【技术实现步骤摘要】
一种用于制备细菌膜泡多联疫苗的重组金黄色葡萄球菌及其制备方法和应用
[0001]本专利技术涉及生物医药
，特别涉及一种细菌膜泡多联疫苗及其制备方法。
技术介绍
[0002]金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，简称金葡菌)为一种革兰氏阳性球菌，常成葡萄状排列，在自然界分布广泛。韩国研究者率先证实金葡菌可产生并向外分泌细菌膜泡(Bacterial membrane vesicles,MVs)(Lee et al.,Proteomics,2009；9:5425
‑
36)。
[0003]MVs是细菌在生长繁殖过程中自然产生并分泌到菌体外环境的一种膜性结构，其直径为20～400nm；分泌的MVs可携带细菌来源的各种重要抗原，包括工程构建的融合蛋白质成分(Qiao et al.,Front Microbiol,2021；12:729369)。采用基因工程技术可以将具有保护作用的外源抗原基因(如其他病原体或病毒的保护性基因)与金葡菌基因组中特有的具有MV靶向功能的基因进行融合，利用目...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种用于制备细菌膜泡多联疫苗的重组金黄色葡萄球菌，其特征在于，所述重组金黄色葡萄球菌的agr系统功能失活，且含有两种或两种以上异种病原体来源的抗原肽段编码基因，所述抗原肽段编码基因分别插入到一金葡菌融合靶分子的编码基因中获得融合蛋白编码序列，所述金葡菌融合靶分子选自金黄色葡萄球菌呈现于膜泡上的蛋白质，使产生的膜泡能够呈现有两种或两种以上异种病原体来源的抗原肽段。2.如权利要求1所述的重组金黄色葡萄球菌，其特征在于，所述编码异种病原体来源的抗原肽段的核苷酸序列插入到金葡菌融合靶分子的编码基因的终止子前；所述金葡菌融合靶分子选自金葡菌金属ABC转运体底物结合蛋白(Mntc)、金葡菌烯醇化酶(Eno)、金葡菌丙酮酸脱氢酶α亚单位(PdhA)和金葡菌丙酮酸脱氢酶β亚单位(PdhB)中的一个或多个；优选地，所述金葡菌金属ABC转运体底物结合蛋白Mntc的编码基因为SEQ ID NO:10所示的mntc基因；优选地，所述金葡菌烯醇化酶Eno的编码基因为SEQ ID NO:7所示的eno基因；优选地，所述金葡菌丙酮酸脱氢酶α亚单位PdhA的编码基因为SEQ ID NO:13所示的pdhA基因；优选地，所述金葡菌丙酮酸脱氢酶β亚单位PdhB的编码基因为SEQ ID NO:16所示的pdhB基因。3.如权利要求2所述的重组金黄色葡萄球菌，其特征在于，所述异种病原体选自鼠疫耶尔森菌、金黄色葡萄球菌、类鼻疽伯克霍尔德菌和炭疽杆菌中的任一个或多个。4.如权利要求2所述的重组金黄色葡萄球菌，其特征在于，所述异种病原体来源的抗原肽段自鼠疫耶尔森菌III型分泌系统毒力因子LcrV，金葡菌肠毒素SEB,类鼻疽伯克霍尔德菌VI型分泌系统通道蛋白Hcp1和炭疽杆菌毒素成分保护性抗原Pa中的一个或多个；优选地，所述鼠疫耶尔森菌III型分泌系统毒力因子LcrV的编码基因为SEQ ID NO:8所示的lcrV基因；优选地，所述金葡菌肠毒素SEB的编码基因为SEQ ID NO:11所示的seb基因；优选地，所述类鼻疽伯克霍尔德菌VI型分泌系统通道蛋白Hcp1的编码基因为SEQ ID NO:17所示的hcp1基因；优选地，所述炭疽杆菌毒素成分保护性抗原Pa的编码基因为SEQ ID NO:14所示的pa基因。5.如权利要求2所述的重组金黄色葡萄球菌，其特征在于，所述融合蛋白编码序列选自Eno
‑
LcrV融合序列的编码核苷酸序列、Mntc
‑
SEB融合序列的编码核苷酸序列、PdhA
‑
Pa融合序列的编码核苷酸序列和PdhB
‑
Hcp1融合序列的编码核苷酸序列中的一个或多种；优选地，所述Eno
‑
LcrV融合序列的氨基酸序列为SEQ ID NO:9；所述Eno
‑
LcrV融合序列的编码核苷酸序列进一步优选为SEQ ID NO:2；优选地，所述Mntc
‑
SEB融合序列的氨基酸序列为SEQ ID NO:12；...
【专利技术属性】
技术研发人员：饶贤才，朱柯亭，陈娟，胡珍，周人杰，尚伟龙，杨裔，饶一凡，彭华刚，胡启文，王玉亭，
申请(专利权)人：中国人民解放军陆军军医大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。