一种治疗阿霉素诱导的心脏毒性损伤的药物及应用制造技术

本发明专利技术提供了一种治疗阿霉素诱导的心脏毒性损伤的药物及应用，涉及生物医药技术领域。本发明专利技术提供了干扰心肌组织中环状RNAcirc

【技术实现步骤摘要】
一种治疗阿霉素诱导的心脏毒性损伤的药物及应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种治疗阿霉素诱导的心脏毒性损伤的药物及应用。

技术介绍

[0002]蒽环类抗肿瘤药物，如阿霉素、柔红霉素、表柔比星等，广泛应用于多种血液系统肿瘤以及实体瘤的治疗中，在目前多种肿瘤治疗指南中有着不可取代的地位，然而蒽环类药物也有着无法避免的严重不良反应，其所导致的心脏毒性损伤对患者的远期预后有着严重的影响。多数患者在蒽环类药物给药后可以较快的发生心肌损伤，并且随着事件的延长而愈加明显。有超过50％的患者在给药数年后可能发生左心室功能的亚临床超声检查变化，包括收缩功能下降、后负荷增加。蒽环类药物对于心肌的毒性损伤主要机制尚未完全明确，已知的途径包括通过酶和非酶介导的途径产生氧自由基诱导心肌细胞凋亡、通过抑制拓扑异构酶IIβ导致DNA双键断裂导致心肌细胞死亡。目前临床上针对蒽环类抗肿瘤药物产生的心脏损伤多采用右雷佐生治疗，其可以竞争性结合拓扑异构酶IIβ从而达到保护心肌细胞免受损伤的效果。然而右雷佐生也有一定程度的副作用，包括贫血、血小板减少等。有文献报道在儿科肿瘤的治疗中，应用右雷佐生可能会显著增加第二种恶性肿瘤的四年累积发生率。因此，需要找到一种靶向性强且保护功能明确的基因，并进行针对性地干预，才能够有效地实现蒽环类抗肿瘤药物的心脏毒性治疗。

技术实现思路

[0003]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种治疗阿霉素诱导的心脏毒性损伤的药物及应用，利用AAV9病毒将能够干预环状RNA circ
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ZNF609表达的shRNA递送至心肌中以降低心肌中circ
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ZNF609的表达，从而对阿霉素诱导的心脏毒性损伤产生治疗作用。
[0004]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0005]本专利技术提供了干扰心肌组织中环状RNAcirc
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ZNF609表达的试剂在制备预防和/或治疗阿霉素诱导的心脏毒性损伤的药物中的应用。
[0006]优选的，所述试剂包括circ
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ZNF609 shRNA，所述circ
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ZNF609 shRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0007]优选的，所述circ
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ZNF609 shRNA的扩增引物包括上游引物F和下游引物R，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述下游引物R的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
[0008]优选的，所述试剂包括AAV病毒包装的circ
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ZNF609 shRNA，所述circ
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ZNF609 shRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0009]优选的，所述AAV病毒包括AAV9病毒。
[0010]本专利技术还提供了一种AAV9病毒包装的circ
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ZNF609 shRNA，所述circ
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ZNF609 shRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0011]优选的，所述AAV9病毒包装的circ
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ZNF609 shRNA的工作液的病毒滴度为2
×
10
13
vg/mL。
[0012]本专利技术还提供了一种治疗阿霉素诱导的心脏毒性损伤的药物，所述药物的有效成分包括AAV9病毒包装的circ
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ZNF609 shRNA和药学上可接受的辅料。
[0013]优选的，所述药物的剂型包括静脉注射液。
[0014]有益效果：本专利技术提供了干扰心肌组织中环状RNA circ
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ZNF609表达的试剂在制备预防和/或治疗阿霉素诱导的心脏毒性损伤的药物中的应用。本专利技术实施例中，将AAV9病毒包装的circ
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ZNF609 shRNA通过静脉注射的方式作用于小鼠个体，结果发现，在所述注射后，能够改善阿霉素诱导的心肌细胞凋亡并部分恢复心脏功能，实现阿霉素造成心脏毒性损伤的治疗目的。
附图说明
[0015]图1为circ
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ZNF609的shRNA效率筛选结果图，shRNA2链效果最好，并被命名为circ
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ZNF609 shRNA；
[0016]图2为circ
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ZNF609 shRNA结构图，图中Junction Site表示成环位点；
[0017]图3为荧光定量PCR检测静脉注射AAV9包装的circ
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ZNF609 shRNA后心肌组织中circ
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ZNF609的表达明显下降；红色：尾静脉注射AAV9包装的空载病毒同时腹腔注射生理盐水组；蓝色：尾静脉注射AAV9包装的circ
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ZNF609 shRNA同时腹腔注射生理盐水组；绿色：尾静脉注射AAV9包装的空载病毒同时腹腔注射阿霉素组；紫色：尾静脉注射AAV9包装的circ
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ZNF609 shRNA同时腹腔注射阿霉素组；尾静脉注射AAV9包装的circ
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ZNF609 shRNA能够显著降低心脏组织中circ
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ZNF609的表达；
[0018]图4为超声心动图检测静脉注射AAV9包装的circ
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ZNF609 shRNA改善阿霉素诱导的心脏收缩功能不全；红色：尾静脉注射AAV9包装的空载病毒同时腹腔注射生理盐水组；蓝色：尾静脉注射AAV9包装的circ
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ZNF609 shRNA同时腹腔注射生理盐水组；绿色：尾静脉注射AAV9包装的空载病毒同时腹腔注射阿霉素组；紫色：尾静脉注射AAV9包装的circ
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ZNF609 shRNA同时腹腔注射阿霉素组；尾静脉注射AAV9包装的circ
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ZNF609 shRNA能够显著改善阿霉素诱导的心脏射血分数的下降；图中Ejection fraction，射血分数；Fractional shortening，短轴缩短率；
[0019]图5为Tunel染色检测静脉注射AAV9包装的circ
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ZNF609 shRNA改善了阿霉素诱导的心肌细胞凋亡；蓝色：尾静脉注射AAV9包装的circ
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ZNF609 shRNA同时腹腔注射生理盐水组；绿色：尾静脉注射AAV9包装的空载病毒同时腹腔注射阿霉素组；紫色：尾静脉注射AAV9包装的circ
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ZNF609 shRNA同时腹腔注射阿霉素组；腹腔注射阿霉素的小鼠心肌细胞中凋亡细胞，即Tunel阳性的细胞，明显增加，尾静脉注射AAV9包装的circ
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ZNF609 shRNA能够显著降低凋亡心肌细胞的数量。
具体实施方式
[0020]本专利技术提供了干扰心肌组织中环状RNA circ
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.干扰心肌组织中环状RNA circ
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ZNF609表达的试剂在制备预防和/或治疗阿霉素诱导的心脏毒性损伤的药物中的应用。2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述试剂包括circ
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ZNF609shRNA，所述circ
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ZNF609 shRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。3.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述circ
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ZNF609 shRNA的扩增引物包括上游引物F和下游引物R，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述下游引物R的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。4.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述试剂包括AAV病毒包装的circ
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ZNF609 shRNA，所述circ
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ZNF609 shRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖俊杰，王丽君，申可婷，朱利云，齐蔚僮，
申请(专利权)人：上海大学，
类型：发明
国别省市：