一种前列腺癌miRNA检测试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，具体涉及一种前列腺癌miRNA检测试剂盒及其应用。本发明专利技术公开了联合检测miRNA

【技术实现步骤摘要】
一种前列腺癌miRNA检测试剂盒及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药领域
更具体地属于分子生物学
，涉及一种前列腺癌miRNA检测试剂盒及其应用。

技术介绍

[0002]前列腺癌是指发生在前列腺的上皮性恶性肿瘤。2004年WHO《泌尿系统及男性生殖器官肿瘤病理学和遗传学》中前列腺癌病理类型上包括腺癌(腺泡腺癌)、导管腺癌、尿路上皮癌、鳞状细胞癌、腺鳞癌。其中前列腺腺癌占95％以上，因此，通常我们所说的前列腺癌就是指前列腺腺癌。2012年我国肿瘤登记地区前列腺癌发病率为9.92/10万，列男性恶性肿瘤发病率的第6位。发病年龄在55岁前处于较低水平，55岁后逐渐升高，发病率随着年龄的增长而增长，高峰年龄是70～80岁。家族遗传型前列腺癌患者发病年龄稍早，年龄≤55岁的患者占43％。
[0003]目前，临床诊断前列腺癌主要依靠直肠指诊、血清PSA、经直肠前列腺超声和盆腔MRI检查，CT对诊断早期前列腺癌的敏感性低于MRI。因前列腺癌骨转移率较高，在决定治疗方案前通常还要进行核素骨扫描检查。确诊前列腺癌需要通过前列腺穿刺活检进行病理检查。前列腺癌的恶性程度可通过组织学分级进行评估，最常用的是Gleason评分系统，依据前列腺癌组织中主要结构区和次要结构区的评分之和将前列腺癌的恶性程度划分为2～10分，分化最好的是1+1＝2分，最差的是5+5＝10分。但是，这些检测存在较大的局限性(CN 110317870 B)，其中，(1)直肠指检的局限性是：直肠指检漏诊率很高，且查出时大部分已属中晚期，不易临床治疗；(2)血清前列腺特异性抗原(PSA)直肠指检的局限性是：检测PSA检测特异性差，前列腺炎症、前列腺肥大等均可能导致PSA增高，并且PSA增高同样大部分发生在癌症的中晚期，不易临床治疗。(3)直肠超声波检测的局限性是：超声波检测对一些良性肿块误诊率较高，不能显示肿瘤内部结构及周围组织导致诊断符合率低；(4)组织活检的局限性是：组织活检是目前前列腺癌诊断的金标准，但由于其创伤性和复杂性，因此无法频繁使用。
[0004]进入21世纪后，随着现代生物技术突风猛进的发展，尤其是基因测序技术和基因组分析技术的成熟，科学家们发现大部分基因被转录为非编码RNA(non
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coding RNA，ncRNAs)。非编码RNA根据RNA编码长度的不同分为两种，一种为长度小于200个核苷酸的RNA，主要有微小RNA(miRNAs)，小干扰RNA(siRNAs)等，其中，miRNAs是一种小的(约22个核苷酸)非编码RNA，在细胞增殖、分化、凋亡和癌变等多种生物学和病理过程中起着重要作用；miRNAs参与了肿瘤发展的各个阶段，表明miRNA的异常表达在肿瘤发展过程中对已知癌基因或抑癌基因的表达起着重要的调节作用。

技术实现思路

[0005]本专利技术要解决的技术问题一是筛选合适可用于前列腺癌诊断或治疗的miRNA标志物；二是在此基础上，开发一种用于检测前列腺癌的试剂盒。
[0006]因此，本专利技术的目的是提供一种前列腺癌的检测试剂盒。本专利技术另一目的是提供前列腺癌分子标志物在筛选治疗前列腺癌的候选药物中的应用。
[0007]本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现：
[0008]一方面，本专利技术提供了一种诊断前列腺癌的miRNA标志物，所述标志物为miRNA
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4786、miRNA
‑
2053、miRNA
‑
619的组合物。
[0009]另一方面，本专利技术还提供了一种前列腺癌的检测试剂盒，所述试剂盒包括检测miRNA
‑
4786、miRNA
‑
2053、miRNA
‑
619表达水平的试剂。
[0010]优选地，本专利技术所述的试剂包括特异性扩增miRNA
‑
4786、miRNA
‑
2053、miRNA
‑
619的引物。
[0011]优选地，本专利技术所述的特异性扩增miRNA
‑
4786、miRNA
‑
2053、miRNA
‑
619的引物包括反转录引物和检测引物。
[0012]优选地，本专利技术所述的miRNA
‑
4786、miRNA
‑
2053、miRNA
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619的反转录引物分别为：
[0013]miRNA
‑
4786反转录引物：5
’‑
ctcaactggtgtcgtggagtcggcaattcagttgaggcccagac
‑3’
；
[0014]miRNA
‑
2053反转录引物：5
’‑
ctcaactggtgtcgtggagtcggcaattcagttgaggtaaatag
‑3’
；
[0015]miRNA
‑
619反转录引物：5
’‑
ctcaactggtgtcgtggagtcggcaattcagttgagggctcatg
‑3’
。
[0016]优选地，本专利技术所述的miRNA
‑
4786、miRNA
‑
2053、miRNA
‑
619检测引物分别为：
[0017]miRNA
‑
4786
‑
F：5
’‑
gccgagtgaagccagctctg
‑3’
；
[0018]miRNA
‑
4786
‑
R：5
’‑
ctcaactggtgtcgtggagggcatggcc
‑3’
；
[0019]miRNA
‑
2053
‑
F：5
’‑
tcggcagggtgttaattaaacct
‑3’
；
[0020]miRNA
‑
2053
‑
R：5
’‑
ctcaactggtgtcgtggacttgccatg
‑3’
；
[0021]miRNA
‑
619
‑
F：5
’‑
gccgaggctgggattacagg
‑3’
；
[0022]miRNA
‑
619
‑
R：5
’‑
ctcaactggtgtcgtggacgcccacctc
‑3’
。
[0023]再一方面，本专利技术还提供了一种所述的miRNA
‑
4786、miRNA
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2053、miRNA
‑
619基因的用途，其特征在于，用于制备治疗本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种诊断前列腺癌的miRNA标志物，其特征在于，所述标志物为miRNA
‑
4786、miRNA
‑
2053、miRNA
‑
619的组合物。2.一种前列腺癌的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括检测miRNA
‑
4786、miRNA
‑
2053、miRNA
‑
619表达水平的试剂。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂包括特异性扩增miRNA
‑
4786、miRNA
‑
2053、miRNA
‑
619的引物。4.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述的特异性扩增miRNA
‑
4786、miRNA
‑
2053、miRNA
‑
619的引物包括反转录引物和检测引物。5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述的miRNA
‑
4786、miRNA
‑
2053、miRNA
‑
619的反转录引物分别为：miRNA
‑
4786反转录引物：5
’‑
ctcaactggtgtcgtggagtcggcaattcagttgaggcccagac
‑3’
；miRNA
‑
2053反转录引物：5
’‑
ctcaactggtgtcgtggagtcggcaattcagttgaggtaaatag
‑3’
；miRNA
‑
619反转录引物：5
’‑
ctcaactggtgtcgtggagtcggcaattcagttgagggctcatg
‑3’
。6.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述的miRNA
‑
4786、miRNA
‑
2053、miRNA
‑
619检测引物分别为：miRNA
‑
4786
‑
F：5
’‑
gccgagtgaagccagctctg
‑3’
；miRNA
‑
4786
‑
R：5
’‑
ctcaactggtgtcgtggagggc...

【专利技术属性】
技术研发人员：王伟伟，周顺，
申请(专利权)人：王伟伟，
类型：发明
国别省市：