阿氏芽孢杆菌HZ18-3及其用途制造技术

本发明专利技术公开了一株阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18

【技术实现步骤摘要】
阿氏芽孢杆菌HZ18
‑
3及其用途


[0001]本专利技术属于生物工程


技术介绍

[0002]芽孢杆菌广泛存在于土壤环境中，具有较高的环境兼容性和重金属离子吸附性，且可以改善土壤理化性质，因此在重金属污染土壤修复领域的发展前景十分广阔。芽孢杆菌也是常见的植物根际促生菌(PGPR)，芽孢杆菌广泛存在于土壤环境中，具有较高的环境兼容性和重金属离子吸附性，且可以改善土壤理化性质，因此在重金属污染土壤修复领域的发展前景十分广阔。
[0003]阿耶波多氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai),简称阿氏芽孢杆菌,分布广泛,在动物肠道、植物根际、深海、高原均有发现,其应用主要有两方面,一是降解或合成某种大分子化合物等,二是与植物共生或者促进植物生长等。有研究发现，阿氏芽孢杆菌耐镉能力极强。它极易在环境中存活、定殖，且具备环境友好、安全无毒等特点，因此在农业生产上得到广泛应用，有效防控了黄瓜枯萎病、香蕉枯萎病、西瓜枯萎病等作物的土传病害。阿氏与合成农药相比，它们的优势包括混合活性分子、无毒性和在淡水和土壤中可繁殖性。因此，基于化肥农药的替代，可适用于马铃薯普通疮痂病的防治。

技术实现思路

[0004]本专利技术的第一目的是提供一株阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18
‑
3，其保藏编号为CGMCC NO.23635。
[0005]本专利技术所提供的阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18/>‑
3，已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.23635，保藏日期为：2021年10月20日，保藏单位简称为CGMCC，保藏单位地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
[0006]本专利技术的第二目的是提供阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18
‑
3在制备防治马铃薯疮痂病菌剂中的应用。
[0007]本专利技术提供的阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18
‑
3，培养简单、无生态毒性、耐盐碱、可利用的碳源种类丰富，能固定空气中的氮气，分解土壤中的难溶性磷，可产生纤维素酶、铁载体等，同时能够有效抑制马铃薯疮痂病病原菌的生长，在马铃薯疮痂病的生物防治和盐碱土地改良中具有非常广泛的应用前景。
附图说明：
[0008]图1是阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18
‑
3筛选结果图。
[0009]图2是阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18
‑
3抑菌结果图。
[0010]图3是阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18
‑
3耐盐结果图。
[0011]图4是阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18
‑
3pH敏感性测定结果图。
[0012]图5是阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18
‑
3解磷、解钾结果图。
[0013]图6是阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18
‑
3产铁载体、产纤维素酶的测定结果图。
[0014]图7是阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18
‑
3马铃薯疮痂病防治效果盆栽结果图。
[0015]图8是阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18
‑
3马铃薯疮痂病防治效果大田结果图。
具体实施方式：
[0016]如无特殊说明，下列实施例中待测菌株均指阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18
‑
3。
[0017]如无特殊说明，下列实施例中的活化均指阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18
‑
3在马铃薯固体培养基上扩大培养三次。
[0018]实施例1
[0019]菌种的分离与鉴定
[0020]1.培养基：
[0021]马铃薯葡萄糖琼脂(Potato Dextrose agar,PDA)培养基(g/L)：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15g，蒸馏水1000m L，pH自然。
[0022]2.菌株来源：
[0023]阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18
‑
3于2021年3月5日分离自广东惠州马铃薯土壤。取1g土样放入50ml离心管中，加入10ml无菌水震荡均匀，于37℃、200rpm的摇床上振荡30min，静置至澄清。在超净工作台中将制备好的土壤悬浮液进行梯度稀释，分别取100μL 10
‑3、10
‑4、10
‑5倍稀释液在LB固体培养基上进行涂布，重复3次，37℃培养24h。24h后在超净工作台中挑取形态不同的菌落分别划线纯化，37℃培养24h，重复纯化3次。将得到的纯的单菌落转移到试管斜面培养基中，放入4℃冰箱保存备用。
[0024]3.筛选结果：
[0025]分离得到如图1所示，菌株分类特性：菌落形态为圆形、乳白色、边缘整齐且透明度差。该菌株为革兰氏阳性菌,细胞形状为杆状,长宽比为3.8,可分解石蕊牛乳产酸,符合芽孢杆菌属菌株的生理生化特性，可利用蛋白质、多种糖及淀粉。将该菌株命名为HZ18
‑
3。
[0026]4.细菌菌株鉴定方法：
[0027]采用TIANGEN细菌基因组DNA提取试剂盒提取基因组DNA。以待测菌株基因组DNA为模板，利用细菌16S rRNA基因通用引物27F/1492R扩增目的片段，PCR产物经1％的琼脂糖凝胶电泳检测，将PCR原液送博迈德生物工程股份有限公司测序。16S rRNA基因序列分析，经过序列对比鉴定，菌株HZ18
‑
3以ZJJH
‑
2为标准菌株的阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18
‑
3，测序结果如SEQ ID NO.1所示序列。
[0028]实施例2
[0029]菌株生理生化分析
[0030]采用梅里埃API 20NE非发酵G+杆菌鉴定试剂盒试验菌株HZ18
‑
3生理生化指标。阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18
‑
3能利用柠檬酸盐，能利用半乳糖、甘露醇，不能
利用葡萄糖胺。甲基红实验、柠檬酸盐实验、H2S产生实验、脲酶实验、氧化酶实验、接触酶实验、淀粉水解、硝酸盐还原实验均呈阳性。V
‑
P实验、吲哚实验均呈阴性。详细结果如下表：
[0031]表1生理生化性质分析
[0032]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18
‑
3，其保藏编号为CGMCC NO.23635。2.依据权利要求1所述阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18
‑
3在制备抑制马铃薯疮痂病病原菌生长菌剂中的应用。3.依据权利要求1所述阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18
‑
3在制备微生物盐碱地改良剂中的应用。4.依据权利要求3所述阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18
‑
3在制备微生物盐碱地改良剂中的应用，其特征在于，所述盐碱地的盐质量浓度不高于12％。5.依据权利要求3所述阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)HZ18
‑
3在制备微生物盐碱地改良剂中的应用，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：仲乃琴，侯顺连，曹晶晶，赵盼，解永常，汪志琴，刘璐，赵永龙，
申请(专利权)人：山东施可丰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：