制备双特异性抗体的方法技术

本发明专利技术提供一种提高双特异性抗体制备过程中重链和轻链正确配对率的方法，所述方法包括在一个Fab臂的CH1

【技术实现步骤摘要】
制备双特异性抗体的方法


[0001]本专利技术涉及生物
；具体地说，本专利技术涉及制备双特异性抗体的新方法及其应用。

技术介绍

[0002]重组单克隆抗体(mAb)能与抗原高效、高特异性结合，为生物医学和生物
提供了令人兴奋的机会。许多治疗性单克隆抗体已成功用于治疗多种疾病，包括癌症、免疫疾病和感染。此外，靶向一种以上抗原的双特异性抗体(bsAbs)已显示出极大的潜力，将最大程度提高抗体治疗的益处。
[0003]抗体是识别并特异性结合抗原的蛋白质(通常称为免疫球蛋白，Immunologlobulin,简写为Ig)。在包括人和小鼠在内的大多数哺乳动物中，免疫球蛋白由两条相同的重链和两条相同的轻链组成。每条重链和轻链可分为两部分：恒定区(C)和可变区(V)。基于抗体重链恒定区结构的不同，免疫球蛋白可以分为五个类别：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM。每个类别都可以具有kappa(κ)或lambda(λ)轻链。基于重链结构，人IgG可以分为四个亚类：IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。全长IgG包含两个相同的重链和两个相同本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高双特异性抗体制备过程中重链和轻链正确配对率的方法，所述方法包括以下步骤：在一个Fab臂的CH1-CL结构域，通过氨基酸取代消除天然的链间二硫键，同时通过氨基酸取代形成工程改造的链间二硫键。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，IgG1的CH1-CL结构域中形成工程改造的链间二硫键的氨基酸选自下表：3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，IgG1的CH1-CL结构域中形成工程改造的链间二硫键的氨基酸选自下组，其中每对半胱氨酸突变按以下方式列出：重链中选定的氨基酸[EU编号]突变为半胱氨酸/kappa链中选定的氨基酸[EU编号]突变为半胱氨酸：F126C/F118C、L128C/P120C、A129C/P120C、P130C/F118C、S132C/F118C、K133C/S121C、S134C/F118C、G166C/T172C、G166C/S174C、G166C/T180C、H168C/T180C、F170C/Q160C、F170C/T164C、F170C/T172C、F170C/S174C、F170C/S176C、F170C/T180C、P171C/T172C、P171C/S174C、P171C/T180C、V173C/S174C、Q175C/S174C、Q175C/S176C、Q175C/T180C、S176C/S162C、S181C/T172C、S181C/S176C、S181C/T180C、S183C/S114C、S183C/F118C、S183C/Q160C、S183C/S174C、S183C/T178C、S183C/T180C、V185C/T172C、V185C/S174C、V185C/T178C、V185C/T180C、T187C/S114C、T187C/T172C、T187C/S174C、T187C/T178C、K218C/F118C、S219C/F116C、S219C/F118C、S219C/P120C。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，IgG1的CH1-CL结构域中形成工程改造的链间二硫键的氨基酸选自下表：
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，IgG1的CH1-CL结构域中形成工程改造的链间二硫键的氨基酸选自下组，其中每对半胱氨酸突变按以下方式列出：重链中选定的氨基酸[EU编号]突变为半胱氨酸/lambda链中选定的氨基酸[Kabat编号]突变为半胱氨酸S132C/S121C、K133C/T116C、K133C/P211C、S136C/S121C、F170C/G158C、P171C/T162C、P171C/P164C、S176C/T162C、L179C/G158C、S181C/P164C、V215C/T116C、E216C/F118C。6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，IgG4的CH1-CL结构域中形成工程改造的链间二硫键...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜有为，徐飞，李发慧，郑奔，刘金贵，
申请(专利权)人：杭州菁因康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：