一种新的PD-1单克隆抗体制造技术

技术编号:33401667 阅读:12 留言:0更新日期:2022-05-11 23:23
本发明专利技术提供了PD

【技术实现步骤摘要】
一种新的PD

1单克隆抗体


[0001]本专利技术主要涉及PD

1单克隆抗体及其组合物,以及使用抗PD

1抗体对人类疾病的免疫治疗。

技术介绍

[0002]越来越多的临床前和临床结果的证据表明,靶向免疫检查点正在成为最有希望治疗癌症患者的方法。程序性细胞死亡分子1(PD

1)其为与CD28具有同源性的免疫球蛋白超家族的抑制性成员,在活化的B细胞、T细胞和骨髓细胞中表达(Agata et al,supra;Okazaki et al(2002)Curr.Opin.Immunol.14:391779

82;Bennett et al.(2003)J Immunol 170:711

8)并在调节免疫系统中的激活和抑制信号中发挥重要作用(Okazaki,Taku et al.2007International Immunology 19:813

824)。事实上,PD

1是在凋亡细胞的差异表达筛选中被发现的(Ishida et al(1992)EMBO J 11:3887

95)。
[0003]PD

1的结构为单体I型跨膜蛋白,属于Ig基因超家族(Agata et al.(1996)bit Immunol 8:765

72),其由一个免疫球蛋白可变区样细胞外结构域和含有免疫受体酪氨酸抑制基序(ITIM)和免疫受体酪氨酸转换基序(ITSM)的细胞质结构域组成。尽管与CTLA

4的结构相似,但PD

1缺少与B7

1和B7

2结合的MYPPPY基序。PD

1有两个已知的配体,PD

L1(B7

H1、CD274)和PD

L2(B7

DC、CD273),这两个配体是表达在细胞表面的B7家族成员(Freeman et al(2000)J Exp Med 192:1027

34;Latchman et al(2001)Nat Immunol 2:261

8;Carter et al(2002)Eur J Immunol 32:634

43)。与B7同源的PD

Ll和PD

L2结合于PD

1,但却不结合其他的CD28家族成员。
[0004]PD

1,作为免疫检查点蛋白之一,是CD28具有同源性的免疫球蛋白超家族的抑制性成员,在活化的B细胞、T细胞和骨髓细胞中表达(Agata et al,supra;Okazaki et al.(2002)Curr Opin Immunol 14:391779

82;Bennett et al.(2003)J Immunol 170:711

8),并且在限制T细胞激活中发挥重要作用,这为肿瘤细胞逃脱免疫监视提供了重要的免疫抗病机制。PD

1的诱导T细胞无反应性或无反应的状态,从而导致在细胞内暂时无法产生最佳水平的效应细胞因子。PD

1也可以通过其抑制生存信号的能力诱导T细胞的细胞凋亡。PD

1缺陷动物形成各种自身免疫表型,包括自身免疫性心肌病和关节炎和肾炎狼疮样综合症(Nishimura et al.(1999)Immunity 11:141

51;Nishimura et al.(2001)Science 291:319

22)。此外,已经发现PD

1在自身免疫性脑脊髓炎、全身性红斑狼疮、移植物抗宿主病(GVHD)、I型糖尿病和类风湿性关节炎中具有重要作用(Salama et al.(2003)J Exp Med 198:71

78:Prokunina and Alarcon

Riquelme(2004)Hum MoI Genet 13:R143;Nielsen et al.(2004)Lupus 11:510)。在小鼠的B细胞肿瘤系,PD

1的ITSM被证明对于阻断BCR介导的Ca
2+

flux和酪氨酸下游效应分子的磷酸化是必不可少的(Okazaki et al.(2001)PNAS 98:13866

71)。
[0005]表达在活化的T细胞上PD

1和表达在肿瘤细胞上的PD

L1之间的相互作用,会负调节免疫反应并减少抗肿瘤免疫力。PD

L1表达在多种人类癌症中(Dong et al(2002)
Nat.Med 8:787

9)。在食管癌、胰腺癌和其它类型的癌症中,PD

L1在肿瘤中的表达与生存期降低相关,突出说明该途径是肿瘤免疫治疗中有希望的新靶点。一些研究组已表明,PD
‑1‑
PD

L相互作用会恶化疾病,导致肿瘤浸润淋巴细胞的减少、T细胞受体介导的增殖的减少和癌性细胞的免疫逃避(Dong et al.(2003)J.MoI.Med.81:281

7;Blank et al.(2005)Cancer Immunol.Immunother.54:307

314;Konishi et al.(2004)Clin.Cancer Res.10:5094

100)。通过抑制PD

L1和PD

1的局部相互作用可使免疫抑制逆转,PD

1与PD

L2的相互作用被阻断时,其效果累积。
[0006]制药公司已经开发了多种针对PD

1/PD

L1通路的药物,如百时美施贵宝公司(BMS)、默克公司、罗氏公司和葛兰素史克公司(GSK)等。临床试验的数据显示了在各种肿瘤类型的患者中持久的临床活性和良好的安全性的早期证据。目前,国际上已批准了3个针对PD

1/PD

L1通路的抗体药物,分别是BMS的Nivolumab、默克的Pembrolizumab以及罗氏的Atezolizumab。Nivolumab是BMS开发的抗PD

1药物,其正在被投入到下一代领域的中心阶段。目前在6个后期研究中,在研究的5个癌症组中的3个中,治疗促使了肿瘤的缩小,其中包括72例肺癌患者中的18%、98例黑色素瘤患者中的接近三分之一和33例肾癌患者中的27%。由默克公司研制的Pembr本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗体或其抗原结合片段,其结合于PD

1的一个表位,所述表位包含:SEQ ID NO﹕24上第128、129、130、131和132位点氨基酸和第35、64、82、83位中至少一个氨基酸。2.一种抗体或其抗原结合片段,其结合于人PD

1和鼠PD

1的一个表位,其中,所述表位包括SEQ ID NO﹕24上第128、129、130、131和132位点氨基酸。3.如权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段,其中鼠PD

1是小鼠或大鼠PD

1。4.如权利要求1至3任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体a)结合于人PD

1,K
D
为2.15E

10M以下;并且b)结合于鼠PD

1,K
D
为1.67E

08M以下。5.如权利要求1至4中任一项所述的抗体,其中所述抗体具有下列性质中的至少一种:a)结合于人PD

1,K
D
为4.32E

10M至2.15E

10M,并且结合于小鼠PD

1,K
D
为5.39E

08M至1.67E

08M;b)实质上不结合于人CD28、CTLA

4;c)增加T细胞的增殖;d)增加干扰素

γ的产生;或e)增加白细胞介素

2的分泌。6.一种抗体或其抗原结合片段,其包含一个氨基酸序列,所述氨基酸序列与选自由SEQ ID NOs﹕1、2、3、4、5、6、7、8和9所组成的组中的序列具有至少70%、80%、90%或95%的同源性,其中所述抗体特异性结合PD

1。7.一种抗体或其抗原结合片段,其包含一个氨基酸序列,所述氨基酸序列选自由SEQ ID NOs﹕1、2、3、4、5、6、7、8和9所组成的组中的序列,其中所述抗体特异性结合PD

1。8.一种抗体或其抗原结合片段,包含:a)重链可变区,其具有的氨基酸序列与选自由SEQ ID NO﹕1和SEQ ID NO﹕2所组成的组中的序列具有至少70%、80%、90%或95%的同源性;以及b)轻链可变区,其具有的氨基酸序列与选自由SEQ ID NOs﹕3、4、5、6、7、8和9所组成的组中的序列具有至少70%、80%、90%或95%的同源性,其中所述抗体特异性结合PD

1。9.一种抗体或其抗原结合片段,包含:a)重链可变区,其具有的氨基酸序列选自由SEQ ID NO﹕1和SEQ ID NO﹕2组成的组中所序列;以及b)轻链可变区,其具有的氨基酸序列选自由SEQ ID NOs﹕3、4、5、6、7、8和9所组成的组中的序列,其中所述抗体特异性结合PD

1。10.一种抗体或其抗原结合片段,包含互补决定区(CDR),其具有的氨基酸序列选自由SEQ ID NOs﹕10

23所组成的组中的序列,其中所述抗体特异性结合PD

1。11.一种抗体或其抗原结合片段,包含:包含CDR1、CDR2和CDR3序列的重链可变区;以及
包含CDR1、CDR2和CDR3序列的轻链可变区,其中重链可变区CDR3序列包含选自由SEQ ID NO﹕12和SEQ ID NO﹕13所组成的组中的氨基酸序列及其保守性修饰,其中所述抗体特异性结合PD

1。12.如权利要求11所述的抗体,其中抗体轻链可变区CDR3序列包含选自由SEQ ID NOs﹕20、21、22和23所组成的组中的氨基酸序列及其保守性修饰。13.如权利要求11或12所述的抗体,其中所述重链...

【专利技术属性】
技术研发人员:郑勇李竞根纳迪
申请(专利权)人:拓石药业上海有限公司基石药业
类型:发明
国别省市:

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