抗凝血因子XI抗体制造技术

本技术公开了结合凝血因子XI(FXI)和/或其活化形式因子XIa(FXIa)，或FXI和/或FXIa的片段的抗体，以及含有该抗体的组合物。还公开了制备抗体的方法，以及抗体用于制备治疗和/或预防凝血相关病症(例如血栓和与血栓相关的并发症或病症)药物的用途。并发症或病症)药物的用途。并发症或病症)药物的用途。

【技术实现步骤摘要】
抗凝血因子XI抗体
[0001]本申请是2018年8月9日提交的申请号为201880098606.X、专利技术名称为“抗凝血因子XI抗体”的中国国家阶段的专利技术专利申请的分案申请。


[0002]本专利技术涉及能够结合凝血因子XI(FXI)和/或其活化因子XIa(FXIa)以及FXI和/或FXIa 片段的抗体及其用途，包括作为制备可以治疗血栓却不影响止血功能的抗凝剂的用途。
[0003]背景
[0004]血栓是一种血液在血管中凝结后，阻塞或阻碍受影响区域中的血流通过的病症。如果血凝块沿着循环系统行进到身体关键部位，可导致严重的并发症，例如进行到心脏、脑和肺，就可能引起心脏病发作、中风和肺栓塞等疾病。血栓形成是大多数中风和心肌梗塞、深静脉血栓形成(DVT)、肺栓塞和其他心血管事件的主要原因。
1,2
血栓形成可以通过抗凝剂(例如低分子量肝素，华法林和Xa因子直接抑制剂)治疗或预防。这些目前可用的疗法中最常见的不良反应是止血功能受损。3‑5由于受试者治疗后需要受到密切监测，这些治疗方法受剂量和患者依从性的限制。
[0005]所以需寻求一种副作用最小的有效的预防或治疗血栓形成的药物。本专利技术满足了本领域的这一需求。

技术实现思路

[0006]本专利技术的某些实施方案提供了结合凝血因子XI(FXI)和/或其活化形式因子XIa (FXIa)，以及FXI和/或FXIa片段的抗体。在某些实施方案中，该抗体是单克隆抗体。在某些实施方案中，该抗体是重组抗体。在某些实施方案中，该抗体是人源化抗体。在某些实施方案中，该抗体是免疫球蛋白分子的免疫活性部分，例如Fab，Fvs或 scFv。在某些实施方案中，该抗体结合FXI和/或FXIa的A3结构域。在一些实施方案中，该抗体包括一个或多个CDR序列，这些CDR序列包含或由SEQ ID NOs:11
‑
16,27
‑ꢀ
32,43
‑
48,59
‑
64,75
‑
80,91
‑
96,107
‑
112,123
‑
128,139
‑
144,155
‑
160,171
‑
176以及187
‑
192组成。
[0007]本专利技术提供了用于治疗和/或预防血栓和/或与血栓形成相关的并发症或疾病的药物组合物。该药物组合物包含本专利技术公开的一种或多种抗FXI和/或抗FXIa抗体。在某些实施方案中，该药物组合物还包含一种或多种药学上可接受的佐剂、载体、赋形剂、防腐剂或其组合。
[0008]本专利技术提供了编码本专利技术公开的抗FXI和/或抗FXIa抗体，或任一抗体功能片段的核酸，以及包含所述核酸的载体，和包含所述载体的宿主细胞。在某些实施方案中，该载体是在宿主细胞中能产生由该核酸编码的抗体或其功能片段的表达载体。
[0009]本专利技术提供了一种试剂盒，其包含本说明书公开的一种或多种抗FXI和/或抗 FXIa抗体，用于治疗和/或预防血栓形成和/或与血栓形成相关的并发症或病症。可替代地，该试剂盒包含药物组合物，其包含本说明书公开的一种或多种抗FXI和/ 或抗FXIa抗体，用
于治疗和/或预防血栓和/或与血栓相关的并发症或病症。在某些实施方案中，试剂盒还包含使用说明书。
[0010]本专利技术提供了治疗和/或预防血栓形成和/或与血栓形成相关的并发症或病症的方法。所述方法包括向有需要的受试者施用有效剂量的本专利技术公开的一种或多种抗FXI和/或抗FXIa抗体。可替代地，所述方法包括向有需要的受试者施用有效剂量的含有抗FXI抗体，抗FXIa抗体或任一抗体的功能片段的药物组合物。
[0011]提供了如本说明书公开的抗FXI和/或抗FXIa抗体用于制备治疗和/或预防血栓和/或与血栓相关的并发症或病症的药物的用途。
[0012]本专利技术提供了制备如本说明书公开的抗FXI和/或抗FXIa抗体的方法。该方法采取的步骤包括使用编码抗体核苷酸的载体转染宿主细胞，在宿主细胞中表达抗体。该方法还可以包括从宿主细胞中纯化表达抗体。此外，可以对纯化的抗体进行修饰，修饰后的重组抗体保留相应的人抗体的活性。可替代地，本说明书公开的抗体可以从杂交瘤培养产生。
附图说明
[0013]图1A
‑
1E显示通过APTT检测方法测定五种抗FXI抗体在人血浆中的抗凝效果。如实施例3所述，5种不同的抗体以0至400nM分别加到人血浆中进行APTT检测。测试的五种抗体包括19F6(A)、34F8(B)、42A5(C)、1A6(D)和14E11 (E)。在本实验中，抗体1A6和14E11用作阳性对照。
[0014]图2A
‑
2C显示抗体19F6(A)、34F8(B)和42A5(C)在猴血浆中的APTT测定的抗凝效果。如实施例4所述，3种不同的抗体以0至400nM分别加到猴血浆中，进行 APTT检测。
[0015]图3A
‑
3F显示FXI与固相化的h
‑
19F6(A)、h
‑
34F8(B)和h
‑
42A5(C)结合的SPR传感图，以及FXIa与固相化的h
‑
19F6(D)、h
‑
34F8(E)和h
‑
42A5(F)结合的 SPR传感图。数据符合和1:1结合模型，在FXI(0.005
‑
1ng/mL)的测试浓度范围下进行曲线拟合。每条曲线代表FXI或FXIa的不同测试浓度。
[0016]图4A
‑
4C显示抗体h
‑
19F6(A)、h
‑
34F8(B)和h
‑
42A5(C)抑制人FXIa水解S
‑ꢀ
2366的浓度
‑
响应曲线。
[0017]图5A
‑
5B显示抗体h
‑
19F6(A)和h
‑
42A5(B)对FXIa介导的FIX活化为FIXa反应的抑制作用。将人FIX(200nM)与FXIa(5nM)以及1μM h
‑
19F6或h
‑
42A5置于含5mMCaCl2的PBS中，室温下温育。在指定的时间间隔收集样品，使用山羊抗人FIX IgG (Affinity Biologicals)通过蛋白质印迹法对样品中的FIX以及FIXa的蛋白量进行测定。图5C
‑
5D说明了抗体h
‑
19F6(C)和h
‑
42A5(D)对FXIIa介导的FXI向FXIa的活化的抑制作用。将人FXI(500nM)与FXIIa(50nM)在含有1μM h
‑
19F6或h
‑
42A5的溶液中孵育。通过蛋白质印迹方法检测不同时间点的FXI以及代表FXIa产生的FXIa轻链的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种分离的抗FXI或抗FXIa抗体，其特异性结合人FXI或FXIa，其中所述抗体包含选自SEQ ID NO：155
‑
160的CDR的组合，具有至少90％同一性的序列，或其免疫活性部分。2.根据权利要求1所述的抗体，其中所述的抗体特异性结合人FXI或FXIa的A3结构域。3.根据权利要求1所述的抗体，其中，所述抗体包含选自以下序列对的一对序列：SEQ ID NO：153
‑
154，SEQ ID NO：201
‑
202，和SEQ ID NO：204
‑
205，以及具有至少90％同一性的序列。4.一种药物组合物，其包含权利要求1
‑
3中任一项所述的抗体。5.权利要求1
‑
3中任一项的抗体在制备用于在受试者中抑制血凝块形成的药剂中的用途。6.权利要求4的药物组合物在制备用于在受试者中抑制血凝块形成的药剂中的用途。7.权利要求1
‑
3中任一项的抗体在制备用于治疗或预防血栓形成或与血栓形成有关的并发症...

【专利技术属性】
技术研发人员：王文义，于泉，刘小五，徐立忠，杜治强，
申请(专利权)人：上海仁会生物制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：