点蜂缘蝽突触融合蛋白结合蛋白RpSDP及其应用制造技术

本发明专利技术提供点蜂缘蝽突触融合蛋白结合蛋白的应用，属于基因工程领域。根据本发明专利技术提供的RpSDP基因的dsRNA制剂，将其导入点蜂缘蝽体内，可有效地杀灭点蜂缘蝽，避免其为害农作物。本发明专利技术特异地针对点蜂缘蝽，对哺乳动物、鱼虾类、天敌昆虫和授粉昆虫无害，具有见效快、致死率高、环境友好等优势。环境友好等优势。环境友好等优势。

【技术实现步骤摘要】
点蜂缘蝽突触融合蛋白结合蛋白RpSDP及其应用


[0001]本专利技术涉及基因工程领域，涉及一种点蜂缘蝽突触融合蛋白结合蛋白RpSDP的dsRNA合成、dsRNA导入点蜂缘蝽体内以及该基因在防治点蜂缘蝽相关病虫害中的应用。

技术介绍

[0002]点蜂缘蝽(Riptortus pedestris)是大豆田间常见的刺吸式害虫，主要通过其刺吸式口器持续刺吸植株和种子汁液来获取养分。点蜂缘蝽的持续取食会导致大豆植株的发育不良甚至死亡，且受到侵害的大豆种子也往往无法正常发育，最终导致大豆的减产。目前点蜂缘蝽的防控以化学农药为主，而传统农药的大面积使用不仅造成严重的环境问题，还使得点蜂缘蝽产生了抗药性，不利于农业的可持续发展。因此，开发新的点蜂缘蝽防治技术是解决当前化学农药滥用的良好途径。
[0003]RNA干扰技术是近年来生命科学研究的热点。它通过小分子双链RNA特异性地降解或抑制靶标基因mRNA表达，进而抑制或关闭特定基因。RNA干扰技术具有高特异性、高效率、便于操作等优点。目前，该技术已广泛应用于多种农业害虫的防控，即通过向昆虫体内导入特异的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种点蜂缘蝽突触融合蛋白结合蛋白RpSDP基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示或与SEQ ID NO:1具有至少75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％序列同一性的核苷酸或由其组成。2.一种点蜂缘蝽突触融合蛋白结合蛋白RpSDP基因,其序列为SEQ ID NO.1所编码的氨基酸或与SEQ ID NO:1编码的氨基酸具有至少75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％序列同一性的氨基酸或由其组成。3.一种RpSDP基因的克隆方法，步骤包括：(1)取点蜂缘蝽若虫，Trizol法提取总RNA，并利用点蜂缘蝽总RNA为模板合成cDNA第一条链；(2)以点蜂缘蝽cDNA为模板，以序列如SEQ ID NO.2所示的上游引物和序列如SEQ ID NO.3所示的下游引物进行PCR扩增，得到含有的基因片段序列如SEQ ID NO:4所示的PCR扩增产物；(3)将上述扩增获得的基因片段连接克隆载体，转化到大肠杆菌TG1，在含有氨苄青霉素的LB固体培养基上培养，获得含有目的基因的单克隆菌落；(4)将单克隆菌落在含有氨苄青霉素的LB液体培养内扩大培养，抽提含有目的基因的质粒；(5)以质粒为模板，以序列如SEQ ID NO.5所示的上游引物和以序列如SEQ ID NO.6所示的下游引物进行PCR扩增，获得大量的、单一的含有T7启动子的基因片段。4.一种RpSDP基因的dsRNA合成方法，具体步骤包...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙宗涛，黄海剑，魏中艳，李俊敏，张传溪，陈剑平，
申请(专利权)人：宁波大学，
类型：发明
国别省市：