一株产γ-氨基丁酸的发酵乳杆菌E15及其在制备改善睡眠的药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一株产γ

【技术实现步骤摘要】
一株产
γ
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氨基丁酸的发酵乳杆菌E15及其在制备改善睡眠的药物中的应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，更具体的说是涉及一株产γ
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氨基丁酸的发酵乳杆菌E15及其在制备改善睡眠的药物中的应用。

技术介绍

[0002]失眠对人类的生活质量、情绪、认知功能和健康产生负面影响，引起了越来越多的关注。全世界大约10
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15％的人患有失眠症，大约25
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35％有短暂或偶尔的失眠症。这些病例归因于生活压力的增加和各种疾病的影响。失眠会导致免疫力下降、认知障碍、抑郁症和心血管疾病风险增加。非苯二氮卓类药物被广泛用于缓解失眠。然而，这些药物有多种副作用，长期使用会产生耐受性和依赖性。因此，需要一种更安全、更有效的方法来缓解失眠。
[0003]γ
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氨基丁酸(GABA)是一种抑制性神经递质，在人体中起着重要的生理作用，包括降低神经元活动、调节心率、增强记忆力和调节激素分泌。最近的一项研究表明，从发酵米胚芽中提取的GABA可以使咖啡因引起的小鼠睡眠障碍正常化。在一项随机双盲实验中，观察到含有GABA的发酵米胚芽提取物可减少失眠患者的睡眠潜伏期并提高睡眠效率。许多研究人员已经研究了微生物群及其代谢物在健康和疾病中的作用。肠道微生物群影响许多重要的宿主功能，并与多种神经精神疾病有关，包括焦虑、抑郁、自闭症谱系障碍和情绪障碍。乳酸杆菌通常被认为是安全的，被用于食品、医药和动物饲料领域。
[0004]GABA的提取、分离和纯化工艺复杂、成本高且提取得率低。而目前益生菌在缓解焦虑、改善睡眠中的研究和应用较少。同时，当前国际益生菌专利申请集中于美、日、俄传统研发强国，而我国缺乏拥有自主知识产权的功能性菌株。国内生产企业所用益生菌菌种长期依赖进口，而且国外菌株未必适合我国居民胃肠道生理状况。另外，益生菌的功能缺乏有力的科学研究证据，严重影响了益生菌及其制品的推广。基于此，针对菌种资源的功能深入挖掘，筛选出拥有自主知识产权、具有特定功能性质、适合中国人群生理特性的新型益生菌菌株，对提高我国益生菌生产企业的核心竞争力，促进我国益生菌制品发展尤为重要。
[0005]因此，提供一株产γ
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氨基丁酸的发酵乳杆菌E15及其在制备改善睡眠的药物中的应用是本领域技术人员亟需解决的问题。

技术实现思路

[0006]有鉴于此，本专利技术提供了一株产γ
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氨基丁酸的发酵乳杆菌E15及其在制备改善睡眠的药物中的应用。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0008]一株发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)E15，其保藏编号为CGMCC No.21772，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏日期为2021年01月29日，分类命名为发酵乳杆菌Lactobacillus fermentum。
[0009]进一步，所述的一株发酵乳杆菌E15在产γ
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氨基丁酸中的应用。
[0010]进一步，所述的一株发酵乳杆菌E15在制备缓解焦虑、改善睡眠的药物中的应用。
[0011]所述一株产γ
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氨基丁酸的发酵乳杆菌E15在PTZ诱导斑马鱼失眠模型中，可显著降低斑马鱼的运动距离、狂躁时间、活跃时间，显著增加静止时间，表现出良好的缓解焦虑、改善睡眠的益生功效。
[0012]进一步，所述的一株发酵乳杆菌E15在制备发酵乳制品及其他发酵食品中的应用。
[0013]进一步，所述发酵乳杆菌E15为菌悬液或发酵上清液。
[0014]本专利技术所述在体内失眠模型中能显著降低斑马鱼运动距离、狂躁时间、活跃时间，显著增加静止时间的菌株E15，包括菌株E15的发酵上清液(胞外分泌物)、菌悬液(菌体)。
[0015]经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本专利技术公开提供了一株产γ
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氨基丁酸的发酵乳杆菌E15及其在制备改善睡眠的药物中的应用，发酵乳杆菌E15是从广东省梅州市蕉岭县的长寿老人粪便中分离筛选得到的，在斑马鱼失眠模型中能显著降低斑马鱼运动距离、狂躁时间、活跃时间，显著增加静止时间；具备应用于体内缓解焦虑、改善睡眠的潜能，此为利用发酵乳杆菌E15开发缓解焦虑、改善睡眠的益生菌制剂提供理论参考和指导依据。
附图说明
[0016]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
[0017]图1附图为本专利技术发酵乳杆菌E15在MRS琼脂平板上的菌落形态；
[0018]图2附图为本专利技术发酵乳杆菌E15革兰氏染色后的显微形态观察；
[0019]图3附图为本专利技术发酵乳杆菌E15发酵液高效液相色谱图；
[0020]其中，A：GABA标准品谱图；B：发酵乳杆菌E15发酵液谱图；
[0021]图4附图为本专利技术发酵乳杆菌E15的发酵上清液、菌悬液对PTZ诱导斑马鱼失眠模型的运动轨迹的影响；
[0022]图5附图为本专利技术发酵乳杆菌E15的发酵上清液、菌悬液对PTZ诱导斑马鱼失眠模型的运动距离的影响；
[0023]图6附图为本专利技术发酵乳杆菌E15的发酵上清液、菌悬液对PTZ诱导斑马鱼失眠模型的狂躁时间的影响；
[0024]图7附图为本专利技术发酵乳杆菌E15的发酵上清液、菌悬液对PTZ诱导斑马鱼失眠模型的活跃时间的影响；
[0025]图8附图为本专利技术发酵乳杆菌E15的发酵上清液、菌悬液对PTZ诱导斑马鱼失眠模型的静止时间的影响。
具体实施方式
[0026]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于
本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0027]实施例1发酵乳杆菌E15分离、鉴定及保藏
[0028](1)分离：将长寿老人粪便经梯度稀释后，分别接种于BS固体培养基、MRS固体培养基、PYG固体培养基、BHI固体培养基中，37℃厌氧培养48h，挑取平板上的单菌落划线分离得到纯菌落。将平板上的纯菌落接种于MRS液体培养基中，37℃厌氧培养12～16h，加入20％甘油，置于
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80℃冰箱中保存。
[0029](2)菌株形态学鉴定：对筛选出的菌株革兰氏染色后于显微镜下观察，革兰氏阳性菌呈紫色，革兰氏阴性菌呈红色。
[0030](3)菌株的分子生物学鉴定：对所获得的菌株提取基因组DNA，通过PCR技术利用16本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)E15，其特征在于，其保藏编号为CGMCC No.21772。2.权利要求1所述的一株发酵乳杆菌E15在产γ
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氨基丁酸中的应用。3.权利要求1所述的一株发酵乳杆菌E15在制备缓解焦虑、改善睡眠的药物中的应用。4.根据权利要求3所述的一株发酵...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑康帝，张召，刘彦，陈涛，
申请(专利权)人：佛山市朗芯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：