一种利用动物油脂湿法炼制副产物生产小分子水解动物蛋白肽的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用动物油脂湿法炼制副产物生产小分子水解动物蛋白肽的方法，包括以下步骤：酶法脱脂、蛋白酶解、浓缩、澄清、初分离、纯化、脱盐、干燥。本发明专利技术采用创新工艺将湿法炼制工艺水里的蛋白分离浓缩后通过特定酶工程技术进行水解，并通过创新的现代物理纯化工艺，制备小分子活性水解动物蛋白肽，不但有效改善蛋白副产物的营养特性，还大大增加了产品附加值，减少了环境压力。减少了环境压力。

【技术实现步骤摘要】
一种利用动物油脂湿法炼制副产物生产小分子水解动物蛋白肽的方法


[0001]本专利技术涉及动物油脂湿法炼制副产物精加工
，具体涉及一种利用动物油脂湿法炼制副产物生产小分子水解动物蛋白肽的方法。

技术介绍

[0002]蛋白质是生命的物质基础，是有机大分子，是构成细胞的基本有机物，是生命活动的主要承担者，也是人体三大营养物质。蛋白质含有的氨基酸之所以会有不同，与蛋白质的来源有很大的关系。蛋白质主要来源于动物性食物与植物性食物，动物性蛋白质和植物性蛋白质所含的氨基酸是不同的，这即意味着它们的营养价值也有差异。
[0003]动物性蛋白质构成以酪蛋白为主，能被人体较好地吸收与利用。更重要的是，动物性蛋白质的必需氨基酸种类齐全，比例合理，因此比一般的植物性蛋白质更容易消化、吸收和利用，营养价值也相对较高。现代营养学研究发现：人类摄食蛋白质经消化道的酶作用后，大多是以低肽形式消化吸收的，以游离氨基酸形式吸收的比例很小。水解动物蛋白肽是一种优质蛋白源，主要成分为低分子肽。含有全部人体必需的氨基酸；还含有人体必需的多种微量元素。它是良好的天然生理活性物质，水溶性好，营养价值高，不含胆固醇，极易被人体消化吸收。特别适合于消化能力较弱的幼儿、老年人和手术后回复期人群食用，有利于快速增强免疫力，提高人体健康。
[0004]研究表明，具有抗氧化等生物活性肽的分子量一般在1000D以下，这些小肽能被消化道直接吸收，但其分离和纯化非常困难，如何高效、窄谱带分离得到相关小分子肽一直是研究的热点。
[0005]动物油脂湿法炼制过程采用蒸汽加热炼制，副产物主要为含有大量蛋白的工艺水，这些蛋白通常简单分离后作为饲料，附加值很低，而相应废水也造成了不小环境压力。采用创新工艺将湿法炼制工艺水里的蛋白分离浓缩后通过特定酶工程技术进行水解，并通过创新的现代物理纯化工艺，制备小分子活性水解动物蛋白肽，不但有效改善蛋白副产物的营养特性，还大大增加了产品附加值，减少了环境压力。

技术实现思路

[0006]为了解决以上现有湿法炼制动物油脂副产物蛋白利用过程中存在的缺点和不足之处，本专利技术提供一种利用动物油脂湿法炼制副产物生产小分子水解动物蛋白肽的方法，本专利技术创造性以动物油脂湿法炼制副产物为原料，通过特定复合蛋白酶水解定向水解，然后采用独创的电场耦合分子筛纯化工艺，制备窄谱带低分子量水解动物蛋白肽。
[0007]本专利技术是通过以下技术方案实现的：一种利用动物油脂湿法炼制副产物生产小分子水解动物蛋白肽的方法，包括以下步骤：（1）酶法脱脂：调节动物油脂湿法炼制产生的副产物，即含有大量蛋白的工艺水的
pH为7.5
‑
8.5，加入10U/mL脂肪酶G20，酶解温度控制在30℃，进行搅拌反应，水解液煮沸10min灭酶，将反应液冷却到50℃，加入0.5%
‑
1%（w/v）小苏打，搅拌30min，离心脱水，得到蛋白；将蛋白用去离子水清洗2次，离心脱水；（2）蛋白酶解：调节pH为8，加入复合水解酶，酶解温度控制在50℃，酶解完成后煮沸10min灭酶；（3）浓缩：将酶解液通过多效真空浓缩器进行浓缩；（4）澄清：将酶解液经5000r/min离心10min，除去大分子蛋白和其他不溶物，得到澄清透明的水解液；（5）初分离：将澄清水解液装入截留分子量5000的滤膜离心管，采用超滤离心机40000r/min，离心20min，收集包含小分子肽的滤液；（6）纯化：利用纯化柱将步骤（5）小分子肽的滤液进行纯化，将纯化系统置于磁感应电场中；采用含200mmol/L NaCl和20mmol/L磷酸盐的pH为7.0的缓冲液将步骤（5）小分子肽的滤液上样纯化柱，然后用缓冲液洗脱，缓冲液流速10mL/min，分布收集滤液得到窄分子量分布的小肽；（7）脱盐：通过离子交换脱盐；（8）干燥：喷雾干燥得到产品。
[0008]优选的，所述步骤1中搅拌反应的时间为2
‑
3h,小苏打的质量浓度为0.5%
‑
1%。
[0009]优选地，所述步骤2中的复合水解酶由胃蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶按4:2:1组成，复合酶用量3000
‑
6000U/g，酶解时间控制在2
‑
4h。
[0010]优选的，所述步骤3中的真空度60
‑
80kPa；得到的浓缩酶解液水分含量40%
‑
50%。
[0011]优选的，所述步骤6中的纯化柱填充有分离分子量500
‑
5000的凝胶分子筛，所述磁感应电场的电场电压控制在100
‑
200V/cm。
[0012]优选的，所述动物油脂选自猪脂、羊脂、牛脂和鸡脂。
[0013]本专利技术的有益效果体现在：湿法炼制动物油脂过程中产生大量含动物蛋白的工艺废水，这些蛋白质是优质的动物蛋白，必需氨基酸种类齐全，比例合理，营养价值相对较高。本技术创造性以动物油脂湿法炼制副产物工艺水为原料，经脱脂和特定复合蛋白酶水解，再经过分离和独创的电场耦合分子筛纯化工艺，制备窄谱带低分子量水解动物蛋白肽。采用本工艺制备的动物蛋白肽附加值高，这些低分子量动物蛋白肽食用后能直接被小肠吸收，适合于消化能力较弱的幼儿、老年人和手术后回复期人群食用，有利于快速增强免疫力，提高人体健康。
具体实施方式
[0014]下面结合具体实施例对本专利技术作进一步详述。
[0015]实施例1：猪脂湿法炼制副产物生产小分子水解动物蛋白肽（1） 酶法脱脂：调节猪脂湿法炼制产生的副产物（含有大量蛋白的工艺水）pH为7.5，加入10U/mL脂肪酶G20，酶解温度控制在30℃，搅拌反应2h，水解液煮沸10min灭酶，将反应液冷却到50℃，加入0.5%（w/v）小苏打，搅拌30min，离心脱水，得到蛋白。将蛋白用去离子水清洗2次，离心脱水。
[0016]（2） 蛋白酶解：调节pH为8.0，加入由胃蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶按4:2:1组
成的复合水解酶，复合酶用量5000U/g，酶解温度控制在50℃，酶解时间3h。酶解完成后煮沸10min灭酶。
[0017]（3）浓缩：将酶解液通过多效真空浓缩器进行浓缩，真空度70kPa。浓缩酶解液水分含量50%。
[0018]（4）澄清：将酶解液经5000r/min离心10min，除去大分子蛋白和其他不溶物，得到澄清透明的水解液。
[0019]（5）初分离：将澄清水解液装入截留分子量5000的滤膜离心管，采用超滤离心机40000r/min离心20min，收集包含小分子肽的滤液。
[0020]（6）纯化：纯化柱填充分离分子量500
‑
2000的凝胶分子筛，将纯化系统置于磁感应电场中，电场电压控制在100V/cm。采用含200mmol/LNaCl和20mmol/LPB的7.0pH缓冲液将步骤（5）小分子肽的滤液上样纯化柱，然后用缓冲液洗脱，缓冲液流速10mL/min，分布收集滤液得到窄分子量分布的小肽。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用动物油脂湿法炼制副产物生产小分子水解动物蛋白肽的方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）酶法脱脂：调节动物油脂湿法炼制产生的副产物，即含有大量蛋白的工艺水的pH为7.5
‑
8.5，加入10U/mL脂肪酶G20，酶解温度控制在30℃，进行搅拌反应，水解液煮沸10min灭酶，将反应液冷却到50℃，加入0.5%
‑
1%（w/v）小苏打，搅拌30min，离心脱水，得到蛋白；将蛋白用去离子水清洗2次，离心脱水；（2）蛋白酶解：调节pH为8，加入复合水解酶，酶解温度控制在50℃，酶解完成后煮沸10min灭酶；（3）浓缩：将酶解液通过多效真空浓缩器进行浓缩；（4）澄清：将酶解液经5000r/min离心10min，除去大分子蛋白和其他不溶物，得到澄清透明的水解液；（5）初分离：将澄清水解液装入截留分子量5000的滤膜离心管，采用超滤离心机40000r/min，离心20min，收集包含小分子肽的滤液；（6）纯化：利用纯化柱将步骤（5）小分子肽的滤液进行纯化，将纯化系统置于磁感应电场中；采用含200mmol/L NaCl和20mmol/L磷酸盐的pH为7.0的缓冲液将步骤（5）小分子肽的滤液上样纯化柱，然后用缓冲液洗脱，缓冲液流速10mL/min，分布收集滤液得到窄分子量分布的小肽；（7）脱盐：通过离子交换脱盐；（8）干...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁超，李英，
申请(专利权)人：山东智鼎食品科技有限公司，
类型：发明
国别省市：