一种单细胞测序筛选脂肪细胞标记分子的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用单细胞测序筛选脂肪细胞标记分子的方法，包括以下步骤：(1)分离软骨组织；(2)分离单细胞并进行裂解；(3)对样品的mRNA进行逆转录得到cDNA；(4)以cDNA为模板进行PCR扩增，产物纯化，进行Tagmentation反应，完成cDNA测序文库构建；(5)对构建的cDNA文库进行高通量测序；(6)测序结果进行生物信息学分析，寻找脂肪细胞特异性的标记分子。寻找脂肪细胞特异性的标记分子。寻找脂肪细胞特异性的标记分子。

【技术实现步骤摘要】
一种单细胞测序筛选脂肪细胞标记分子的方法


[0001]本专利技术属于生物医学领域，尤其是涉及一种利用单细胞测序筛选脂肪细胞标记分子的方法。

技术介绍

[0002]骨关节炎是以关节软骨退化、软骨下骨硬化，骨赘形成并伴有关节疼痛、肿胀、畸形及活动障碍的慢性退行性关节病，且多发于膝、髓等负重关节叫。据统计全世界骨关节炎患病率约为15％，其中50岁以上老年人群的发病率达到50％，最终致残率高达53％。我国流行病调查研究发现我国40岁以上人群膝、手、颈、腰关节炎的总患病率则高达46.3％。关节功能的丧失及致残不仅严重影响老年人群的生活质量还加重家庭和社会的经济负担，有效预防该病已成为国内外重大的公共卫生问题。
[0003]脂肪细胞可以分泌出一种和关节炎相关的蛋白质，这项发现或许可以帮助开发新型的基因疗法来治疗疾病。膝盖中的脂肪细胞可以分泌一种名为前因子D的蛋白质，其可以产生一种名为因子D的蛋白质，而后者又与关节炎直接相关。因子D是补体系统的一部分，机体的补体系统中含有超过40种蛋白质，其可以帮助机体有效抵御细菌的感染。脂肪在所有的关节中发挥的作用本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种单细胞测序筛选脂肪细胞标记分子的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)提取软骨组织；2)分离单细胞并进行裂解：分离单细胞，加入裂解缓冲液中进行裂解，得到细胞裂解液；3)对样品的mRNA进行逆转录得到cDNA：使用美国ThermoFisher公司的SuperScript试剂盒构建逆转录体系，对上述步骤2)获得的细胞裂解液进行逆转录，得到cDNA；4)以cDNA为模板进行PCR扩增，构建测序文库，进行...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵海波，于腾波，戚超，张益，李海峰，张子安，周健，张东芳，王磊，彭海宁，林文蔚，
申请(专利权)人：青岛大学附属医院，
类型：发明
国别省市：