能改变荧光基团的推拉电子体系的特性从而改变其荧光性质，最终获得了发射波长较长、响应效果好的用于检测铜离子的荧光探针，本专利技术荧光探针遇到铜离子后，铜离子能催化水解吡啶甲酸酯，从而释放有强ICT(分子内电荷转移)效应的、卤素取代的二氰基异氟尔酮大π体系，使探针溶液紫外吸收发生显著红移(颜色由黄色变为红色)且荧光发射显著增强，室温下便可以对铜离子进行检测，上述荧光探针分子具有良好的稳定性和光学性质，反应前最大吸收波长为～400nm，无显著荧光发射；随着铜离子的加入，探针分子紫外光波红移至～500nm处，并在～660nm处呈现及强的荧光发射。
[0009]作为上述技术方案的进一步优选，所述荧光探针对铜离子的检测浓度为0.1～10μmol
·
L
‑1，检测限为34nmol
·
L
‑1。
[0010]基于同一技术构思，本专利技术还提供一种上述荧光探针的制备方法，包括以下步骤：
[0011]S1、将化合物A和化合物B溶于溶剂中，反应1～24h，得到混合溶液；其中化合物A的分子结构式如式(2)所示：
[0012]式中，X为卤族元素；化合物B为吡啶甲酸或吡啶甲酸衍生物中的一种；
[0013]S2、将所述混合溶液进行分离、纯化，即得所述荧光探针。
[0014]上述技术方案的设计思路在于，本专利技术通过简单流程即获得了特定荧光探针，原料易得，合成产率较高(在84％以上)，为荧光探针的大规模生产和应用提供了现实上的可能性。
[0015]作为上述技术方案的进一步优选，S1中所述化合物A和化合物B在催化剂的催化作用下进行反应，所述催化剂包括三乙胺、4
‑
二甲氨基吡啶、二环己基碳二亚胺、N,N
‑
二异丙基碳二亚胺和1
‑
(3
‑
二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺中的至少一种。
[0016]作为上述技术方案的进一步优选，S1中所述化合物A和化合物B的反应温度为20～100℃。温度会对化合物之间的反应速率产生影响，本优选方案所限定的反应温度范围即可保证反应速率处在较高水平，又可避免因温度过高造成的原料、溶剂等物质的挥发。
[0017]作为上述技术方案的进一步优选，所述溶剂包括二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、二甲基甲酰胺和N
‑
甲基吡咯烷酮中的至少一种。上述溶剂不含羟基、氨基等反应型基团，不与原料产生反应，且熔沸点适中，有利于反应的顺利、高效进行。
[0018]作为上述技术方案的进一步优选，所述吡啶甲酸衍生物为吡啶甲酰氯或吡啶甲酰溴。
[0019]基于同一技术构思，本专利技术还提供一种上述的荧光探针的应用，所述荧光探针用于水体中铜离子的定性及定量测定，或所述荧光探针用于生物体系中铜离子的定性测定。
[0020]作为上述技术方案的进一步优选，所述荧光探针应用于水体中铜离子的定量检测，具体包括以下步骤：
[0021](1)绘制标准曲线：将所述荧光探针溶于磷酸缓冲溶液中，得到探针溶液；向所述探针溶液中加入不同浓度的铜离子并测量特定波长下加入铜离子后所述探针溶液的荧光强度，以所得的荧光发射强度对探针溶液中铜离子的浓度绘制标准曲线；
[0022](2)将待测水体样品配置成待测溶液，在所述待测溶液中加入所述荧光探针，测定其在所述特定波长下的荧光强度，根据该荧光强度和所述标准曲线即得到所述待测溶液中铜离子的浓度。
[0023]作为上述技术方案的进一步优选，所述荧光探针应用于生物样品的定性检测，具体包括以下步骤：将所述生物样品与所述荧光探针一同进行培育后，利用荧光成像的方法对所述生物样品进行定性分析。
[0024]与现有技术相比，本专利技术的优点在于：
[0025](1)本专利技术的荧光探针光学性能稳定(探针本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于环境检测的荧光探针，其特征在于，其分子结构式如式(1)所示：式中，X为卤族元素。2.根据权利要求1所述的荧光探针，其特征在于，所述荧光探针对铜离子的检测浓度为0.1～10μmol
·
L
‑1，检测限为34nmol
·
L
‑1。3.一种权利要求1所述的荧光探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、将化合物A和化合物B溶于溶剂中，反应1～24h，得到混合溶液；其中化合物A的分子结构式如式(2)所示：式中，X为卤族元素；化合物B为吡啶甲酸或吡啶甲酸衍生物中的一种；S2、将所述混合溶液进行分离、纯化，即得所述荧光探针。4.根据权利要求3所述的荧光探针的制备方法，其特征在于，S1中所述化合物A和化合物B在催化剂的催化作用下进行反应，所述催化剂包括三乙胺、4
‑
二甲氨基吡啶、二环己基碳二亚胺、N,N
‑
二异丙基碳二亚胺和1
‑
(3
‑
二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺中的至少一种。5.根据权利要求3所述的荧光探针的制备方...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭慧宇，夏旭伟，唐建林，朱盛沛，张雅南，
申请(专利权)人：中大检测湖南股份有限公司，
类型：发明
国别省市：